"ФС.2.1.0526. Фармакопейная статья. Нистатин"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание")

Полиеновый антибиотик, продуцируемый актиномицетом Streptomyces noursei. (1S,3R,4R,7R,9R,11R,15S,16R,17R,18S,19E,21E,25E,27E,29E,31E,33R,35S,36R,37S)-33-[(3-Амино-3,6-дидезокси--D-маннопиранозил)окси]-1,3,4,7,9,11,17,37-октагидрокси-15,16,18-триметил-13-оксо-14,39-диоксабицикло[33.3.1]нонатриаконта-19,21,25,27,29,31-гексаен-36-карбоновая кислота (основной компонент - нистатин A₁).

Содержит не менее 4400 единиц действия (ЕД) на один миллиграмм нистатина C₄₇H₇₅NO₁₇ в пересчете на сухое вещество. Одна ЕД соответствует одной единице действия Международного стандарта нистатина.

Описание. Желтого или желто-коричневого цвета порошок.

<*> Гигроскопичен. Неустойчив к воздействию света, кислороду воздуха и нагреванию.

--------------------------------

<*> Приводится для информации.

Растворимость. Легко растворим в диметилформамиде и диметилсульфоксиде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в воде и спирте 96%.

1. ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца нистатина.

2. Спектрофотометрия (ОФС "Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях").

Спектр поглощения испытуемого раствора, полученного в разделе "Оптическая плотность", в области длин волн от 220 до 350 нм (в кювете с толщиной слоя 1 см) должен иметь максимумы при 230 нм, 291 нм, 304 нм и 319 нм. Отношение оптических плотностей раствора в максимумах при 291 нм и 319 нм к оптической плотности в максимуме при 305 нм должно быть от 0,61 до 0,73 и от 0,83 до 0,96, соответственно.

Отношение оптической плотности в максимуме при 230 нм к оптической плотности на плече при 280 нм должно быть от 0,83 до 1,25.

3. Качественная реакция с хлористоводородной кислотой концентрированной. К 2,0 мг субстанции прибавляют 0,1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, должно появиться коричневое окрашивание.

4. Качественная реакция с серной кислотой концентрированной. К 2,0 мг субстанции прибавляют 0,1 мл серной кислоты концентрированной, должно появиться коричневое окрашивание. При отстаивании окраска должна измениться на фиолетовую.

Оптическая плотность. Оптическая плотность испытуемого раствора, измеренная при длине волны 305 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, относительно раствора сравнения, должна быть не менее 0,60 (ОФС "Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях").

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объем раствора метанолом до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора метанолом до метки. Измерение проводят в течение не более 30 мин после приготовления.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл растворителя и доводят объем раствора метанолом до метки.

Содержание компонентов A₁ и A_X нистатина. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Буферный раствор. К 1500 мл воды прибавляют 5,78 г аммония ацетата, фильтруют через мембранный фильтр и дегазируют ультразвуком.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил - Буферный раствор 290:710.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор - ацетонитрил 400:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции и доводят объем раствора диметилсульфоксидом до метки.

Раствор стандартного образца нистатина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца нистатина и доводят объем раствора диметилсульфоксидом до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20,0 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 25,0 мл метанола и доводят объем раствора водой до метки. К 10 мл полученного раствора прибавляют 2,0 мл кислоты хлористоводородной разведенной 7,3% и выдерживают при комнатной температуре в течение 1 ч.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца нистатина и доводят объем раствора диметилсульфоксидом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора диметилсульфоксидом до метки.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Нистатин A₁ - 1 (около 14 мин). Для идентификации пиков используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора сравнения.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения разрешение (R_S) между двумя основными пиками должно быть не менее 3,5 (время удерживания - около 13 мин и 19 мин).

Основного компонента A₁ должно быть не менее 85%, любых других компонентов A_X - не более 4%.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика компонента A₁ на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы и любые пики, время удерживания которых менее 2 мин.

Потеря в массе при высушивании. Не более 5,0% (ОФС "Потеря в массе при высушивании", способ 3). Сушат 1,0 г (точная навеска) субстанции до постоянной массы при температуре 60 °C в течение 3 ч при остаточном давлении не более 0,1 кПа.

Сульфатная зола. Не более 3,5% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

Определение проводят методом диффузии в агар (ОФС "Определение антимикробной активности антибиотиков методом диффузии в агар").

В герметично укупоренной упаковке, в защищенном от света месте при температуре не выше 5 °C.