"ФС.2.1.0343. Фармакопейная статья. Алпразолам"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание")

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1-Метил-6-фенил-8-хлор-4H-[1,2,4]триазоло[4,3-a][1,4]бензодиазепин.

Содержит не менее 99,0% и не более 101,0% алпразолама C₁₇H₁₃ClN₄ в пересчете на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

<*> Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в хлороформе, умеренно растворим в спирте 96%, практически нерастворим в воде.

<*> Растворяется в разбавленной азотной кислоте.

--------------------------------

<*> Приводится для информации.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца алпразолама.

Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объемах этилацетата, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. Спектрофотометрия (ОФС "Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях").

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг субстанции, растворяют в спирте 96% и доводят объем раствора спиртом 96% до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл переносят 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора спиртом 96% до метки.

Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 350 нм должен иметь максимум при 223 нм и плечо в интервале от 240 до 250 нм.

ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 225 до 230 °C (ОФС "Температура плавления", метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС "Тонкослойная хроматография").

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F₂₅₄.

Подвижная фаза (ПФ). В делительную воронку помещают смесь растворителей метанол - аммиака раствор концентрированный 25% - этилацетат 20:30:80, встряхивают в течение 5 мин и оставляют до полного разделения слоев. В качестве ПФ используют верхний слой.

ПФ допустимо использовать только однократно.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в хлороформе и доводят объем тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца алпразолама. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца алпразолама, растворяют в хлороформе и доводят объем тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения 1. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца алпразолама и доводят объем раствора хлороформом до метки.

Раствор сравнения 2. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл раствора стандартного образца алпразолама и доводят объем раствора хлороформом до метки.

Раствор сравнения 3. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 3,0 мл раствора стандартного образца алпразолама и доводят раствор хлороформом до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг фармакопейного стандартного образца диазепама, растворяют в 25 мл хлороформа при встряхивании и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. Смешивают 2,0 мл полученного раствора и 2,0 мл раствора стандартного образца алпразолама. Раствор используют свежеприготовленным.

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (100 мкг), раствора сравнения 1 (0,1 мкг), раствора сравнения 2 (0,2 мкг), раствора сравнения 3 (0,3 мкг) и раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в предварительно насыщенную в течение не менее 1 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения 1 должна обнаруживаться четкая зона адсорбции.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы должны обнаруживаться 2 разделенные зоны адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой примеси по совокупности величины и степени подавления флуоресценции не должна превышать зону адсорбции алпразолама на хроматограмме раствора сравнения 3 (не более 0,3%).

Суммарное содержание примесей, оцененное по совокупности величины и степени подавления флуоресценции их зон адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора в сравнении с зонами адсорбции на хроматограммах раствора сравнения 1, раствора сравнения 2 и раствора сравнения 3, содержащих 0,1 мкг, 0,2 мкг и 0,3 мкг алпразолама, не должно превышать 1,0%.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС "Потеря в массе при высушивании", способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС "Тяжелые металлы" (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании "Сульфатная зола", с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС "Титриметрия (титриметрические методы анализа)").

Растворяют 0,14 г (точная навеска) субстанции в смеси из 20 мл уксусного ангидрида и 30 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС "Потенциометрическое титрование") по второму перегибу на кривой титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 15,44 мг алпразолама C₁₇H₁₃ClN₄.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.