"ФС.2.1.0412. Фармакопейная статья. Диметилфумарат"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание")

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Диметил[(E)-бут-2-ендиоат].

Содержит не менее 97,0% и не более 102,0% диметилфумарата C₆H₈O₄ в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в хлороформе, мало растворим в метаноле, спирте 96% и воде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см^-1, снятый в диске с калия бромидом, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца диметилфумарата.

2. Спектрофотометрия (ОФС "Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях").

Срок годности растворов - 2 ч.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в спирте 96% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора спиртом 96% до метки.

Раствор стандартного образца диметилфумарата. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца диметилфумарата, растворяют в спирте 96% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора спиртом 96% до метки.

Спектры поглощения испытуемого раствора и раствора стандартного образца диметилфумарата в области длин волн от 190 до 350 нм (в кювете толщиной 1 см) должны иметь максимум при одной и той же длине волны.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 5 мл спирта 96%, прибавляют 1 каплю калия перманганата раствора 3%; должно появиться коричневое окрашивание и через некоторое время должен образовываться коричневый осадок.

4. Качественная реакция. К 0,5 г субстанции прибавляют 1 г резорцина и перемешивают. В фарфоровую чашку помещают 0,5 г полученной смеси, прибавляют 6 капель серной кислоты концентрированной и осторожно нагревают; должна образовываться темно-оранжевая полутвердая масса, при осторожном прибавлении к которой 100 мл воды должно появиться желтое окрашивание.

ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 102 °C до 106 °C (ОФС "Температура плавления", метод 1).

pH раствора. От 4,0 до 6,0 (ОФС "Ионометрия", метод 3).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,5 г субстанции, прибавляют 30 мл воды, перемешивают на магнитной мешалке в течение 15 мин и доводят объем раствора водой до метки.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Буферный раствор. Растворяют 1,15 г аммония дигидрофосфата в 900 мл воды, прибавляют 2 мл триэтиламина и доводят значение pH фосфорной кислотой разведенной 10% до 3,0. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол - буферный раствор 250:750.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 10 мл метанола, растворяют, при необходимости обрабатывая ультразвуком в течение 5 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объем раствора ПФ до метки. Срок годности раствора - 2 ч.

Раствор фумаровой кислоты. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) фумаровой кислоты, растворяют в 50 мл ПФ и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,3 мл испытуемого раствора, 0,3 мл раствора фумаровой кислоты и доводят объем раствора ПФ до метки. Срок годности раствора - 6 ч.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 10 мг субстанции в 20 мл метанола, прибавляют 2 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М, выдерживают при температуре 50 - 55 °C в течение 30 мин и охлаждают до комнатной температуры. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 50 мл ПФ, 1,0 мл испытуемого раствора, 1,0 мл раствора фумаровой кислоты и доводят объем раствора ПФ до метки.

Срок годности раствора - 2 ч.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл стандартного раствора и доводят объем раствора ПФ до метки. Срок годности раствора - 6 ч.

Примечание

Фумаровая кислота: (2E)-бут-2-ендиовая кислота [110-17-8].

Монометилфумарат: (E)-4-метокси-4-оксобут-2-еновая кислота [2756-87-8].

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, стандартный и испытуемый растворы.

Относительное время удерживания соединений. Диметилфумарат - 1 (около 12 мин); фумаровая кислота - около 0,17; монометилфумарат - около 0,3.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для каждого из пиков диметилфумарата и фумаровой кислоты должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (R_S) между пиками фумаровой кислоты и монометилфумарата должно быть не менее 3,0;

- разрешение (R_S) между пиками монометилфумарата и диметилфумарата должно быть не менее 7,0.

На хроматограмме стандартного раствора:

- фактор асимметрии пика (A_S) диметилфумарата должен быть не более 1,8;

- относительное стандартное отклонение площади каждого из пиков диметилфумарата и фумаровой кислоты должно быть не более 3,0% (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику диметилфумарата, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.

Содержание фумаровой кислоты в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика фумаровой кислоты на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика фумаровой кислоты на хроматограмме стандартного раствора;

a₁ - навеска субстанции, мг;

a₀ - навеска фумаровой кислоты, мг;

P - содержание основного вещества в образце фумаровой кислоты, %.

Содержание монометилфумарата и любой другой примеси в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика монометилфумарата или любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика диметилфумарата на хроматограмме стандартного раствора;

0,3 - содержание диметилфумарата в растворе сравнения, % от испытуемого раствора.

- фумаровая кислота - не более 0,3%;

- монометилфумарат - не более 0,3%;

- любая другая примесь - не более 0,2%;

- сумма примесей - не более 1,0%.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,03%.

Вода. Не более 1,0% (ОФС "Определение воды", метод 2). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,002%, ОФС "Тяжелые металлы" (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС "Титриметрия (титриметрические методы анализа)").

Помещают 1 г (точная навеска) субстанции в колбу для титрования, прибавляют 50,0 мл 0,5 М раствора натрия гидроксида, нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 15 мин, холодильник промывают 15 мл воды, охлаждают колбу до комнатной температуры и титруют 0,5 М раствором хлористоводородной кислоты до перехода голубой окраски в желтую (индикатор 3 - 5 капель бромтимолового синего раствора 0,04% спиртового).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,5 М раствора натрия гидроксида соответствует 36,03 мг диметилфумарата C₆H₈O₄.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.