"ФС.2.5.0066.18. Фармакопейная статья. Горицвета весеннего трава"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том IV")

Собранная в период цветения до начала осыпания плодов и высушенная трава дикорастущего многолетнего травянистого растения горицвета весеннего (адониса весеннего) - Adonis vernalis L., семейства лютиковых - Ranunculaceae.

Внешние признаки. Цельное сырье. Цельные или частично измельченные олиственные стебли с цветками или без них, реже с бутонами или плодами разной степени развития, иногда частично осыпавшимися. Стебли, срезанные выше бурых низовых чешуевидных листьев, длиной 10 - 35 см, толщиной до 0,4 см, просты или маловетвистые. Листья очередные, сидячие, полустеблеобъемлющие, в общем очертании округлые или широкоовальные, пальчаторассеченные на 5 долей, из которых 2 нижних - перисторассеченные, три верхних - дважды перисторассеченные; доли листьев линейные, у верхушки шиловидно-заостренные, цельнокрайние, длиной 0,5 - 2 см, шириной 0,5 - 1 мм. Листья, собранные после отцветания, жестковатые. Цветки одиночные на верхушке стеблей, правильные, около 3,5 см в поперечнике, свободнолепестные, с 5 - 8 чашелистиками, с 15 - 20 лепестками, с многочисленными тычинками и пестиками. Чашелистики яйцевидные, вверху притупленные с редкими зубцами, опушенные, длиной 12 - 20 мм, шириной около 12 мм, легко опадающие. Лепестки продолговато-эллиптические, на верхушке суженные, зазубренные. Плод сборный, овальный, состоит из многочисленных сухих орешков, сидящих на цилиндрическом буроватом цветоложе. Орешки длиной 3,5 - 5,5 мм, шириной около 3 мм, овальные с коротким клювообразно загнутым столбиком, морщинисто-ячеистые, опушенные.

Цвет стеблей и листьев зеленый, цветков - золотисто-желтый, плодов - серовато-зеленый. Запах слабый. Вкус не определяется.

Измельченное сырье. Смесь кусочков стеблей, листьев, частей цветков и плодов, проходящая сквозь сито с отверстиями размером 7 мм. Цвет кусочков стеблей и листьев зеленый, цветков - золотисто-желтый. Запах слабый. Вкус не определяется.

Микроскопические признаки. Цельное сырье. Измельченное сырье.

При рассмотрении препарата листа с поверхности с обеих сторон должны быть видны крупные клетки эпидермиса с сильноизвилистыми стенками, несколько вытянуты по длине дольки. Клетки эпидермиса иногда имеют четковидные утолщения. Кутикула с ясно выраженной продольной, волнистой складчатостью. Устьица только на нижней стороне, крупные, овальные, слегка выступающие над поверхностью листа, окружены 4 - 5 клетками эпидермиса (аномоцитный тип) и ориентированы вдоль пластинки листа. По краю долек листа и у основания изредка встречаются одноклеточные волоски двух типов: длинные, лентовидные с закругленной верхушкой, суженные у основания, и короткие булавовидные волоски, резко суженные у места прикрепления. Все волоски со спирально-складчатой кутикулой, прикреплены к очень маленькой округлой клетке эпидермиса.

При рассмотрении чашелистиков с поверхности должны быть видны прямоугольные вытянутые клетки эпидермиса с прямыми или слегка извилистыми стенками и с выраженной продольной, волнистой складчатостью кутикулы, иногда с четковидным утолщением. Устьица аномоцитного типа расположены с наружной стороны, ориентированы вдоль чашелистика. По всей поверхности встречаются характерные для данного вида сырья волоски. Длинные, лентовидные волоски иногда прикреплены к эпидермису в виде пучка, по 2 - 3 волоска. В мезофилле чашелистиков встречаются одиночные призматические кристаллы оксалата кальция и сферокристаллы. Эпидермис лепестков представлен прямоугольно-вытянутыми клетками с извилистыми стенками. Обнаруживаются пыльцевые зерна округлой формы с тремя порами.

В "давленом" препарате плода должны быть видны толстостенные с четковидным утолщением клетки экзокарпия. Кутикула с ясно выраженной волнистой складчатостью. Волоски простые, одноклеточные со спирально-складчатой кутикулой. В месте прикрепления волоска эпидермальные клетки с лучисто-морщинистой кутикулой образуют розетку. Волоски прикрепляются по одному или по 2 - 3. Встречаются пласты и отдельные склереиды. Эндокарпий представлен полигональными клетками. Эндосперм состоит многоугольных клеток, заполненных алейроновыми зернами и каплями жирного масла.

В "давленом" препарате стебля должны быть видны прямоугольные вытянутые клетки эпидермиса с прямыми стенками, иногда с четковидным утолщением. Устьица аномоцитного типа ориентированы вдоль стебля. Эпидермис имеет выраженную продольную, волнистую складчатостью кутикулы в местах расположения устьиц. Паренхима сердцевины состоит из продолговатых клеток с утолщенными пористыми оболочками. Проводящая система представлена спиральными, лестничными и сетчатыми сосудами.

1 - фрагмент эпидермиса листа с сильноизвилистыми стенками и складчатостью кутикулы (200x); 2 - фрагмент эпидермиса листа (200x): а - устьице аномоцитного типа, б - четковидное утолщение стенок; 3 - верхушка доли листа (200x); 4 - фрагмент эпидермиса с устьицами ориентированными вдоль пластинки листа (40x); 5 - простые одноклеточные волоски с спирально-складчатой кутикулой (200x); 6 - булавовидный волосок (400x); 7 - фрагмент эпидермиса чашелистика с четковидным утолщением (а), устьицем аномоцитного типа (б) и местом прикрепления волоска (в) (400x); 8 - фрагмент эпидермиса с простыми одноклеточными волосками и устьицами ориентированными вдоль чашелистика ("давленый" препарат) (200x); 9 - призматические кристаллы оксалата кальция (400x); 10 - сферокристаллы оксалата кальция (400x); 11 - пыльца (200x); 12 - фрагмент эпидермиса плода (200x): а - толстостенные клетки с четковидным утолщением, б - складчатость кутикулы, в - пучковидный волосок; 13 - фрагмент эпидермиса плода (400x); а - устьице аномоцитного типа, б - место прикрепления волоска; 14 - фрагмент эпидермиса плода: одиночные простые волоски (200x); 15 - фрагмент эпидермиса плода ("давленый" препарат) (200x): а - эндокарпий, б - каменистые клетки, в - клетки эндосперма с крахмалом и каплями жирного масла; 16 - фрагмент эпидермиса стебля с прямоугольными вытянутыми клетками и устьицем аномоцитного типа (200x); 17 - сетчатые (а) и спиральные сосуды стебля (б) (200x).

Раствор 5 г/л.

1 мл раствора А или 1 мл раствора Б, приготовленных для испытания по показателю "Биологическая активность", разбавляют 2 мл воды. К 1 мл полученного раствора прибавляют 2 капли натрия нитропруссида раствора 0,5% и 3 капли натрия гидроксида раствора 10%; должно наблюдаться коричневато-желтое окрашивание, которое затем переходит в желтое (сердечные гликозиды).

К 1 капле раствора А или раствора Б прибавляют 8 капель серной кислоты концентрированной; должно наблюдаться темно-красное окрашивание (сердечные гликозиды).

Влажность. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 13%.

Зола общая. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 12%.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 5%.

Растений со стеблями, имеющими бурые чешуйчатые листья. Цельное сырье - не более 2%.

Измельченность сырья. Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, - не более 5%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,25 мм, - не более 5%.

Потемневших частей растения. Цельное сырье - не более 3%.

Растений со стеблями, имеющими бурые чешуйчатые листья. Цельное сырье - не более 2%.

Органической примеси. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 2%.

Минеральной примеси. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 0,5%.

Тяжелые металлы и мышьяк. В соответствии с требованиями ОФС "Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах".

Радионуклиды. В соответствии с требованиями ОФС "Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах".

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Цельное сырье. Биологическая активность 1 г должна быть 50 - 66 ЛЕД. Измельченное сырье. Биологическая активность 1 г должна быть 50 - 66 ЛЕД.

Биологическая активность. Активность цельного сырья, измельченного сырья определяют биологическим методом на лягушках по сравнению со стандартным образцом (СО) цимарина в соответствии с требованиями ОФС "Биологические методы оценки активности лекарственного растительного сырья и лекарственных препаратов, содержащих сердечные гликозиды".

Испытание на лягушках. Испытание проводят на травяных лягушках, вводя растворы в лимфатические бедренные мешки (под кожу) или в сердце (в полость желудочка), или на водяных лягушках, вводя раствор под кожу, в полость желудочка или в вену. Стандартный и испытуемый образцы готовят в день опыта.

Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, и сушат в сушильном шкафу в течение 2 ч при температуре 40 - 60 °C.

Извлечение из травы горицвета готовят в зависимости от способа введения.

Для подкожного введения 5 г измельченного и высушенного сырья экстрагируют 110 мл спирта 95% в аппарате Сокслета в течение 6 - 8 ч. извлечение собирают в цилиндр вместимостью 100 мл и доводят объем спиртом 95% до метки (1 : 20) (раствор А).

Для внутрисердечного и внутривенного введения 5 г измельченного и высушенного сырья помещают в колбу с притертой пробкой вместимостью 500 мл, прибавляют 110 мл 75% спирта (по объему) и оставляют на сутки. Затем к колбе присоединяют обратный холодильник, помещают колбу на кипящую водяную баню и экстрагируют в течение 1 ч. Извлечение охлаждают, фильтруют в цилиндр вместимостью 100 мл через четырехслойный фильтр из марли и доводят объем 75% спиртом до метки (1 : 20) (раствор Б). Срок годности раствора Б 2 суток со дня приготовления.

Стандартный и испытуемый растворы готовят в день опыта.

К 2 мл раствора цимарина 1 : 3333 прибавляют 6 мл воды (1 : 4).

20 мл раствора А/Б выпаривают на кипящей водяной бане до 2 мл и доводят объем водой до 20 мл. Образующуюся при этом муть или осадок не отфильтровывают, а прибавляют 1 - 2 капли натрия гидрокарбоната раствора 5%. Полученное таким образом спиртоводное извлечение (1 : 20) испытывают на лягушках.

Определив наименьшие дозы стандартного и испытуемого растворов, вызывающих систолическую остановку сердца у большинства лягушек (в миллилитрах на массу травяной лягушки или в миллилитрах на 1 г массы водяной лягушки), вычисляют содержание ЛЕД в 1 г травы горицвета.

Активность горицвета весеннего травы контролируется ежегодно.

Упаковка, маркировка и транспортирование. В соответствии с требованиями ОФС "Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья".

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС "Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов".