"ГОСТ EN 16521-2016. Межгосударственный стандарт. Продукция парфюмерно-косметическая. Метод газовой хроматографии/масс-спектрометрии для идентификации и определения 12 фталатов"
(введен в действие Приказом Росстандарта от 27.12.2023 N 1680-ст)

Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены"

1 ПОДГОТОВЛЕН республиканским унитарным предприятием "Белорусский государственный институт метрологии" (БелГИМ) на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии стандарта, указанного в пункте 5

2 ВНЕСЕН Госстандартом Республики Беларусь

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации по результатам голосования в АИС МГС (протоколом от 20 апреля 2016 г. N 87-П)

За принятие проголосовали:

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 27 декабря 2023 г. N 1680-ст межгосударственный стандарт ГОСТ EN 16521-2016 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2025 г. с правом досрочного применения

5 Настоящий стандарт идентичен европейскому стандарту EN 16521:2014 "Косметика. Аналитические методы. Метод ГХ/МС для идентификации и анализа 12 фталатов в пробах косметической продукции, готовых для аналитического инжектирования" ("Cosmetics - Analytical methods - GC/MS method for the identification and assay of 12 phthalates in cosmetic samples ready for analytical injection", IDT).

Европейский стандарт разработан техническим комитетом CEN/TC 392 "Косметика" Европейского комитета по стандартизации (CEN).

Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанного европейского стандарта для приведения в соответствие с ГОСТ 1.5-2001 (подраздел 3.6)

6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Фталаты представляют собой эфиры фталевой кислоты (рисунок 1). Приблизительно 80% всех промышленно синтезируемых фталатов приходится на так называемые "пластификаторы", придающие пластмассам гибкость без ущерба для их прочности и долговечности. Эти соединения присутствуют также в косметической продукции, такой как парфюмерные изделия и средства гигиены. Некоторые фталаты, в особенности те из них, которые обладают низкой молекулярной массой, добавляются в косметическую продукцию в качестве самостоятельных компонентов, например диэтилфталат (ДЭФ) и диметилфталат (ДМФ) служат растворителями и фиксаторами для парфюмерных композиций [1] - [3], а кроме того, ДЭФ может применяться для денатурации этанола [2], [4]. Таким образом, наличие фталатов в подобной продукции может объясняться целенаправленным добавлением их в процессе производства либо быть следствием их миграции из упаковочных материалов, если применяется пластиковая упаковка. Загрязнителями фталаты могут выступать и в том случае, если они присутствовали в процессе производства или содержались в используемом сырье. В литературе предлагаются несколько методов анализа, предназначенных для определения содержания фталатов в косметической продукции [1], [4] - [12].

В настоящем стандарте предлагается использовать метод газовой хроматографии/масс-спектрометрии (далее - ГХ/МС) для одновременного анализа содержания 12 различных фталатов согласно таблице 1 в пробах косметической продукции, готовых для аналитического инжектирования. Эти хроматографические условия не подходят для количественного определения диизононилфталата (ДИНФ) или диизодецилфталата (ДИДФ). Однако, по мнению Научного комитета по потребительским товарам [13], возможное присутствие ДИНФ и ДИДФ в косметической продукции едва ли представляет угрозу для здоровья человека. Метод ГХ/МС, основанный на химической ионизации положительных ионов с применением аммиака в качестве газа для соударений, описан в литературе для определения подобных соединений в косметической продукции [14].

Анализ выполняется на системе ГХ/МС в режиме ионизации электронным ударом (ЭУ). Разделение фталатов выполняют на капиллярной колонке размерами 30 м x 0,25 мм (внутренний диаметр) x 0,25 мкм (толщина пленки) с фазой 5%-фенил/95%-диметилполисилоксана с использованием градиента температур. Количественное определение фталатов осуществляют с применением метода внутреннего стандарта или путем внесения стандартной добавки. Пробы косметической продукции анализируются непосредственно или после их предварительного разбавления этанолом [15].

Настоящий стандарт устанавливает метод ГХ/МС, применяемый для анализа 12 фталатов, содержание 8 из которых регулируется [16]. Данный метод предназначен для исследования проб косметической продукции или сырья для производства косметической продукции, готовых для аналитического инжектирования. После разбавления проб они должны обеспечивать возможность выполнения ГХ-анализа. Данный метод не включает в себя требования по приготовлению проб косметической продукции, прямой ввод которых в газовый хроматограф невозможен.

Если не указано иное, используют реактивы со степенью чистоты "чистый для анализа".

2.3 Внутренний стандарт, в качестве внутреннего стандарта (ISTD) использован 4,4-дибромодифенил 97,0% производства Fluka <1>.

--------------------------------

<1> Это пример подходящего серийно выпускаемого продукта. Данная информация приведена для удобства пользователей настоящего стандарта и не дает оснований рассматривать указанную продукцию в качестве рекомендованной CEN.

2.4 Основной раствор внутреннего стандарта (SM-ISTD), c = 1000 мкг/мл.

Взвешивают приблизительно 10 мг 4,4-дибромодифенила (2.3) и помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл. Вначале растворяют навеску в небольшом количестве этанола (2.2), а затем этанолом доводят объем раствора до метки. Этот раствор приготавливают ежедневно.

2.5 Основной раствор фталатов, c = 500 мкг/мл (SM).

Взвешивают приблизительно по 10 мг каждого из фталатов (2.1) и помещают в мерную колбу вместимостью 20 мл. Вначале растворяют навеску в небольшом количестве этанола (2.2), а затем доливают этанол до метки. В холодильнике этот основной раствор может храниться в течение 2 нед или более.

Примечание - Ввиду малого количества ДиПФ (продается порциями по 10,0 мг) основной раствор данного фталата приготавливают отдельно от остальных. Таким образом, должны быть приготовлены два промежуточных основных раствора SM-1 и SM-2 с концентрацией 1000 мкг/мл. Если SM-1 приготавливают, помещая 10 мг каждого фталата (2.1), за исключением ДиПФ, в мерную колбу вместимостью 10,0 мл, то для приготовления SM-2 взвешивают 5,0 мг ДиПФ (2.1) и помещают в мерную колбу вместимостью 5,0 мл. Готовый основной раствор SM получают, смешивая равные количества двух стандартных растворов (c = 500 мкг/мл). В холодильнике все эти основные растворы могут храниться в течение 2 нед или более.

Помещают 1,0 мл основного раствора фталатов SM (2.5) в мерную колбу вместимостью 10,0 мл и доливают этанол (2.2) до метки (c = 50 мкг/мл). Из этого промежуточного раствора (S1) приготавливают по меньшей мере 5 калибровочных растворов, смешивая его с этанолом (2.2), после добавления 100 мкл основного раствора внутреннего стандарта (SM-ISTD). Значения концентрации калибровочных растворов могут варьироваться от 0,25 до 5,0 мкг/мл с постоянной концентрацией ISTD, равной 10,0 мкг/мл. Эти калибровочные растворы приготавливают непосредственно перед проведением испытаний.

Если пробы косметической (парфюмерной) продукции непосредственно приготавливаются в хроматографической виале вместимостью 1,5 мл согласно 4.2, то в процесс приготовления калибровочных растворов необходимо внести соответствующие изменения: калибровочные растворы в диапазоне концентраций от 0,25 до 5,0 мкг/мл приготавливают без использования внутреннего стандарта, вместо этого 10 мкл основного раствора внутреннего стандарта (SM-ISTD) добавляют непосредственно в хроматографическую виалу вместимостью 1,5 мл из расчета на 1,0 мл каждого калибровочного раствора. Эти калибровочные растворы приготавливают по мере необходимости непосредственно перед использованием. Виалы встряхивают, затем вводят раствор в хроматограф.

Подтверждена эффективность использования следующих параметров:

Газохроматографическая колонка с низко летучей неподвижной фазой: 5%-фенил-95%-диметилполисилоксан, 30 м x 0,25 мм (внутренний диаметр) x 0,25 мкм или аналогичная.

Чистота каждого определяемого фталата и внутреннего стандарта, а также соответствующие процентные доли геометрических изомеров (н-пентилизопентилфталат - ДПФ) подлежат определению при помощи ГХ с пламенно-ионизационным детектором для дальнейших расчетов.

1,0 г пробы косметической продукции, готовой для аналитического инжектирования, помещают в мерную колбу вместимостью 10,0 мл и доводят объем этанолом (2.2) до метки после добавления 100 мкл основного раствора внутреннего стандарта (SM-ISTD). Полученный раствор вводят в хроматограф. В случае избыточной концентрации фталатов пробу предварительно разбавляют до приемлемого значения. Предел количественного определения с использованием подготовленной таким образом пробы устанавливается равным 5 млн^-1 (ppm).

Альтернативным способом подготовки пробы косметической продукции является ее приготовление непосредственно в газохроматографической виале вместимостью 1,5 мл. 10 мкл основного раствора внутреннего стандарта (SM-ISTD) добавляют к 1,0 мл пробы косметической (парфюмерной) продукции. Виалы встряхивают, затем вводят раствор в хроматограф. Предел количественного определения с использованием подготовленной таким образом пробы устанавливается равным 0,5 млн^-1 (ppm). Калибровочные растворы приготавливают, как описано в 2.6.

При использовании указанного оборудования (3.2) и колонки (3.4) доказана целесообразность применения следующих условий:

Примеры хроматограмм, которые были получены с использованием программы ГХ/МС, описанной в таблице 2, приведены в приложении A (рисунок A.1).

Обнаружение и количественное определение могут выполняться путем оценки масс-спектров отдельных фталатов. Значения относительного удерживания (ОУ), отношения масса/заряд ионов, используемых для количественного определения, а также отношения интенсивности пиков ионов, получаемых на стандартном растворе для каждого фталата, приведены в таблице 3.

1) от 2,5 мин - ионы 135; 163; 194 (минимальное время выдержки 50 мс/ион);

2) от 4,0 мин - ионы 105; 149; 177 (минимальное время выдержки 50 мс/ион);

3) от 5,0 мин - ионы 104; 149; 223 (минимальное время выдержки 50 мс/ион);

4) от 7,0 мин - ионы 59; 104; 149; 205; 223 (минимальное время выдержки 30 мс/ион);

5) от 8,2 мин - ионы 104; 149; 219; 237; 310; 312 (минимальное время выдержки 25 мс/ион);

6) от 10,5 мин - ионы 57; 71; 97 (минимальное время выдержки 50 мс/ион);

7) от 13,0 мин - ионы 91; 149; 206 (минимальное время выдержки 50 мс/ион);

8) от 16,5 мин - ионы 149; 167; 225; 226; 249; 279 (минимальное время выдержки 25 мс/ион);

9) от 20,0 мин - ионы 149; 167; 279 (минимальное время выдержки 50 мс/ион).

Значения времени удерживания для каждой группы должны определяться после ввода в хроматограф.

Примечание 1 - Корректное минимальное время выдержки на ион для окна SIM, включающего три фрагмента, составляет 50 мс. В случае с 6 ионами может применяться время выдержки из расчета 25 мс/ион. Для приемлемого количественного определения необходимо получить не менее 10 точек на каждый пик.

Значения относительного удерживания для каждого фталата должны определяться после ввода в хроматограф стандартного раствора. Время удерживания ISTD (4,4-дибромодифенил) должно быть близко к 8,5 мин. Ионы (масса/заряд), используемые для количественного определения, выделены в таблице жирным шрифтом. Следующие 2 иона (масса/заряд), представленные в таблице, являются характеристическими ионами, которые служат для подтверждения принадлежности соответствующих компонентов пробы. Некоторые фталаты имеют характеристические ионы с очень низкой интенсивностью, что выражается в малой специфичности отношения интенсивности пиков ионов (общая проблема для производных бензола, таких как фталаты).

В зависимости от используемого прибора, отношения интенсивности пиков ионов могут быть рассчитаны независимо от программного обеспечения ГХ/МС по следующей формуле:

Отношение интенсивности пиков ионов (масса/заряд_ij) = [(площадь (масса/заряд_i)/площадь (масса/заряд_j)] 100.

Примечание 2 - При проведении анализов в систему регулярно вводят растворитель, чтобы убедиться в отсутствии загрязнений за счет переноса исследуемого материала.

Идентификацию фталатов выполняют путем сравнения времени удерживания и масс-спектров в пробе с веществами в градуировочных растворах. Количественное определение аналита осуществляют с применением функции калибровки или метода стандартных добавок. Градуировочные растворы хроматографируют в соответствии с условиями, приведенными в 4.2. Значения концентрации фталатов рассчитывают по градуировочной зависимости на основе полученных значений площади пиков. В случае с ДПФ градуировочную зависимость строят для основного изомера. В случае с ДиПФ и ДнПФ учитывают изомеры ДПФ.

Содержание фталатов w в пробе рассчитывают по формуле (1)

где w - содержание фталата, г/100 г;

c - концентрация фталата в растворе пробы, определяемая при помощи функции калибровки, мкг/мл;

V - объем раствора пробы, мл;

F - коэффициент разбавления, если требуется;

m - исходная масса пробы, г.

Примечание - Для справки: данные валидации, используемые в протоколе валидации, были получены с использованием аналитического подхода, описание которого приведено в ISO 12787 и опубликовано в "Журнале хроматографии A", 1253 (2012) 144 - 153 [15].

В протоколе испытаний должна указываться следующая информация:

a) необходимая информация для идентификации пробы (вид, происхождение и обозначение пробы);

b) ссылка на настоящий стандарт;

c) дата и время отбора пробы (если известны);

d) дата поступления и дата направления на анализ;

e) дата проведения испытаний;

f) результаты испытаний и единицы, в которых они выражаются;

g) сведения о любых отступлениях от настоящего метода, с обоснованием;

h) сведения о выполнении любых операций, не предусмотренных методом либо рассматриваемых как необязательные, которые могли оказать влияние на полученные результаты;

i) идентификационные данные лаборатории, проводившей испытания;

j) идентификационные данные, дата и подпись лица, ответственного за оформление протокола.

Верхняя хроматограмма - проба без добавок.

Средняя хроматограмма - проба с добавками.

Нижняя хроматограмма - 5,0 мг/л стандартного раствора.

Y - интенсивность (ед.);

t - время, мин