"ФС.2.1.0561. Фармакопейная статья. Рилпивирина гидрохлорид. Рилпивирин"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание")

4-[(4-{2,6-Диметил-4-[(1E)-2-цианоэт-1-ен-1-ил]анилино}пиримидин-2-ил)амино]бензонитрила гидрохлорид.

Содержит не менее 98,0% и не более 102,0% рилпивирина гидрохлорида C₂₂H₁₈N₆·HCl в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в диметилформамиде, практически нерастворим в воде, метаноле, этаноле.

1. ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца рилпивирина гидрохлорида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика рилпивирина на хроматограмме раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (раздел "Количественное определение").

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Буферный раствор. Растворяют 3,0 г натрия октансульфоната в 1000 мл воды, прибавляют 1,0 мл фосфорной кислоты концентрированной и перемешивают.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор - ацетонитрил 300:700. Срок годности - 24 ч.

Растворитель. Метанол - ацетонитрил 50:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе, при необходимости обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объем раствора растворителем до метки. Срок годности раствора - 2 ч.

Раствор стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (А). В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца рилпивирина гидрохлорида, растворяют в растворителе, при необходимости обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объем раствора растворителем до метки. Срок годности раствора - 2 ч.

Раствор стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (Б). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (А) и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор Z-изомера. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1 мг Z-изомера рилпивирина гидрохлорида, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.

Примечание

Z-изомер: 4-[(4-{2,6-диметил-4-[(1Z)-2-цианоэт-1-ен-1-ил]анилино}пиримидин-2-ил)амино]бензонитрил [500287-94-5].

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца рилпивирина гидрохлорида, растворяют в 2 мл растворителя, при необходимости обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 0,5 мл раствора Z-изомера и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (Б) и доводят объем раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (Б) и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика рилпивирина должно быть не менее 10,0.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (R_S) между пиками рилпивирина и Z-изомера должно быть не менее 1,5;

- фактор асимметрии пика (A_S) рилпивирина должен быть не более 2,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (Б):

- относительное стандартное отклонение площади пика рилпивирина должно быть не более 5,0% (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику рилпивирина, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика рилпивирина на хроматограмме раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (Б);

a₁ - навеска субстанции, мг;

a₀ - навеска фармакопейного стандартного образца рилпивирина гидрохлорида, мг;

P - содержание рилпивирина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце рилпивирина гидрохлорида, %.

- Z-изомер - не более 0,5%;

- любая другая примесь - не более 0,1%;

- сумма примесей - не более 1,0%.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05%).

Вода. Не более 0,5% (ОФС "Определение воды", метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС "Тяжелые металлы" (метод 3В), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания "Родственные примеси" со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, полученного в испытании "Родственные примеси", и доводят объем раствора растворителем до метки. Срок годности раствора - 2 ч.

Раствор стандартного образца рилпивирина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (А), полученного в испытании "Родственные примеси", и доводят объем раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца рилпивирина гидрохлорида и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида:

- фактор асимметрии пика (A_S) рилпивирина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика рилпивирина должно быть не более 2,0% (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику рилпивирина, должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок.

Содержание рилпивирина гидрохлорида C₂₂H₁₈N₆·HCl в субстанции в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика рилпивирина на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика рилпивирина на хроматограмме раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида;

a₁ - навеска субстанции, мг;

a₀ - навеска фармакопейного стандартного образца рилпивирина гидрохлорида, мг;

P - содержание рилпивирина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце рилпивирина гидрохлорида, %;

W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.

В защищенном от света месте.