Руководитель Управления
Роспотребнадзора по
______________________________ _____________ (Ф.И.О.)
(субъект Российской Федерации) (подпись)
--------------------------------
<1> От каждой дикой водоплавающей птицы отбирают материал в количестве 6 биопроб (кусочки трахеи, легких, кишечника, селезенки и мазки из трахеи и клоаки).
<2> От каждой домашней птицы (куры, утки, гуси, индюки) отбирают материал в количестве 2 биопроб (мазки из клоаки и трахеи).
к Приказу Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека
от 30 сентября 2013 г. N 714
ДЛЯ СПЕЦИАЛИСТОВ ОРГАНИЗАЦИЙ РОСПОТРЕБНАДЗОРА
В СУБЪЕКТАХ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ПО ОТБОРУ, СБОРУ
И ТРАНСПОРТИРОВКЕ ПРОБ МАТЕРИАЛА ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
НА ВИРУСЫ ГРИППА
Работы проводятся в полевых условиях или специальных помещениях учреждений здравоохранения.
от животных с целью диагностики вируса гриппа птиц
с помощью молекулярных методов
Все работы по сбору, хранению и транспортировке полевого материала, подозрительного на содержание вируса гриппа птиц типа A, проводят в соответствии с санитарно-эпидемиологическими правилами СП 1.2.036-95 "Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I - IV групп патогенности".
Работу по сбору полевого материала проводят в сезонной защитной одежде, дополненной респиратором, защитными очками и резиновыми перчатками.
Мазки из клоаки и трахеи берут сухими стерильными зондами с ватными тампонами. После забора материала тампон (рабочую часть зонда) помещают в стерильную одноразовую криопробирку с 1 мл стерильного фосфатно-солевого буферного раствора. Конец зонда отламывают или отрезают с расчетом, чтобы он позволил закрыть крышку пробирки.
Фекалии птиц следует собирать стерильным шпателем или стерильной ватной палочкой в пробирку. Объем образца - приблизительно 1 мл. Пробирку маркировать. Обязательно следует брать единичный (отдельный) образец свежих, невысохших, недолго лежащих фекалий. При долгом нахождении на открытом воздухе вирус разрушается под действием высыхания, ферментов фекалий и солнечного ультрафиолета. Можно собирать свежие образцы при взлете моновидовой стаи птиц. В этом случае фиксировать вид птицы. При невозможности идентификации вида птицы фиксировать приблизительно группу птиц, например: утка, кулик, чайка, крачка и т.д. Можно делать фото для последующего определения.
Криопробирки маркируются и помещаются в штатив для криопробирок. Закрытый штатив с криопробирками помещают в термоконтейнер, содержащий сухой лед в количестве, достаточном для поддержания отрицательной температуры до доставки образцов в лабораторию, где штатив с образцами помещают в низкотемпературное хранилище при температуре ниже минус 40 °C, не допуская оттаивания образцов. На маркировке обязательно должно быть отражено: полевой номер образца, время и место сбора, вид птицы, от которой взята проба. Допускается маркировка только полевым номером, тогда вся дополнительная информация заносится в полевой журнал.
Состав фосфатно-солевого буферного раствора (ФСБР): NaCl - 8 г, KCl - 0,2 г,
- 1,15 г, - 0,2 г, Внутренние органы (фрагменты трахеи, легких, селезенки, мозга, синусы, воздухоносные мешки, кишечник) от забитой или павшей птицы, птенцов, а также мелких млекопитающих получают при вскрытии животных. При заборе проб органов используют стерильный хирургический инструмент (ножницы, скальпели, пинцеты) и стерильную посуду. Перед вскрытием тушку погружают в дезинфицирующий раствор (5% хлорамин Б) на 20 - 30 сек. При взятии проб органов животных место будущего разреза обрабатывают 5%-ным раствором йода или 70%-ным раствором этилового спирта и стерильными инструментами разрезают кожу, мышцы брюшной стенки или кости черепа.
Разрез стенки брюшной полости делают "фартуком", доводя боковые линии разреза по ребрам выше уровня сердца, и откидывают образовавшийся лоскут, чтобы обнажить внутренние органы. Перед взятием головного мозга срезают всю затылочную часть черепа. С помощью второго набора инструментов отсекают кусочки внутренних органов размером от небольшой горошины до лесного ореха, над пламенем горелки укладывают пробы в стерильные одноразовые пластиковые пробирки или контейнеры, герметично закрывают.
Криопробирки маркируются и помещаются в штатив для криопробирок. Закрытый штатив с криопробирками помещают в термоконтейнер, содержащий сухой лед в количестве, достаточном для поддержания отрицательной температуры до доставки образцов в лабораторию, где штатив с образцами помещают в низкотемпературное хранилище при температуре ниже минус 40 °C, не допуская оттаивания образцов. На маркировке обязательно должно быть отражено: полевой номер образца, время и место сбора, вид птицы, от которой взята проба. Допускается маркировка только полевым номером, тогда вся дополнительная информация заносится в полевой журнал.
Транспортный термоконтейнер обертывают бумагой (обшивают материалом), ошнуровывают, опечатывают и транспортируют в лабораторию с нарочным. К доставляемому материалу прилагают сопроводительное письмо, акт упаковки. На термоконтейнере должен быть особый знак (ярлык с отметкой) "Опасно! Не открывать во время перевозки". Если предполагается хранение и транспортировка материала в термоконтейнере с сухим льдом, для забора материала используют герметичные пластиковые контейнеры, устойчивые к низким температурам, или криопробирки. Контейнеры с сухим льдом запрещается закрывать герметически, чтобы не препятствовать выходу медленно испаряющейся углекислоты. При работе с сухим льдом используют защитные хлопчатобумажные перчатки.
Для обеспечения биологической безопасности работ при проведении эпизоотологического мониторинга в потенциальных природных очагах гриппа птиц необходимо учитывать следующее:
- в проведении обследования участвуют сотрудники противочумных учреждений, а также могут привлекаться сотрудники других медико-биологических организаций и Институтов, имеющих допуск к работе с ПБА I - II групп патогенности. Вспомогательный персонал (водители, стрелки и т.п.) допускается к работе после проведения инструктажа;
- весь состав отряда или экспедиции должен быть ознакомлен с требованиями биологической безопасности при работе с возбудителями природно-очаговых инфекций, циркулирующих на данной территории. Ответственным за соблюдение этих требований при проведении отлова диких животных и сбора полевого материала является руководитель (начальник) эпидемиологического отряда (экспедиции);
- любой материал считается потенциально опасным в отношении возможного содержания возбудителей природно-очаговых болезней, свойственных той ландшафтной зоне, в пределах которой он собран;
- рекогносцировочное обследование местности, установку орудий лова осуществляют в специальной одежде (комбинезон или противоэнцефалитный костюм, сапоги);
- проверку выставленных орудий лова и сбор полевого материала проводят в рабочей одежде, дополненной фартуками и нарукавниками из водонепроницаемой ткани (пленки), резиновыми перчатками (2 пары) (по окончании работ фартуки, нарукавники и перчатки дезинфицируют);
- для защиты органов дыхания используют одноразовые ватно-марлевые повязки или противопылевые респираторы (предпочтение отдается респираторам "Лепесток" или респираторам класса не ниже FFP2);
- защиту органов зрения осуществляют плотно прилегающими очками;
- дезинфекцию орудий лова и других инструментов проводят ежедневно по окончании работы путем прогревания на солнце (в летнее время), кипячения, обработки дезинфицирующими растворами с последующим проветриванием, ящики и отсадники обрабатываются дезинфицирующими растворами;
- разбор полевого материала, вскрытие животных проводят в противочумном костюме I типа (защита органов дыхания аналогична п. 6 настоящего раздела, особенности забора материала и подготовки проб для транспортировки в лабораторию изложены в разделе 4.4 "Сбор полевого материала для лабораторного исследования");
- по окончании работ, приведенных в п. 9, инструменты и защитную одежду дезинфицируют (см. Приложение 4), использованные наконечники, пипетки обеззараживают погружением в 6%-й раствор перекиси водорода на 60 мин., дозаторы обеззараживают двукратным протиранием с интервалом 15 мин. 6%-м раствором перекиси водорода (экспозиция 120 мин.);
- остатки полевого материала, не подлежащего лабораторному исследованию, сжигают или обеззараживают автоклавированием, образовавшиеся отходы помещают в вырываемые ямы, которые закапывают;
- транспортировку материала в диагностическую лабораторию осуществляют транспортом экспедиции;
- участники экспедиции подвергаются ежедневной термометрии, по окончании работ устанавливается обсервация сроком 7 дней;
- аптечка экстренной профилактики должна быть укомплектована в соответствии с санитарно-эпидемиологическими правилами СП 1.3.1285-03 "Безопасность работы с микроорганизмами I - II групп патогенности (опасности)" и дополнена двумя из следующих противовирусных препаратов: озельтамивир, занамивир.
от людей с целью диагностики вируса гриппа
с помощью молекулярных методов
Сбор клинического материала и его упаковку осуществляет медицинский работник медицинского учреждения, обученный требованиям и правилам биологической безопасности при работе и сборе материала, подозрительного на зараженность ВГПА. Забор производят в стерильные одноразовые флаконы, пробирки, контейнеры стерильными инструментами. Все виды работ проводят с соблюдением противоэпидемического режима, согласно санитарно-эпидемиологическим правилам СП 1.3.1285-03 "Безопасность работы с микроорганизмами I - II групп патогенности (опасности)".
Упаковка, условия хранения и транспортирования материала для проведения лабораторной диагностики ВГПА должны соответствовать требованиям санитарно-эпидемиологических правил СП 1.2.036-95 "Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I - IV групп патогенности".
Для исследования забирают следующие виды клинического материала:
- смывы из полости носа и ротоглотки;
- мазки из полости носа;
- носоглоточное отделяемое.
Перечисленные выше процедуры по забору клинического материала врачи осуществляют в противочумных костюмах IV типа (или длинном хирургическом халате, с завязками на спине, шапочках), дополненных ватно-марлевыми повязками или респираторами типа ШБ-1 (или РБ) "Лепесток-200". На руки надевают резиновые перчатки. Целесообразно также включать в исследование аспираты из трахеи, бронхоальвеолярный лаваж и биоптаты легких при возможности их забора.
Данные процедуры осуществляет врачебный персонал, одетый в противочумный костюм I типа (или длинный хирургический халат, с завязками на спине, дополненный фартуком, бахилами, косынкой, очками, ватно-марлевой повязкой или респиратором типа ШБ-1 (или РБ) "Лепесток-200" и перчатками). Выбор времени забора клинического материала очень важен, так как наиболее высокое содержание вируса в дыхательных органах человека регистрируется в течение первых четырех дней после появления признаков заболевания. Образцы должны быть собраны в течение 3 сут. после появления клинических признаков. Для постмортальной диагностики используют аутоптаты легких, трахеи и селезенки. От одного больного должно забираться не менее двух видов клинического материала. Обязательно следует забирать мазки из полости носа и ротоглотки. Каждый образец материала помещают в отдельную транспортную криопробирку, содержащую транспортную среду, пробирка плотно герметично закрывается, после чего помещается в штатив для криопробирок. На маркировке обязательно должно быть отражено: номер образца, время и место сбора.
Допускается маркировка только номером, тогда вся дополнительная информация заносится в журнал, где указывается наименование направляющего учреждения, Ф.И.О. больного, возраст, место жительства, предварительный диагноз, эпидемиологический анамнез, вид материала, дата и время взятия материала.
Закрытый штатив с криопробирками помещают в термоконтейнер, содержащий сухой лед в количестве, достаточном для поддержания отрицательной температуры до доставки образцов в лабораторию, где штатив с образцами помещают в низкотемпературное хранилище при температуре ниже минус 40 °C, не допуская оттаивания образцов. К наружной стенке термоконтейнера или термоса прикрепляют этикетку с указанием вида материала, условий транспортирования, названия пункта назначения. Транспортирование проб клинического материала в референс-лабораторию, вирусологические лаборатории и лаборатории учреждений противочумной системы Роспотребнадзора осуществляется нарочным(и), информированным о правилах доставки материала в соответствии с п. 3.4 санитарно-эпидемиологических правил СП 1.2.036-95 "Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I - IV групп патогенности".
Транспортный термоконтейнер обертывают бумагой (обшивают материалом), ошнуровывают, опечатывают и транспортируют в лабораторию с нарочным. К доставляемому материалу прилагают сопроводительное письмо, акт упаковки. На термоконтейнере должен быть особый знак (ярлык с отметкой) "Опасно! Не открывать во время перевозки". Если предполагается хранение и транспортировка материала в термоконтейнере с сухим льдом, для забора материала используют герметичные пластиковые контейнеры, устойчивые к низким температурам, или криопробирки. Контейнеры с сухим льдом запрещается закрывать герметически, чтобы не препятствовать выходу медленно испаряющейся углекислоты. При работе с сухим льдом используют защитные хлопчатобумажные перчатки.
Рекомендуется использование следующей стабилизирующей среды для хранения и транспортировки материала от людей для дальнейших вирусологических исследований:
Состав:
- среда для культур клеток N199, содержащая 0,5% BSA;
фильтрованием через нитроцеллюлозный стерильный фильтр в стерильную же посуду: пенициллин -
Среда готовится в стерильных условиях, автоклавирование не допускается, можно стерилизовать фильтрованием.
и транспортирования клинического материала
для лабораторной диагностики вируса гриппа
Мазки из ротоглотки
Мазки берут сухими стерильными зондами с ватными тампонами вращательными движениями с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки после предварительного полоскания полости рта водой. После взятия материала тампон (рабочую часть зонда с ватным тампоном) помещают в стерильную одноразовую пробирку с 500 мкл стерильной стабилизирующей среды. Конец зонда отламывают или отрезают с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть крышку пробирки. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрывают.
Мазки из полости носа
Мазки (слизь) берут сухими стерильными зондами с ватными тампонами. Зонд с ватным тампоном вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2 - 3 см до нижней раковины. Затем зонд слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа. После взятия материала тампон (рабочую часть зонда с ватным тампоном) помещают в стерильную одноразовую микропробирку с 500 мкл стерильной стабилизирующей среды. Конец зонда отламывают или отрезают с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть крышку пробирки. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрывают.
При работе соблюдают требования санитарно-эпидемиологических правил СП 1.2.036-95 "Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I - IV групп патогенности".
к Приказу Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека
от 30 сентября 2013 г. N 714
о результатах исследования биопроб
на наличие вируса гриппа A
Цель исследования: ПЦР-диагностика вируса гриппа A в биопробах от диких птиц (домашних птиц, людей).
Материал для исследования: _____ биопроб от _____ диких птиц, _____ биопроб от _____ домашних птиц, _____ биопроб от _____ человек.
Методы исследования:
Работа выполнялась в соответствии со следующими нормативными документами:
- Методические указания МУ 1.3.2569-09 "Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I - IV групп патогенности";
- Стандартная операционная процедура СОП N _________ "Предварительная обработка биопроб для вирусологических исследований";
- Стандартная операционная процедура СОП N __________ "Выделение РНК из материала, подозрительного на зараженность РНК-содержащими вирусами II - III групп патогенности";
- Стандартная операционная процедура СОП N __________ "Проведение обратно-транскриптазной полимеразной цепной реакции для выявления РНК вирусов II - III групп патогенности".
Для работы использовали:
- набор реагентов ____________ (серия N ______, срок годности до ______),
- набор реагентов __________ (серия N _______, срок годности до ______).
Таблица 1
Результаты ПЦР-диагностики
(с образцом заполнения по видам проб)
--------------------------------
Таблица 2
(образец заполнения)
Заключение
1. В результате проведения ПЦР-диагностики _____ шт. биопроб, полученных из _________________________, определено, что в ____ шт. биопроб выявлена РНК вируса гриппа A. Первичные данные приведены в таблице 2.
2. Биопробы, содержащие РНК вируса гриппа A, в количестве _____ шт. направлены "___" ________ 201_ г. в ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор" с соблюдением условий транспортировки для проведения субтипирования, выделения вируса гриппа и его углубленного изучения.
Зав. вирусологической
(микробиологической) лабораторией _______________ (Ф.И.О.)
подпись
Главный врач ФБУЗ "Центр гигиены
и эпидемиологии в
______________________________" _______________ (Ф.И.О.)
субъект Российской Федерации подпись
Вернуться в "Каталог нормативных документов"
Источник информации: https://internet-law.ru/documents/dop_documents/66/mr_3_53668/0/prika.html
На правах рекламы:
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||