"ГОСТ Р 53162-2008 (ИСО 16050:2003). Национальный стандарт Российской Федерации. Продукты пищевые. Определение афлатоксина B1 и общего содержания афлатоксинов B1, B2, G1 и G2 в зерновых культурах, орехах и продуктах их переработки. Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии"
(утв. и введен в действие Приказом Ростехрегулирования от 18.12.2008 N 600-ст)

Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. N 184-ФЗ "О техническом регулировании", а правила применения национальных стандартов Российской Федерации - ГОСТ Р 1.0-2004 "Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения".

1. Подготовлен ОАО "Всероссийский научно-исследовательский институт сертификации" (ОАО "ВНИИС") на основе русской версии стандарта, указанного в пункте 4.

2. Внесен Техническим комитетом по стандартизации ТК 335 "Методы испытаний агропромышленной продукции на безопасность".

3. Утвержден и введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 18 декабря 2008 г. N 600-ст.

4. Настоящий стандарт является модифицированным по отношению к международному стандарту ИСО 16050:2003 "Продукты пищевые. Определение афлатоксина и общего содержания афлатоксинов и в зерновых культурах, орехах и продуктах переработки. Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии" (ISO 16050:2003 "Foodstuffs - Determination of aflatoxin and the total content of aflatoxin and in cereals, nuts and derived products - High-performance liquid chromatographic method"). При этом дополнительные положения и требования, включенные в текст национального стандарта, приведены для учета потребностей национальной экономики Российской Федерации и особенностей российской национальной стандартизации и выделены курсивом.

При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных международных стандартов соответствующие им национальные стандарты Российской Федерации, сведения о которых приведены в дополнительном Приложении B.

5. Введен впервые.

#Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячно издаваемых информационных указателях "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет.#

#Настоящий стандарт устанавливает метод высокоэффективной жидкостной хроматографии с обращенной фазой, с очисткой на иммуноаффинной колонке и послеколоночной дериватизацией, для определения афлатоксинов в зерновых культурах, орехах и продуктах переработки.

Предел количественного определения афлатоксина и суммы афлатоксинов и - 8 мкг/кг.#

Данный метод применим в отношении кукурузы с содержанием 24,5 мкг/кг, арахисового масла с содержанием 8,4 мкг/кг и сырых арахисовых орехов с содержанием 16 мкг/кг общей суммы афлатоксинов. Метод допускается использовать для масличных культур, сушеных фруктов и продуктов их переработки.

#Настоящий стандарт допустимо использовать только после уточнения условий измерений в конкретной лаборатории, валидации полученной процедуры измерений применительно к решению поставленной аналитической задачи (к конкретным объектам, конкретным диапазонам измерений и т.п.), разработки документа на методику и ее аттестации в соответствии с ГОСТ Р 8.563.#

#В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ Р 8.563-96 Государственная система обеспечения единства измерений. Методики выполнения измерений

ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения

ГОСТ Р 52501-2005 (ИСО 3696-1987) Вода для лабораторного анализа. Технические условия

ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 4159-79 Реактивы. Йод. Технические условия

ГОСТ 4204-77 Реактивы. Кислота серная. Технические условия

ГОСТ 4233-77 Реактивы. Натрий хлористый. Технические условия

ГОСТ 5789-78 Реактивы. Толуол. Технические условия

ГОСТ 6995-77 Реактивы. Метанол-яд. Технические условия

ГОСТ 22524-77 Пикнометры стеклянные. Технические условия

Примечание. При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодно издаваемому указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.#

Анализируемый образец экстрагируют смесью метанола и воды. Экстракт образца фильтруют, разбавляют водой и вводят в колонку для аффинной хроматографии, содержащую антитела, специфичные для афлатоксинов и Афлатоксины выделяют, очищают и концентрируют на колонке, после чего отделяют от антител при помощи метанола. Афлатоксины определяют количественно при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с обращенной фазой с определением флуоресценции и послеколоночной дериватизацией.

#При отсутствии специальных указаний используют реактивы только признанных аналитических марок квалификации х.ч. или ч.д.а.#

4.1. Вода, соответствующая #не ниже 1-й степени по ГОСТ Р 52501.

Вода не должна содержать органические примеси.#

4.2. Хлорид натрия #по ГОСТ 4233.#

4.3. Йод кристаллический по #ГОСТ 4159.#

4.4. Афлатоксин, кристаллический или в виде пленочной ампулы.

Предупреждение. Афлатоксины канцерогенны для человека. Следует принимать во внимание заявление, сделанное Международным агентством по исследованиям в области рака (ВОЗ) (см. [1], [2]).

Необходимо надлежащим образом предохранять лабораторию, в которой проводятся анализы, от дневного света. Для этого закрывают окна фольгой, поглощающей ультрафиолетовое излучение. Допускается использовать в комбинации с затемненным освещением (когда отсутствует прямое солнечное освещение) занавески или шторы в комбинации с искусственным освещением.

4.5. Ацетонитрил, степень чистоты для ВЭЖХ.

4.6. Метанол, #ГОСТ 6995,# степень чистоты ВЭЖХ.

4.7. Толуол, #ГОСТ 5789.#

Предупреждение. Толуол огнеопасен и токсичен. Приготовление стандартов с использованием данного растворителя следует проводить в вытяжном шкафу. Операции за пределами вытяжного шкафа, такие как измерение эталонов методом УФ спектрометрии, следует проводить с использованием эталонов в закрытых контейнерах.

4.8. Смесь толуол/ацетонитрил

Смешивают 98 объемных частей толуола (4.7) с двумя объемными частями ацетонитрила (4.5) (см. предупреждение в 4.7).

4.9. Растворитель для экстракции

Смешивают семь объемных частей метанола (4.6) с тремя объемными частями воды (4.1).

Другие смеси - растворители для экстракции, которые совместимы с подвижной фазой, могут также использоваться, если покажут себя более эффективными или будут рекомендованы производителем иммуноаффинной колонки.

4.10. Подвижная фаза

Смешивают три объемные части воды (4.1) с одной объемной частью ацетонитрила (4.5) и одной объемной частью метанола (4.6). Перед использованием проводят дегазацию раствора.

4.11. Реагент для послеколоночной дериватизации

Растворяют 100 мг йода (4.3) в 2 #см3# метанола (4.6). Добавляют 200 #см3# воды (4.1), перемешивают в течение 1 ч, фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм (5.8). Раствор готовят на неделю использования и хранят в темноте или в склянке из коричневого стекла. Перед использованием раствор встряхивают в течение 10 мин.

4.12. Основные стандартные растворы афлатоксинов и 

Предупреждение. Предохраняйте растворы, содержащие афлатоксины, от действия света (храните в темноте, используйте алюминиевую фольгу или затемненную стеклянную посуду).

Афлатоксины и растворяют по отдельности в смеси толуол/ацетонитрил (4.8), для получения индивидуальных растворов с массовой концентрацией вещества 10 мкг/#см3.#

Для определения точной концентрации афлатоксина в каждом исходном растворе регистрируют спектр поглощения при длинах волн от 330 до 370 нм в кварцевых кюветах толщиной 1 см (5.7), используя спектрометр (5.6). Рассчитывают концентрацию каждого афлатоксина мкг/#см3#, используя уравнение (1):

где - оптическая плотность, определяемая в максимуме спектра поглощения;

- молекулярная масса каждого афлатоксина, г/моль;

- коэффициент молярного поглощения каждого афлатоксина в смеси толуол/ацетонитрил.

Примечание. Это значение определено для раствора, который содержит c = 1 моль/дм3 афлатоксина и находится в кюветах с длиной оптического пути d = 1 см. Коэффициент молярного поглощения применяют без единиц измерения, допускается применять уравнение ему соответствует единица измерений: 

d - длина оптического пути кюветы, см.

и приведены в таблице 1.

4.13. Основной стандартный раствор смеси афлатоксинов

Готовят исходный раствор, содержащий 500 нг/#см3# афлатоксина 125 нг/#см3# афлатоксина 250 нг/#см3# афлатоксина и 125 нг/#см3# афлатоксина в смеси толуол/ацетонитрил (4.8). При необходимости хранения раствора взвешивают колбу. Колбу плотно оборачивают алюминиевой фольгой и хранят при температуре около 4 °C. Непосредственно перед использованием колбу взвешивают снова и отмечают любые изменения в массе после хранения.

Примечание. Обычное воздействие УФ-излучения во время измерения оптической плотности не приводит к заметной конверсии с образованием продуктов фотолиза.

4.14. Градуировочный раствор смеси афлатоксинов

Каждую порцию основного стандартного раствора смеси афлатоксинов (4.13), как это указано в таблице 2, переносят в четыре мерные колбы вместимостью 2 #см3# (5.5). Растворы выпаривают до сухого остатка в токе азота при комнатной температуре. В каждую колбу добавляют 1 см3 метанола (4.6). Растворяют в нем сухой остаток, разбавляют раствор до метки водой (4.1) и перемешивают. Растворы готовят непосредственно в день использования.

4.15. Серная кислота по #ГОСТ 4204#, раствор c = 2 моль/дм3.

Лабораторную стеклянную посуду, которая контактирует с водными растворами афлатоксинов в серной кислоте (4.15), погружают в воду на несколько часов, затем тщательно промывают (например, три раза) водой, чтобы удалить все следы кислоты. Отсутствие кислоты проверяют с помощью индикаторной бумаги.

Примечание. Данная обработка является необходимой, так как использование стеклянной посуды, промытой не кислотой, может привести к потере афлатоксинов. На практике данная обработка необходима для круглодонных колб, мерных колб, мерных цилиндров, склянок или пробирок, используемых для градуировочных растворов и конечных экстрактов (особенно автоматических пипеток), а также пастеровских пипеток, если они используются для переноса градуировочных растворов или экстрактов.

Обычное лабораторное оборудование и, в частности, то, которое приводится ниже.

5.1. Иммуноаффинная (IA) колонка

IA колонка содержит антитела, предназначенные для афлатоксинов и Колонка должна иметь минимальную емкость не менее 100 нг афлатоксина и должна давать выход не менее 80% для афлатоксинов и и не менее 60% для афлатоксина при внесении в колонку 15 #см3# градуировочного раствора, содержащего 5 нг каждого афлатоксина в смеси метанол/вода [одна часть метанола (4.6) и три - четыре части воды (4.1) по объему]. Колонка должна быть оборудована подходящей емкостью для растворителя (например, шприцем с переходной насадкой).

5.2. Блендер, с баком смесителя на 500 мл и крышкой

Рекомендуется использование высокоскоростного блендера.

5.3. Рифленая фильтровальная бумага, например, диаметром 24 см.

5.4. Фильтровальная бумага из стеклянного микроволокна, например, диаметром 11 см.

5.5. Мерные колбы #по ГОСТ 1770#, вместимостью 2 #см3 или пикнометры по ГОСТ 22524.#

Примечание. При использовании пикнометров рекомендуется измерять фактическое значение вместимости и использовать его при обработке результатов измерений в качестве величины [см. формулу (3)].

5.6. Спектрофотометр, #предназначенный для измерения оптической плотности в диапазоне# длин волн от 200 до 400 нм.

5.7. Кюветы из кварцевого стекла толщиной 1 см, не имеющие существенного поглощения в диапазоне длин волн от 300 до 370 нм.

5.8. Мембранный фильтр для водных растворов, изготовленный из политетрафторэтилена, диаметром 4 мм и размером пор 0,45 мкм.

5.9. Оборудование для ВЭЖХ

5.9.1. Насос ВЭЖХ, способный производить скорость потока 1 #см3#/мин.

5.9.2. Система ввода (инжектор) со шприцевой загрузкой и петлей 50 мкл или эквивалентным.

5.9.3. Аналитическая разделяющая колонка с обращенной фазой, например, С18, которая обеспечивает разрешение пиков афлатоксинов и до базовой линии от всех остальных пиков и которая имеет следующие характеристики:

- длина: 250 мм;

- внутренний диаметр: 4,6 мм;

- размер сферических частиц: 5 мкм.

Допускается использование колонки меньшей длины.

5.9.4. Система послеколоночной дериватизации, состоящая из безпульсационного насоса и тройника, имеющего очень малый мертвый объем, системы труб из политетрафторэтилена или нержавеющей стали длиной от 3000 до 5000 мм и внутренним диаметром 0,5 мм, а также водяной бани или послеколоночного реактора для реакции с участием йода.

5.10. Флуоресцентный детектор, пригодный для работы при длине волны возбуждения 365 нм и излучении при длине волны эмиссии 435 нм (для фильтровых приборов длина волны регистрации излучения > 400 нм), #с пределом детектирования не более# 0,05 нг афлатоксина В1 в объеме ввода (в данном случае он равен 50 мкл).

6.1. Общие замечания

Растворы проб и стандартные растворы для определения с помощью ВЭЖХ должны содержать одинаковый растворитель или смесь растворителей.

6.2. Экстракция

Взвешивают 25 г гомогенизированной пробы, с точностью 0,1 г в сосуде блендера (см. 5.2). Добавляют 5 г хлорида натрия (см. 4.2) и 125 #см3# растворителя для экстракции (см. 4.10) и гомогенизируют с помощью перемешивающего устройства в течение 2 мин при высокой скорости. Контролируют, чтобы время и скорость перемешивания не оказывали негативного влияния на эффективность экстракции. Смесь фильтруют через рифленую фильтровальную бумагу (см. 5.3) 

Отбирают пипеткой 15 #см3# фильтрата в коническую колбу подходящего размера со стеклянной пробкой. Добавляют 30 #см3# воды, закрывают колбу пробкой и перемешивают. Перед проведением аффинной колоночной хроматографии разбавленный экстракт фильтруют через фильтровальную бумагу из стеклянного микроволокна (5.4). Фильтрат должен быть прозрачным. Если это не так, проводят повторную фильтрацию. Незамедлительно следуют процедурам в соответствии с 6.3.

Для получения прозрачного раствора можно также использовать центрифугу.

6.3. Очистка

Готовят IA колонку (см. 5.1) и осуществляют процедуру очистки в соответствии с инструкциями производителя. Отбирают пипеткой 15 #см3# второго фильтрата в емкость для растворителя IA колонки. Пропускают его через разделяющую колонку, затем промывают колонку, как это описано в инструкциях производителя, и удаляют элюаты. Начинают проводить элюирование афлатоксинов. Собирают этанольный или ацетонитрильный элюат (в зависимости от продукта или инструкций производителя) в мерной колбе вместимостью 2 #см3# (см. 5.5) (или другого объема, установленного производителем). Разбавляют до метки водой Перемешивают и действуют в соответствии с 6.4.

Методы ввода в IA колонки, промывания и элюирования немного отличаются в зависимости от производителя колонки, и необходимо четко следовать конкретным инструкциям, прилагаемым к колонкам.

Примечание. В целом процедуры включают экстракцию образца смесью метанола и воды, фильтрацию или центрифугирование, возможное разбавление образца раствором фосфатного буфера или водой, загрузку под давлением в предварительно промытую колонку, промывку колонки дистиллированной водой и элюирование афлатоксинов метанолом или ацетонитрилом (в зависимости от продукта и инструкций производителя).

Допускается использовать традиционные колонки с силикагелем или колонки твердофазной экстракции. В этих случаях также необходимо четко следовать инструкциям производителя. Если растворитель, применяемый для элюирования афлатоксинов, несовместим с подвижной фазой, то элюат необходимо выпарить до сухого остатка в токе азота при температуре ниже 40 °C. Остаток необходимо растворить в подвижной фазе и разбавить до 2 #см3# или до того объема, который установлен производителем.

Необходимо предусмотреть, чтобы максимальная емкость колонки не была превышена.

6.4. Условия работы при выполнении ВЭЖХ

Выход разделительной колонки подсоединяют к одному ответвлению тройника системы послеколоночной дериватизации (5.9.4) с помощью короткого фрагмента системы труб с внутренним диаметром, например, 0,25 мм. Ко второму ответвлению тройника подсоединяют выход насоса, который поставляет реагент для послеколоночной дериватизации. Один конец витка труб из политетрафторэтилена или нержавеющей стали (см. 5.9.4) присоединяют к третьему ответвлению тройника и другой конец присоединяют к детектору (см. 5.10). Используя термостат или водяную баню, поддерживают температуру реакционного змеевика на уровне 70 °C.

В случае использования колонки, указанной в 5.9.3, подходящими являются следующие параметры:

- скорость потока подвижной фазы (колонка): 1,0 #см3#/мин;

- скорость потока послеколоночного реагента: 0,3 #см3#/мин;

- впрыскиваемый объем: 50 мкл.

Дают всей системе функционировать 10 - 20 мин для ее стабилизации. Если используется интегратор, настраивают регулировку чувствительности флуоресцентного детектора или интегратора, чтобы получить соответствующий сигнал: шум 5:1 для 0,125 нг афлатоксина в 50 мкл. Если используется регистрирующий прибор с ленточной диаграммой, настраивают регулировку флуоресцентного детектора таким образом, чтобы получить для 0,125 нг афлатоксина в 50 мкл от 30% до 40% шкалы #регистрирующего прибора.#

6.5. Идентификация

Проводят идентификацию каждого пика афлатоксина на хроматограмме образца путем сравнения значений времени удерживания со значениями соответствующих стандартов.

Афлатоксины можно идентифицировать одновременным вводом раствора испытуемой пробы и градуировочных растворов. Кроме того, при идентификации помогает исчезновение пиков афлатоксинов и в случае, когда не проводится добавка реагента для дериватизации.

6.6. #Построение градуировочной зависимости#

Для каждого афлатоксина строят градуировочную зависимость путем ввода 50 мкл стандартных растворов 1, 2, 3 и 4 (см. таблицу 2). Проверяют линейность зависимости (см. [3]).

6.7. Определение

Количественное определение проводится методом внешнего стандарта с интегрированием площади пика или измерением высоты пика, которые далее соотносятся с соответствующими значениями для стандарта.

В петлю инжектора вводят 50 мкл стандартного раствора в соответствии с инструкциями производителя инжектора. Афлатоксины элюируют в порядке и с временем удерживания приблизительно 6, 8, 9 и 11 мин соответственно. Пики должны быть разделены до базовой линии. При необходимости регулируют значения времени удерживания путем изменения концентрации метанола подвижной фазы (4.11).

Вводят 50 мкл очищенного экстракта образца (см. 6.3) в инжекторную петлю.

Рассчитывают массу г, анализируемой пробы, присутствующей во фракции второго фильтрата, взятого для IA колонки по формуле

где - масса пробы образца (см. 6.2), г ( г);

- общий объем первого фильтрата (см. 6.2), #см3# ( #см3#); <*>

- объем фракции первого фильтрата (см. 6.2), взятый для разбавления, #см3# ( #см3#);

- общий объем второго фильтрата (см. 6.2), #см3# ( #см3#);

- объем фракции второго фильтрата (см. 6.3), #см3# ( #см3#).

Рассчитывают массовую долю каждого афлатоксина в микрограммах на килограмм пробы, вычисляют по формуле (метод внешнего стандарта)

где - объем элюата (6.3), мкл ( мкл);

- объем очищенного и введенного экстракта образца (6.7), мкл ( мкл);

- масса #данного# афлатоксина, присутствующего в введенном объеме, соответствующая измеренной площади пика или высоте пика, определяемая по градуировочной характеристике, в нанограммах;

- масса #анализируемой# пробы, г, соответствующей фракции второго фильтрата, взятого для IA колонки [см. формулу (2)].

Для получения массовой доли суммы афлатоксинов суммируют массовые доли четырех афлатоксинов.

--------------------------------

<*> Принимая во внимание данные по точности метода, может рассматриваться как эквивалент объема растворителя экстракции.

8.1. Межлабораторное сравнительное испытание

Детали межлабораторного сравнительного испытания прецизионности данного метода приведены в Приложении A. Значения, полученные в результате межлабораторного сравнительного испытания, могут быть неприменимы к диапазонам концентраций и матрицам, отличным от тех, которые приведены в Приложении A.

8.2. Повторяемость

Абсолютная разница между двумя независимыми отдельными результатами испытаний, полученными при использовании одного и того же метода, идентичных материалов для испытаний в одной и той же лаборатории, одним и тем же оператором с использованием того же оборудования в течение короткого интервала времени, будет превышать предел повторяемости r, значения которого приведены ниже, не более чем в 5% случаев.

a) Значения для кукурузы:

- афлатоксин мкг/кг, r = 2,4 мкг/кг,

- афлатоксин мкг/кг, r = 1,0 мкг/кг,

- афлатоксин мкг/кг, r = 1,9 мкг/кг,

- афлатоксин мкг/кг, r = 0,6 мкг/кг,

- общее содержание афлатоксинов: мкг/кг.

b) Значения для арахисового масла:

- афлатоксин мкг/кг, r = 2,2 мкг/кг,

- афлатоксин мкг/кг, r = 0,3 мкг/кг,

- афлатоксин мкг/кг, r = 1,5 мкг/кг,

- афлатоксин мкг/кг, r = 0,5 мкг/кг,

- общее содержание афлатоксинов: мкг/кг.

c) Значения для арахиса:

- афлатоксин мкг/кг, r = 1,5 мкг/кг,

- афлатоксин мкг/кг, r = 0,7 мкг/кг,

- афлатоксин мкг/кг, r = 0,8 мкг/кг,

- афлатоксин мкг/кг, r = 0,8 мкг/кг,

- общее содержание афлатоксинов: мкг/кг.

Основываясь на полученных результатах, содержание афлатоксинов в арахисовом масле можно только оценить. В случае кукурузы и арахисовых орехов афлатоксины и могут быть определены, а афлатоксины и могут быть только обнаружены, и их содержание может быть оценено качественно.

8.3 Воспроизводимость

Абсолютная разница между двумя отдельными результатами испытаний, полученными при использовании одинакового метода, идентичных материалов для испытаний, в различных лабораториях, различными операторами и с использованием различного оборудования, будет превышать предел воспроизводимости R, значения которого приводятся ниже, не более чем в 5% случаев.

a) Значения для кукурузы:

- афлатоксин мкг/кг, R = 4,2 мкг/кг,

- афлатоксин мкг/кг, R = 1,2 мкг/кг,

- афлатоксин мкг/кг, R = 1,9 мкг/кг,

- афлатоксин мкг/кг, R = 1,5 мкг/кг,

- общее содержание афлатоксинов: мкг/кг.

b) Значения для арахисового масла:

- афлатоксин мкг/кг, R = 4,4 мкг/кг,

- афлатоксин мкг/кг, R = 0,6 мкг/кг,

- афлатоксин мкг/кг, R = 2,0 мкг/кг,

- афлатоксин мкг/кг, R = 0,7 мкг/кг,

- общее содержание афлатоксинов: мкг/кг.

c) Значения для арахиса:

- афлатоксин мкг/кг, R = 4,5 мкг/кг,

- афлатоксин мкг/кг, R = 1,2 мкг/кг,

- афлатоксин мкг/кг, R = 1,8 мкг/кг,

- афлатоксин мкг/кг, R = 1,4 мкг/кг,

- общее содержание афлатоксинов: мкг/кг.

Основываясь на полученных результатах, содержание афлатоксинов в арахисовом масле можно только оценить качественно. В случае кукурузы и арахиса афлатоксины и могут быть определены, а афлатоксины и могут быть только обнаружены, и их содержание может быть оценено качественно.

Протокол испытаний должен содержать:

- всю информацию, необходимую для полной идентификации образца;

- используемый метод отбора образцов, если он известен;

- используемый метод испытаний, со ссылкой на настоящий стандарт;

- детали проведения работ, не установленные в настоящем стандарте или рассматриваемые как необязательные, а также все факторы, влияющие на результат(ы) испытаний;

- полученные результат(ы) испытаний или, если была проведена проверка повторяемости, полученный окончательный результат.

Нижеприведенные данные получены в процессе межлабораторного сравнительного испытания, которое проводилось в 1999 г. и было организовано АОАС и ИЮПАК (Международный союз теоретической и прикладной химии) в соответствии с #ГОСТ Р ИСО 5725-1.# Были исследованы образцы кукурузы, арахисовых орехов и арахисового масла, имеющие естественное загрязнение и зафиксированные на уровне 10, 20 и 30 мкг/кг общей суммы афлатоксинов с соотношением афлатоксинов и - 7:1:3:1 соответственно.

В исследовании участвовало десять лабораторий, имелся один экземпляр каждого образца. Во время проведения данного межлабораторного сравнительного испытания в качестве реагента послеколоночной дериватизации использовался йод.