Полное меню
- Актуальное
законодательство - Интернет
и право- - Рассылка ''Закон есть закон''
- - Форум сайта (архив)
- - Законодательство
- - Судебная практика (необычная)
- - Судебная практика (авторская)
- - Процедура UDRP и и решения WIPO
- - Книги серии ''Интернет и Право''
- - Книги в открытом доступе
- - Учебный курс ''Интернет и Право''
- - Учебный курс ''Доменные споры''
- - Литература по ''Интернет и Право''
- - Литература по интел. собственности
- - Научный уголок (работы гостей)
- - Авторские публикации
- Информационные
материалы - ЮРИДИЧЕСКИЕ
УСЛУГИ- - Перечень юридических услуг
- - Карта юридических услуг
- - Юридическая консультация
- - Доменные споры (RU), авторское право
- - Международный суд по доменам (COM)
- - Защита прав на маркетплейсе (WB, Ozon)
- - Защита прав в соцсетях (Vk, Ok, FB)
- - Купля-продажа домена, сайта, ПО
- - Досудебное урегулирование конфликта
- - Защита чести и деловой репутации
- - Отмена блокировки сайта/домена РКН
- - ФАС: товарные знаки, авторское право
- - Регистрация ПО/сайта (Роспатент)
- - Юридическая проверка домена
- - Нотариальное заверение сайтов
- - Способы и формы оплаты услуг
- - Мы в СМИ
- - О компании, клиенты
- - Наши дела и победы
- - Контакты и реквизиты
- Информация
о сайте -
ОписаниеИсточник публикации М.: Стандартинформ, 2020 Примечание к документу Документ включен в Перечень международных и региональных (межгосударственных) стандартов (п. п. 614, 781), а в случае их отсутствия - национальных (государственных) стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента Таможенного союза "О безопасности продукции, предназначенной для детей и подростков" (ТР ТС 007/2011) и осуществления оценки соответствия объектов технического регулирования (Решение Коллегии Евразийской экономической комиссии от 14.03.2023 N 31). Документ включен в Перечень международных и региональных (межгосударственных) стандартов, а в случае их отсутствия - национальных (государственных) стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента Таможенного союза "О безопасности парфюмерно-косметической продукции" (ТР ТС 009/2011) и осуществления оценки соответствия объектов технического регулирования (Решение Коллегии Евразийской экономической комиссии от 22.12.2020 N 177). Документ включен в Перечень международных и региональных (межгосударственных) стандартов (п.п. 697, 711 и 732), а в случае их отсутствия - национальных (государственных) стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента Таможенного союза "О безопасности средств индивидуальной защиты" (ТР ТС 019/2011) и осуществления оценки соответствия объектов технического регулирования (Решение Коллегии Евразийской экономической комиссии от 03.03.2020 N 30). Документ был включен в Перечень международных и региональных (межгосударственных) стандартов, а в случае их отсутствия - национальных (государственных) стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента Таможенного союза "О безопасности парфюмерно-косметической продукции" (ТР ТС 009/2011) и осуществления оценки соответствия объектов технического регулирования (Решение Комиссии Таможенного союза от 23.09.2011 N 799). Документ введен в действие с 01.01.2021. Взамен ГОСТ ISO 18416-2013. Название документа "ГОСТ ISO 18416-2018. Межгосударственный стандарт. Продукция парфюмерно-косметическая. Микробиология. Обнаружение Candida albicans" (введен в действие Приказом Росстандарта от 04.12.2020 N 1252-ст) "ГОСТ ISO 18416-2018. Межгосударственный стандарт. Продукция парфюмерно-косметическая. Микробиология. Обнаружение Candida albicans"
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97 | Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97 | Сокращенное наименование национального органа по стандартизации |
Армения | AM | ЗАО "Национальный орган по стандартизации и метрологии" Республики Армения |
Беларусь | BY | Госстандарт Республики Беларусь |
Казахстан | KZ | Госстандарт Республики Казахстан |
Киргизия | KG | Кыргызстандарт |
Россия | RU | Росстандарт |
Узбекистан | UZ | Узстандарт |
4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 4 декабря 2020 г. N 1252-ст межгосударственный стандарт ГОСТ ISO 18416-2018 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2021 г.
5 Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ISO 18416:2015 "Косметика. Микробиология. Обнаружение Candida albicans" ("Cosmetics - Microbiology - Detection of Candida albicans", IDT).
Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанного международного стандарта для увязки с наименованиями, принятыми в существующем комплексе межгосударственных стандартов.
Международный стандарт разработан техническим комитетом ISO/TC 217 "Косметика" Международной организации по стандартизации (ISO).
При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных международного и европейского стандартов соответствующие им межгосударственные стандарты, сведения о которых приведены в дополнительном приложении ДА
6 ВЗАМЕН ГОСТ ISO 18416-2013
7 Некоторые элементы настоящего стандарта могут являться объектами патентных прав
Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта и изменений к нему на территории указанных выше государств публикуется в указателях национальных стандартов, издаваемых в этих государствах, а также в сети Интернет на сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации.
В случае пересмотра, изменения или отмены настоящего стандарта соответствующая информация будет опубликована на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации в каталоге "Межгосударственные стандарты"
Микробиологические исследования парфюмерно-косметической продукции должны выполняться на основании соответствующего анализа степени микробиологического риска, для того чтобы обеспечить ее качество и безопасность для потребителей.
Проведение анализа микробиологического риска обусловлено несколькими факторами, такими как:
- возможное изменение парфюмерно-косметической продукции;
- патогенность микроорганизмов;
- область нанесения парфюмерно-косметической продукции (волосы, кожа, глаза, слизистые оболочки);
- тип потребителей (взрослые, дети, включая детей до трех лет).
Для парфюмерно-косметической и другой аналогичной продукции важным является обнаружение кожных болезнетворных микроорганизмов, таких как Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa и Candida albicans, так как они могут вызвать инфекции на коже человека или в области глаз. Обнаружение других видов микроорганизмов также может представлять интерес, поскольку эти микроорганизмы (включая индикаторы фекального загрязнения, например Escherichia coli) указывают на несоблюдение гигиенических требований в процессе производства.
Настоящий стандарт устанавливает общие требования к методу обнаружения и идентификации специфического микроорганизма Candida albicans в парфюмерно-косметической продукции. Микроорганизмы, рассматриваемые в настоящем стандарте, в зависимости от применяемой национальной практики или требований национальных регламентов в разных странах могут относиться или не относиться к специфическим.
Чтобы обеспечить качество и безопасность продукции для потребителя, рекомендуется проводить соответствующий анализ микробиологического риска с целью определения видов парфюмерно-косметической продукции, к которой применим настоящий международный стандарт. К продукции с низкой степенью микробиологического риска (см. ISO 29621) относится продукция с низкой водной активностью, продукция на спиртовой основе, продукция с крайними значениями pH и т.д.
Метод, установленный в настоящем стандарте, основан на обнаружении Candida albicans в неселективной жидкой среде (бульоне для обогащения) с последующим выделением микроорганизмов на селективной агаризованной среде. Можно применять и другие методы в зависимости от требуемого уровня обнаружения.
Примечание - Для обнаружения Candida albicans субкультуры могут быть пересеяны на неселективные питательные среды с последующей поэтапной идентификацией (например, с помощью идентификационных тестов).
Из-за большого разнообразия парфюмерно-косметической продукции в рассматриваемой области применения отдельные детали данного метода могут быть непригодными для некоторых видов продукции (например, для нерастворимой в воде продукции). Могут применяться другие стандарты (например, ISO 18415). Можно применять другие методы (например, автоматизированные) вместо представленных тестов, при условии, что была доказана их равнозначность или подтверждена пригодность должным образом.
Для применения настоящего стандарта необходимы следующие ссылочные стандарты. Для датированных ссылок применяют только указанное издание ссылочного стандарта. Для недатированных ссылок применяют последнее издание ссылочного стандарта (включая все его изменения).
ISO 21148:2005 <1> Cosmetics - Microbiology - General instructions for microbiological examination (Косметика. Микробиология. Общие указания по микробиологическому контролю)
--------------------------------
<1> Заменен на ISO 21148:2017. Однако для однозначного соблюдения требования настоящего стандарта, выраженного в датированной ссылке, рекомендуется использовать только указанное в этой ссылке издание.
EN 12353 Chemical disinfectants and antiseptics - Preservation of test organisms used for the determination of bactericidal (including Legionella), mycobactericidal, sporicidal, fungicidal and virucidal (including bacteriophages) activity (Средства дезинфицирующие химические и антисептики. Консервация тест-микроорганизмов, используемых для определения бактерицидной (включая микроорганизмы Legionella), микобактерицидной, спорицидной, фунгицидной и вируцидной (включая бактериофаги) активности)
В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:
3.1 продукция (product): Часть идентифицированной парфюмерно-косметической продукции, полученная лабораторией для испытания (анализа).
3.2 проба (sample): Часть продукции (не менее 1 г или 1 см3), которая используется при проведении испытаний для приготовления исходной суспензии.
3.3 исходная суспензия (initial suspension): Суспензия (или раствор) пробы в определенном объеме соответствующего бульона для обогащения.
3.4 разведение пробы (sample dilution): Разбавление исходной суспензии.
3.5 специфические микроорганизмы (specified microorganisms): Мезофильные аэробные бактерии или дрожжи, нежелательные в парфюмерно-косметической продукции и признанные патогенными для кожи микроорганизмами, которые способны причинить вред здоровью человека или являются признаком нарушения гигиенических требований в процессе производства.
3.6 Candida albicans: Дрожжи, которые образуют выпуклые колонии от белого до бежевого и кремового цветов на поверхности селективной среды.
Примечание - Главными признаками для идентификации являются образование ростковой трубки и/или псевдомицелия и хламидоспоры при проведении испытания по методу, установленному в настоящем стандарте.
3.7 бульон для обогащения (enrichment broth): Неселективная жидкая питательная среда, содержащая соответствующие нейтрализаторы и/или диспергирующие вещества, которая прошла проверку пригодности для испытуемой продукции.
Первым этапом испытания является обогащение в неселективной питательной среде (бульоне) для увеличения числа микроорганизмов без риска ингибирования селективными ингредиентами, которые присутствуют в селективной/дифференциальной питательной среде.
Второй этап испытания (выделение) выполняется на селективной среде с последующей идентификацией.
Возможное ингибирование роста микроорганизмов пробой должно быть нейтрализовано для обеспечения обнаружения жизнеспособных микроорганизмов [1]. Во всех случаях и независимо от применяемой методики должна быть проверена и доказана нейтрализация антимикробных свойств продукции (см. раздел 11).
Общие указания приведены в ISO 21148. Если в настоящем стандарте упоминается вода, то это означает, что применяют дистиллированную или очищенную воду, как установлено в ISO 21148.
Бульон для обогащения используют для диспергирования пробы и для увеличения первоначальной микробной популяции. Он может содержать нейтрализаторы, если испытуемая проба обладает антимикробными свойствами. Эффективность нейтрализации должна быть доказана (см. раздел 11). Информация относительно подходящих нейтрализаторов приведена в приложении B.
Бульон для обогащения (см. 5.3.3.1) или любой из бульонов, приведенных в приложении A, пригоден для контроля наличия Candida albicans в соответствии с методом настоящего стандарта при условии, что он прошел проверку пригодности в соответствии с разделом 11.
Можно использовать другие разбавители и питательные среды, если была доказана их пригодность.
Разбавитель используют для приготовления суспензии дрожжей, применяемой в процедуре теста на пригодность (см. раздел 11).
- Триптон, панкреатический гидролизат казеина - 1,0 г;
- хлорид натрия - 8,5 г;
- вода - 1000 см3.
Растворяют компоненты в воде, перемешивая при нагревании. Разливают в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин.
После стерилизации и охлаждения pH должен быть равен 7,0 +/- 0,2 при измерении при комнатной температуре.
Питательные среды могут быть приготовлены согласно описанию, приведенному ниже, или из сухих питательных сред согласно инструкциям изготовителя. Должны соблюдаться инструкции поставщика среды.
Примечание - Готовые к употреблению среды можно использовать, если их состав и/или ростовые свойства сопоставимы с приведенными ниже.
5.3.2 Агаризованная среда для теста на пригодность (см. раздел 11)
5.3.2.1 Декстрозный агар Сабуро (SDA)
5.3.2.1.1 Состав
- Декстроза - 40,0 г;
- пептический перевар животной ткани - 5,0 г;
- панкреатический гидролизат казеина - 5,0 г;
- агар - 15,0 г;
- вода - 1000 см3.
5.3.2.1.2 Приготовление
Растворяют компоненты или готовую сухую среду в воде, перемешивая при нагревании. Разливают среду в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин. После стерилизации pH должен быть равен 5,6 +/- 0,2 при измерении при комнатной температуре.
5.3.2.2 Другие агаризованные среды для теста на пригодность
Могут использоваться другие подходящие агаризованные среды (см. приложение A).
5.3.3.1.1 Общие положения
Данная среда содержит ингредиенты - лецитин и полисорбат 80, которые нейтрализуют ингибирующие вещества, присутствующие в пробе, а также диспергирующий агент октоксинол 9.
5.3.3.1.2 Состав
- Панкреатический гидролизат казеина - 15,0 г;
- папаиновый перевар соевой муки - 5,0 г;
- L-цистин - 0,7 г;
- хлорид натрия - 4,0 г;
- сульфит натрия - 0,2 г;
- глюкоза - 5,5 г;
- яичный лецитин - 1,0 г;
- полисорбат 80 - 5,0 г;
- октоксинол 9 - 1,0 г;
- вода - 1 000 см3.
5.3.3.1.3 Приготовление
Растворяют последовательно компоненты (полисорбат 80, октоксинол 9 и яичный лецитин) в кипящей воде до их полного растворения. Растворяют остальные компоненты в воде, перемешивая их при нагревании. Разливают среду в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин.
После стерилизации и охлаждения pH должен быть равен 7,0 +/- 0,2 при измерении при комнатной температуре.
5.3.3.2 Другие бульоны для обогащения
Можно использовать и другие подходящие бульоны для обогащения (см. приложение A).
5.3.4.1 Декстрозный агар Сабуро с хлорамфениколом
5.3.4.1.1 Состав
- Декстроза - 40,0 г;
- пептический перевар животной ткани - 5,0 г;
- панкреатический гидролизат казеина - 5,0 г;
- хлорамфеникол - 0,050 г;
- агар - 15,0 г;
- вода - 1 000 см3.
5.3.4.1.2 Приготовление
Растворяют компоненты (включая хлорамфеникол) или готовую сухую среду в воде, перемешивая при нагревании. Разливают среду в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин. После стерилизации pH должен быть равен 5,6 +/- 0,2 при измерении при комнатной температуре.
5.3.4.2 Другие селективные агаризованные среды
Можно использовать другие селективные агаризованные среды (см. приложение A).
5.3.5.1 Состав
- Кукурузный экстракт - 50,0 г;
- агар - 15,0 г;
- полисорбат 80 - 10,0 г;
- вода - 1 000 см3.
5.3.5.2 Приготовление
Растворяют компоненты или готовую сухую среду в воде, перемешивая при нагревании. Разливают среду в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин. После стерилизации pH должен быть равен 6,0 +/- 0,2 при измерении при комнатной температуре.
Используют лабораторное оборудование, инструменты и стеклянную посуду в соответствии с ISO 21148.
Для проверки условий проведения испытаний используют следующий референсный штамм: Candida albicans ATCC <1> 10231 или эквивалентный штамм: IP <2> 48.72, или NCPF <3> 3179, или NBRC <4>) 1594, или KCTC <5>) 17205, или другой эквивалентный штамм из национальной коллекции.
--------------------------------
<1> ATCC - American Type Culture Collection (Американская коллекция типовых культур (микроорганизмов)).
<2> IP - Institute Pasteur (Институт Пастера).
<3> NCPF - National Collection of Pathogenic Fungi (Национальная коллекция патогенных грибов).
<4> NBRC - National Biological Resource Center (Национальный центр биологических исследований).
<5> KCTC - Korean Collection for Type Culture (Корейская коллекция типовых культур).
Культуру следует восстановить согласно процедурам, предоставляемым поставщиком референсного штамма.
Штамм может храниться в лаборатории согласно EN 12353.
При необходимости продукцию, подлежащую испытаниям, хранят при комнатной температуре.
Не следует выдерживать в термостате, охлаждать и замораживать продукцию и пробы ни до, ни после анализа.
Отбор проб парфюмерно-косметической продукции для анализа следует проводить в соответствии с ISO 21148. Анализируют пробы согласно ISO 21148 и методике, приведенной в разделе 9.
Приготовление пробы, исходной суспензии и разведений выполняют с соблюдением условий асептики, используя стерильные материалы, оборудование. В случае приготовления исходной суспензии с использованием подходящего солюбилизирующего компонента время между окончанием приготовления суспензии и моментом ее внесения в бульон для обогащения не должно превышать 45 мин, если иное не оговорено в соответствующих протоколах или документах.
Для обогащения вносят пробу (см. 3.2) хорошо перемешанной испытуемой продукции в количестве не менее 1 г или 1 см3 в бульон для обогащения объемом не менее 9 см3.
Отмечают S, точную массу или точный объем пробы.
При выполнении метода необходимо осуществлять контроль для гарантии того, что состав (с добавленным в конце приготовления нейтрализатором) и объем бульона удовлетворяют требованиям (см. 11.3).
Примечание - В некоторых случаях (когда это возможно) фильтруют парфюмерно-косметическую продукцию через мембранный фильтр, который затем погружают в бульон для обогащения, что облегчает нейтрализацию антимикробных свойств продукции (см. 11.3).
Переносят количество S пробы продукции в подходящую посуду, содержащую соответствующий объем бульона.
Переносят количество S пробы продукции в подходящую лабораторную посуду, содержащую соответствующее количество солюбилизирующего компонента (например, полисорбат 80).
Диспергируют пробу в солюбилизирующем компоненте и добавляют соответствующий объем бульона.
Используют мембранный фильтр с номинальным размером пор не более 0,45 мкм.
Переносят количество S пробы продукции на мембранный фильтр в фильтровальном аппарате (см. ISO 21148). Сразу же фильтруют и промывают мембранный фильтр, используя определенные объемы воды и/или разбавителя.
Переносят и погружают мембранный фильтр в пробирку или колбу подходящего размера, содержащие соответствующий объем бульона.
Инкубируют исходную суспензию, приготовленную в бульоне (см. 9.2), при температуре (32,5 +/- 2,5) °C в течение не менее 20 ч, но не более 72 ч.
Стерильной петлей делают пересев аликвоты инкубированного бульона для обогащения на поверхность декстрозного агара Сабуро с хлорамфениколом, чтобы получить изолированные колонии.
Переворачивают чашку Петри и инкубируют при температуре (32,5 +/- 2,5) °C в течение не менее 24 ч, но не более 48 ч. Проверяют на наличие характерных колоний (см. таблицу 1).
Таблица 1
на селективной агаризованной среде
Селективная среда | Характеристика колоний Candida albicans |
Декстрозный агар Сабуро с хлорамфениколом | От белого до бежевого и кремового цветов, выпуклые |
9.4.2.1 Общие положения
Candida albicans могут быть диморфными и способны создавать псевдогифы, некоторые - истинные гифы и грозди круглых бластоконидий, а также крупные толстостенные хламидоспоры. При низкой температуре окружающей среды данная культура может представлять эту псевдомицелиальную форму, однако она может изменяться на одноклеточную форму при повышенных температурах.
Проводят дальнейшее изучение подозрительных колоний, выделенных на декстрозном агаре Сабуро с хлорамфениколом. Наличие Candida albicans может быть подтверждено и другими подходящими культуральными и биохимическими тестами.
9.4.2.2 Окраска по Граму
Следуют процедуре, установленной в ISO 21148.
Под микроскопом клетки Candida albicans фиолетовые, короткие овальные или удлиненные, иногда почкуются.
9.4.2.3 Образование ростковой трубки
9.4.2.3.1 Помещают 0,5 - 1 см3 сыворотки (эмбриональная телячья или лошадиная сыворотка) в небольшую пробирку.
9.4.2.3.2 Эмульгируют небольшую часть дрожжевой колонии в сыворотке.
9.4.2.3.3 Инкубируют на водяной бане при температуре (37 +/- 1) °C в течение 1,5 - 2 ч или в термостате при температуре (37 +/- 2) °C в течение 3 ч.
9.4.2.3.4 Помещают каплю сыворотки на предметное стекло, закрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом образование ростковой трубки.
Ростковые трубки появляются в виде цилиндрических волокон (нитей) из бластопор без каких-либо сужений (перетяжек) в месте возникновения и без утолщений вдоль длины волокна.
Образование ростковых трубок является признаком присутствия Candida albicans.
Если ростковые трубки не были сформированы, колонии исследуют на образование гифов, псевдогифов и хламидоспор согласно 9.4.2.4.
9.4.2.4.1 Петлей делают посев небольшой части дрожжевой колонии на поверхности среды через центр чашки Петри методом штриха. На штрих помещают стерильное покровное стекло.
9.4.2.4.2 Инкубируют при температуре (32,5 +/- 2,5) °C до 3 дней.
9.4.2.4.3 Через 24 ч снимают крышку чашки Петри и изучают полученный рост через покровное стекло под микроскопом с увеличением от 100x до 400x.
Candida albicans образует крупную, сильно преломляющую свет, толстостенную хламидоспору, которая может быть расположена терминально или на коротких боковых ветвях.
Если при идентификации колоний подтверждено наличие данного вида, результат представляют следующим образом: бактерии вида Candida albicans обнаружены в количестве S пробы.
Если после обогащения роста не наблюдалось и/или если идентификация колоний не подтвердила наличие данного вида, результат представляют следующим образом: бактерии вида Candida albicans не обнаружены в количестве S пробы.
Описанные ниже процедуры демонстрируют, что микроорганизмы могут расти в условиях проведения анализа.
Перед проведением испытания засевают поверхность агаризованной среды с соево-казеиновым гидролизатом (SCDA) или другой подходящей среды (неселективной и не оказывающей нейтрализующего действия) штаммом Candida albicans. Инкубируют чашку при температуре (32,5 +/- 2,5) °C в течение 18 - 24 ч.
Стерильной петлей штриховыми движениями снимают с поверхности среды выросшие колонии и ресуспендируют в разбавителе для приготовления стандартной суспензии с концентрацией 1 x 106 КОЕ/см3 (например, используя спектрофотометр, см. ISO 21148:2005 (приложение C)).
Стандартную суспензию и ее разведения используют в течение 2 ч.
11.3.1.1 В пробирках, содержащих по 9 см3 разбавителя, готовят разведения стандартной суспензии, чтобы в конечном счете получить концентрацию, равную 100 - 500 КОЕ/см3. Для подсчета окончательного количества жизнеспособных микроорганизмов в разведенной стандартной суспензии вносят 1 см3 суспензии в чашку Петри и заливают от 15 до 20 см3 расплавленной агаризованной среды, которая выдерживалась на водяной бане при температуре, не превышающей 48 °C. Дают среде в чашках застыть, а затем инкубируют при температуре (32,5 +/- 2,5) °C в течение 20 - 24 ч.
11.3.1.2 Готовят в двух повторностях исходную суспензию пробы в пробирке или колбе, соблюдая выбранные для анализа условия (не менее 1 г или 1 см3 испытуемой продукции и определенный объем бульона для обогащения). Если используют метод мембранной фильтрации, то фильтруют в двух повторностях не менее 1 см3 испытуемой продукции и переносят каждый мембранный фильтр в пробирку или колбу, содержащую бульон для обогащения в условиях, выбранных для проведения испытаний.
11.3.1.3 Стерильно вносят 0,1 см3 разведенной стандартной суспензии (см. 11.3.1.1) микроорганизмов в одну пробирку или колбу (тест на пригодность). Перемешивают, затем инкубируют обе пробирки или колбы (тест на пригодность и контроль неконтаминированной пробы) при температуре (32,5 +/- 2,5) °C в течение 20 - 24 ч.
11.3.1.4 Проводят выделение для каждой пробирки или колбы (тест на пригодность и контроль неконтаминированной пробы). Используя стерильную петлю, делают высев инкубированной смеси методом истощающего штриха (при таких же условиях, как в тесте) на поверхность декстрозного агара Сабуро с хлорамфениколом, разлитого в чашки Петри (диаметром от 85 до 100 мм) в количестве приблизительно от 15 до 20 см3. Инкубируют чашки при температуре (32,5 +/- 2,5) °C в течение 24 - 48 ч.
Проверяют, что разведенная стандартная суспензия дрожжей (см. 11.3.1.1) содержит от 100 до 500 КОЕ/см3.
Нейтрализация подтверждается и метод обнаружения является удовлетворительным, если ростовые характеристики Candida albicans наблюдаются на чашке, которая использовалась в тесте на пригодность, и если отсутствует рост на контрольной чашке.
Если обнаружен рост на контрольной чашке пробы (контаминированная продукция), то нейтрализация подтверждается и метод обнаружения является удовлетворительным, если дрожжи вида Candida albicans выделены на чашке, используемой в тесте на пригодность.
Отсутствие роста на чашках, используемых в тесте на пригодность, указывает на то, что антимикробная активность все еще не нейтрализована и требуется изменение условий метода путем увеличения объема питательного бульона (при этом количество продукции остается тем же), или путем добавления большего количества инактивирующего вещества в бульон для обогащения, или путем комбинации изменений, которые позволят обеспечить рост Candida albicans.
Если все еще невозможно выделить жизнеспособные культуры несмотря на введение подходящих инактивирующих веществ и значительное увеличение бульона, как описано выше, то это указывает на малую вероятность контаминации продукции дрожжами вида Candida albicans.
Протокол испытания должен содержать следующую информацию:
a) ссылку на настоящий стандарт;
b) всю информацию, необходимую для полной идентификации продукции;
c) примененный метод;
d) полученные результаты;
e) все детали приготовления исходной суспензии;
f) описание метода с указанием использованных нейтрализующих веществ и питательных сред;
g) подтверждение пригодности метода, даже если испытание было выполнено отдельно;
h) любые особенности, не указанные в настоящем стандарте или рассматриваемые как необязательные, вместе с подробностями, которые могли повлиять на полученные результаты.
(справочное)
A.1 Другие бульоны для обогащения
A.1.1 Жидкая среда с соево-казеиновым гидролизатом
A.1.1.1 Состав
- Панкреатический гидролизат казеина - 17,0 г;
- папаиновый перевар соевой муки - 3,0 г;
- хлорид натрия - 5,0 г;
- двузамещенный фосфат калия - 2,5 г;
- декстроза - 2,5 г;
- вода - 1 000 см3.
A.1.1.2 Приготовление
Растворяют все компоненты (или готовую сухую среду) в воде, нагревая при необходимости. Разливают среду в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин.
После стерилизации и охлаждения pH должен быть равен 7,3 +/- 0,2 при измерении при комнатной температуре.
A.1.2 Модифицированный летиновый (Letheen) бульон
A.1.2.1 Состав
- Пептический перевар мяса - 20,0 г;
- панкреатический гидролизат казеина - 5,0 г;
- говяжий экстракт - 5,0 г;
- дрожжевой экстракт - 2,0 г;
- лецитин - 0,7 г;
- полисорбат 80 - 5,0 г;
- хлорид натрия - 5,0 г;
- бисульфит натрия - 0,1 г;
- вода - 1 000 см3.
A.1.2.2 Приготовление
Растворяют последовательно в кипящей воде полисорбат 80 и лецитин до их полного растворения. Растворяют другие компоненты, перемешивая при нагревании. Перемешивают осторожно во избежание пенообразования. Разливают среду в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин.
После стерилизации и охлаждения pH должен быть равен 7,2 +/- 0,2 при измерении при комнатной температуре.
A.1.3 Глюкозо-пептонная среда с лецитином и полисорбатом 80 (бульон GPLP 80)
A.1.3.1 Состав
- Глюкоза - 20,0 г;
- дрожжевой экстракт - 2,0 г;
- сульфат магния - 0,5 г;
- пептон - 5,0 г;
- двузамещенный фосфат калия - 1,0 г;
- лецитин - 1,0 г;
- полисорбат 80 - 7,0 г;
- вода - 1 000 см3.
A.1.3.2 Приготовление
Растворяют последовательно компоненты или готовую сухую среду в кипящей воде до их полного растворения. Разливают среду в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин.
После стерилизации и охлаждения pH должен быть равен 5,7 +/- 0,2 при измерении при комнатной температуре.
A.1.4 Нейтрализующий бульон D/E (нейтрализующий бульон Dey/Engley) [5]
A.1.4.1 Состав
- Глюкоза - 10,0 г;
- соевый лецитин - 7,0 г;
- тиосульфат натрия 5-водный - 6,0 г;
- полисорбат 80 - 5,0 г;
- панкреатический гидролизат казеина - 5,0 г;
- бисульфит натрия - 2,5 г;
- дрожжевой экстракт - 2,5 г;
- тиогликолят натрия - 1,0 г;
- бромкрезол пурпуровый - 0,02 г;
- вода - 1 000 см3.
A.1.4.2 Приготовление
Растворяют последовательно все указанные компоненты или готовую сухую среду в кипящей воде до их полного растворения. Разливают среду в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин.
После стерилизации и охлаждения pH должен быть равен 7,6 +/- 0,2 при измерении при комнатной температуре.
A.1.5 Среда с соево-казеиновым гидролизатом, лецитином и полисорбатом 80 (бульон SCDLP 80)
A.1.5.1 Состав
- Казеиновый пептон - 17,0 г;
- соевый пептон - 3,0 г;
- хлорид натрия - 5,0 г;
- двузамещенный фосфат калия - 2,5 г;
- глюкоза - 2,5 г;
- лецитин - 1,0 г;
- полисорбат 80 - 7,0 г;
- вода - 1 000 см3.
A.1.5.2 Приготовление
Растворяют последовательно все указанные компоненты или готовую сухую среду в кипящей воде до их полного растворения. Разливают среду в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин.
После стерилизации pH должен быть равен 7,6 +/- 0,2 при измерении при комнатной температуре.
A.2 Другие агаризованные среды для теста на пригодность
A.2.1 Картофельный декстрозный агар (PDA)
A.2.1.1 Состав
- Картофельный экстракт - 4,0 г;
- декстроза - 20,0 г;
- агар - 15,0 г;
- вода - 1 000 см3.
A.2.1.2 Приготовление
Растворяют компоненты или готовую сухую среду в воде, перемешивая при нагревании. Разливают среду в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин.
После стерилизации и охлаждения pH должен быть равен 5,6 +/- 0,2 при измерении при комнатной температуре.
A.2.2 Агаризованная среда с соево-казеиновым гидролизатом (SCDA) или триптон-соевый агар (TSA)
A.2.2.1 Состав
- Панкреатический гидролизат казеина - 15,0 г;
- папаиновый перевар соевой муки - 5,0 г;
- хлорид натрия - 5,0 г;
- агар - 15,0 г;
- вода - 1 000 см3.
A.2.2.2 Приготовление
Растворяют компоненты или готовую сухую среду в воде, перемешивая при нагревании. Разливают среду в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин.
После стерилизации и охлаждения pH должен быть равен 7,3 +/- 0,2 при измерении при комнатной температуре.
A.3 Другие селективные агаризованные среды. Картофельный декстрозный агар с антибиотиками
A.3.1 Состав
- Картофельный экстракт - 4,0 г;
- декстроза - 20,0 г;
- агар - 15,0 г;
- хлорамфеникол - 0,05 г;
- вода - 1 000 см3.
A.3.2 Приготовление
Смешивают все компоненты и разливают среду в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин. После стерилизации и охлаждения pH должен быть равен 5,6 +/- 0,2 при измерении при комнатной температуре.
Вместо хлорамфеникола можно использовать 0,10 г бензилпенициллина калия и 0,10 г тетрациклина на кубический дециметр среды, которые добавляются в качестве стерильного раствора непосредственно перед использованием среды.
(справочное)
И ПРОМЫВНЫЕ ЖИДКОСТИ
Консерванты | Химические вещества, способные нейтрализовать антимикробную активность консервантов | Примеры подходящих нейтрализаторов и промывных жидкостей (для методов мембранной фильтрации) |
Фенольные соединения: - парабены; - феноксиэтанол; - фенилэтанол и другие анилиды | Лецитин, полисорбат 80, конденсат этиленоксида жирного спирта, неионогенные поверхностно-активные вещества | Полисорбат 80, 30 г/дм3, + лецитин, 3 г/дм3. Конденсат этиленоксида жирного спирта, 7 г/дм3, + лецитин, 20 г/дм3, + полисорбат 80, 4 г/дм3. D/E-нейтрализующий бульон <a>. Промывная жидкость: дистиллированная вода; триптон, 1 г/дм3, + NaCl, 9 г/дм3; полисорбат 80, 5 г/дм3 |
Четвертичные аммониевые соединения, катионогенные поверхностно-активные вещества | Лецитин, сапонин, полисорбат 80, додецилсульфат натрия Конденсат этиленоксида жирного спирта | Полисорбат 80, 30 г/дм3, + додецилсульфат натрия, 4 г/дм3, + лецитин, 3 г/дм3. Полисорбат 80, 30 г/дм3, + сапонин, 30 г/дм3, + лецитин, 3 г/дм3. D/E-нейтрализующий бульон <a>. Промывная жидкость: дистиллированная вода; триптон, 1 г/дм3, + NaCl, 9 г/дм3; полисорбат 80, 5 г/дм3 |
Альдегиды, ингредиенты, выделяющие формальдегид | Глицин, гистидин | Лецитин, 3 г/дм3, + полисорбат 80, 30 г/дм3, + L-гистидин, 1 г/дм3. Полисорбат 80, 30 г/дм3, + сапонин, 30 г/дм3, + L-гистидин, 1 г/дм3, + L-цистеин, 1 г/дм3. D/E-нейтрализующий бульон <a>. Промывная жидкость: полисорбат 80, 3 г/дм3, + L-гистидин, 0,5 г/дм3 |
Окисляющие соединения | Тиосульфат натрия | Тиосульфат натрия, 5 г/дм3. Промывная жидкость: тиосульфат натрия, 3 г/дм3 |
Изотиазолиноны, имидазолы | Лецитин, сапонин Амины, сульфаты, меркаптаны, бисульфит натрия, тиогликолят натрия | Полисорбат 80, 30 г/дм3, + сапонин, 30 г/дм3, + лецитин, 3 г/дм3. Промывная жидкость: триптон, 1 г/дм3, + NaCl, 9 г/дм3; полисорбат 80, 5 г/дм3 |
Бигуаниды | Лецитин, сапонин, полисорбат 80 | Полисорбат 80, 30 г/дм3, + сапонин, 30 г/дм3, + лецитин, 3 г/дм3. Промывная жидкость: триптон, 1 г/дм3, + NaCl, 9 г/дм3; полисорбат 80, 5 г/дм3 |
Соли металлов (Cu, Zn, Hg), ртутьорганические соединения | Бисульфат натрия, L-цистеин Сульфгидрильные соединения, тиогликолевая кислота | Тиогликолят натрия, 0,5 или 5 г/дм3. L-цистеин, 0,8 или 1,5 г/дм3. D/E-нейтрализующий бульон <a>. Промывная жидкость: тиогликолят натрия, 0,5 г/дм3 |
Примечание - См. ссылки [8] и [11]. -------------------------------- <a> D/E-нейтрализующий бульон (Dey/Engley-нейтрализующий бульон) см. в приложении A. | ||
(справочное)
И ЕВРОПЕЙСКОГО СТАНДАРТОВ МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫМ СТАНДАРТАМ
Таблица ДА.1
Обозначение ссылочного международного (европейского) стандарта | Степень соответствия | Обозначение и наименование соответствующего межгосударственного стандарта |
ISO 21148:2005 | IDT | ГОСТ ISO 21148-2013 Продукция парфюмерно-косметическая. Микробиология. Общие требования к микробиологическому контролю |
EN 12353 | IDT | ГОСТ EN 12353-2016 Средства химические дезинфицирующие и антисептические. Консервация тест-организмов, используемых для определения бактерицидной (включая Legionella), микобактерицидной, спорицидной, фунгицидной и вируцидной (включая бактериофаги) активности (EN 12353:2013) |
Примечание - В настоящей таблице использовано следующее условное обозначение степени соответствия стандартов: - IDT - идентичные стандарты. | ||
COLIPA, Guidelines on Microbial Quality Management, 1997, published by the European Cosmetic, Toiletry and Perfumery Association (COLIPA) (Руководство по менеджменту качества в микробиологии) | ||
[2] | CTFA, Microbiology Guidelines, 2007, published by the Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association, ISBN 1-882621-32-8 (Руководство по микробиологии) | |
[3] | EP, Microbiological Examination of non-sterile products, 4th edition, 2002, published by the European Pharmacopoeia (Микробиологическая экспертиза нестерильной продукции) | |
[4] | FDA, Bacteriological Analytical Manual, 8th edition, 1995 published by the U.S. Food and Drug Administration, /template/go.php?url=https://www.cfsan.fda.gov/~ebam/bam-23.html (Руководство по бактериологическому анализу) | |
JP 14, General Tests - Microbial Limit Test, 2001, published by the Japanese Pharmacopoeia (Общие испытания. Испытания на предельное содержание микроорганизмов) | ||
[6] | USP 28, Microbial Limit Test (61), 2005, published by the U.S. Pharmacopoeia (Испытания на предельное содержание микроорганизмов) | |
[7] | ATLAS, R.M., Handbook of Microbiological Media, CRC Press, 1993, ISBN 0-8493-2944-2 (Справочник по микробиологическим средам) | |
SINGER, S., The Use of Preservative Neutralizers in Diluents and Plating Media, Cosmetics and Toiletries, 102, December 1987, p 55 (Применение нейтрализаторов-консервантов в разбавителях и средах для чашек Петри. Косметика и туалетные принадлежности) | ||
[9] | ISO 21149 | Cosmetics - Microbiology - Enumeration and detection of aerobic mesophilic bacteria (Косметика. Микробиология. Подсчет и обнаружение аэробных мезофильных бактерий) |
[10] | ISO 18415 | Cosmetics - Microbiology - Detection of specified microorganisms and non-specified microorganisms (Косметика. Микробиология. Обнаружение специфических и неспецифических микроорганизмов) |
EN 1040 | Chemical disinfectants and antiseptics - Basic bactericidal activity - Test method and requirements (phase 1) (Средства химические дезинфицирующие и антисептики. Базовая бактерицидная активность. Метод испытания и требования (этап 1)) | |
[12] | Kelly, J.P., and Funitiello, F., Candida albicans: A study of media designed to promote chlamydospore production, J. Lab. & Clin. Med., 53, 1959, pp 807 - 809 (Candida albicans: Исследование сред, предназначенных для стимулирования образования хламидоспор) | |
[13] | Gordon, M.A., and Little, T.N., Effective dehydrated media with surfactants for identification of Candida albicans, J. of Int. Soc. for Human and Animal Mycol., 2, 1963, pp 171 - 175 (Эффективная дегидрированная питательная среда с поверхностно-активными веществами для определения Candida albicans) | |
[14] | ISO 16212 | Cosmetics - Microbiology - Enumeration of yeast and mould (Косметика. Микробиология. Подсчет дрожжей и плесневых грибов) |
[15] | Evans, E.G.V. and Richard, M.D., Medical mycology: a practical approach, Oxford University Press, 1989 (Медицинская микология: практический подход) | |
[16] | ISO 29621 | Cosmetics - Microbiology - Guidelines for the risk assessment and identification of microbiologically low-risk products (Продукция косметическая. Микробиология. Руководящие указания по оценке риска и идентификации продукции с микробиологически низким риском) |
УДК 665.57/.58:579.8.083.12(083.74)(476):006.354 | IDT | |
Ключевые слова: продукция парфюмерно-косметическая, микробиологические исследования, микроорганизмы, разбавители, питательные среды, штаммы микроорганизмов | ||
Вернуться в "Каталог нормативных документов"
Источник информации: https://internet-law.ru/documents/prod/gost_gosudarstvennyj-standart/31/gost_64470.html
На правах рекламы:
|
© Антон Серго, 1998-2026.
|
Разработка сайта |
|