"ОФС.1.1.1.0020. Общая фармакопейная статья. Испытание на депрессорные вещества"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 11.04.2025 N 188)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание")

Общая фармакопейная статья распространяется на метод определения содержания веществ депрессорного действия, применяемого при фармацевтической разработке лекарственных средств, а также при оценке пригодности технологического процесса в отношении возможности получения лекарственного средства, выдерживающего испытания на депрессорные вещества.

Испытание проводят на здоровых кошках массой не менее 2 кг, анестезированных подходящим средством для наркоза, позволяющего поддерживать стабильный уровень артериального давления. У животного поддерживают температуру тела в физиологических пределах.

В отпрепарированную сонную артерию вставляют канюлю, заполненную подходящим раствором, предупреждающим свертывание крови, например, 50 ЕД гепарина в 1 мл раствора 9 г/л натрия хлорида. Канюлю присоединяют к системе, обеспечивающей постоянную регистрацию артериального давления. В бедренную вену вставляют вторую канюлю, наполненную выбранным антикоагулянтом, через которую вводят раствор гистамина дигидрохлорида (гистамина раствор в методике 1, раствор сравнения - в методике 2), а затем испытуемый раствор.

Испытуемый раствор. Испытуемый образец растворяют или разводят в растворе 9 г/л натрия хлорида или в другом подходящем растворителе до обоснованной концентрации.

Для определения чувствительности кошки к гистамину готовят гистамина раствор. Затем животному через равные промежутки времени вводят гистамина раствор в объеме 1,0 мл и 1,5 мл на кг массы тела.

Введение гистамина раствора в объеме 1,0 мл/кг повторяют не менее трех раз. Вторую и последующие инъекции проводят не ранее, чем через одну минуту после того, как артериальное давление вернется к уровню, наблюдавшемуся непосредственно перед предыдущей инъекцией. Животное используют в испытании в случае, если при повторных введениях гистамина раствора в объеме 1,0 мл/кг регистрируют близкие значения снижения артериального давления, а при введении гистамина раствора в объеме 1,5 мл/кг - более выраженную реакцию.

Вводят гистамина раствор в объеме 1,0 мл/кг, затем две последовательные инъекции испытуемого раствора и заканчивают введением гистамина раствора в объеме 1,0 мл/кг. Выполняют два цикла введения испытуемого образца и гистамина раствора в объеме 1,0 мл/кг. Завершают испытание введением гистамина раствора в объеме 1,5 мл/кг.

Результаты испытания признают недостоверными, если реакция артериального давления на введение гистамина раствора в объеме 1,5 мл/кг не превышает реакцию на гистамин в объеме 1,0 мл/кг.

Испытуемый образец не выдерживает испытание, если:

- среднее значение реакции артериального давления на его введение превышает среднее значение реакции на введение гистамина раствора в объеме 1,0 мл/кг;

- любая из инъекций испытуемого образца вызывает более выраженную депрессорную реакцию, чем ответ на гистамина раствор в объеме 1,5 мл/кг.

Животное не следует использовать для испытаний, если:

- любая из инъекций испытуемого образца вызывает более выраженную депрессорную реакцию, чем ответ на гистамина раствор в объеме 1,5 мл/кг;

- если ответ на введение гистамина раствора в объеме 1,5 мл/кг, после испытуемого образца меньше, чем средний ответ на инъекции гистамина раствора в объеме 1,0 мл/кг.

Раствор сравнения. Для приготовления раствора сравнения используют гистамина дигидрохлорид в пересчете на гистамин-основание (коэффициент пересчета гистамина дигидрохлорида на гистамин-основание равен 0,6038) и раствор 9 г/л натрия хлорида для инъекций или воду для инъекций. Концентрация растворов сравнения должна составлять 0,5 мкг/мл (раствор сравнения 1) и 1,0 мкг/мл (раствор сравнения 2).

Введение растворов на протяжении всего испытания проводят со скоростью 0,1 мл/с и интервалом между введениями не менее 5 мин.

В начале опыта проверяют чувствительность животного к гистамину. Для этого в вену последовательно вводят раствор сравнения 1 и раствор сравнения 2 в объеме 0,2 мл/кг. Животных, у которых при введении раствора сравнения 2 величина артериального давления снизится менее чем на 20 мм рт. ст., из опыта исключают. Раствор сравнения 1 вводят дважды, чтобы подтвердить стабильность реакции артериального давления кошки на гистамин.

Далее кошке однократно вводят испытуемый раствор в обоснованных объеме и концентрации.

При анализе на одном животном двух и более испытуемых образцов перед каждой инъекцией необходимо проверять величину снижения артериального давления на введение раствора сравнения 1. В случае значительного уменьшения реакции артериального давления на введение раствора сравнения 1 по сравнению с величиной артериального давления, полученной после его введения в начале испытания, необходимо вновь проверить чувствительность животного к действию раствора сравнения 2. Если снижение артериального давления составляет не менее 20 мм рт. ст., продолжают проводить испытание в соответствии с указанными выше требованиями.

Испытуемый образец считают выдержавшим испытание, если в течение 60 с после его введения снижение артериального давления не превышает реакцию на введение раствора сравнения 1.