"ФС.2.5.0082.18. Фармакопейная статья. Лимонника китайского семена"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том IV")

Собранные и освобожденные от околоплодника, высушенные семена дикорастущей деревянистой лианы лимонника китайского - Schisandra chinensis (Turcz.) Baill., сем. лимонниковых - Schisandraceae.

Внешние признаки. Цельное сырье. Семена округло-почковидной формы, на вогнутой стороне с заметным темно-серым рубчиком, расположенным поперек семени. Длина 3 - 5 мм, ширина 2 - 4,5 мм, толщина 1,5 - 2,5 мм. Поверхность гладкая, блестящая, желтовато-бурого цвета. Семена состоят из твердой хрупкой кожуры и плотного ядра, которое у недоразвитых семян может отсутствовать. Кожура легко ломается и свободно отстает от ядра. Ядро подковообразной формы, восковидно-желтое, один конец конусовидно заостренный, другой округлый. На выпуклой стороне ядра семени проходит светло-коричневая бороздка. Основную массу ядра семени составляет эндосперм. В заостренном конце верхушки (в эндосперме) лежит небольшой зародыш, заметный под лупой. Цвет желтовато-коричневый. Запах сильный, характерный. Вкус водного извлечения пряный, горьковато-жгучий.

Измельченное сырье. Кусочки сырья различной формы, проходящие сквозь сито с отверстиями диаметром 5 мм. Цвет желтовато-коричневый. Запах сильный, характерный. Вкус водного извлечения пряный, горьковато-жгучий.

Микроскопические признаки. Цельное сырье. На поперечном срезе семени должна быть видна семенная кожура, состоящая из нескольких слоев. Эпидермальный слой представлен крупными радиально вытянутыми клетками, с утолщенными, одревесневшими темно-желтыми оболочками, пронизанными порами. Под ним расположен склеренхимный слой, состоящий из 4 - 6 рядов сильно одревесневших каменистых клеток.

Далее лежит слой спавшихся клеток, а за ним один ряд очень крупных тонкостенных 4-угольных клеток, содержащих маслянистые включения в виде капель лимонно-желтого цвета. Самый внутренний слой семенной кожуры - бесструктурная спавшаяся тонкостенная ткань. Эндосперм семени состоит из небольших многоугольных клеток, содержащих капли жирного масла и мелкие алейроновые зерна.

Измельченное сырье. При рассмотрении микропрепаратов измельченного сырья должны быть видны фрагменты семенной кожуры с крупными радиально вытянутыми клетками эпидермального слоя, фрагменты склеренхимы и отдельные каменистые клетки, фрагменты спавшихся клеток, эндосперма с каплями масла, алейроновые зерна, капли масла.

Около 0,5 г сырья, измельченного до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, помещают в коническую колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 25 мл спирта 70%, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 мин. Охлажденное до комнатной температуры извлечение фильтруют через бумажный фильтр "белая лента" (испытуемый раствор).

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля с флуоресцентным индикатором наносят 10 мкл (0,01 мл) испытуемого раствора. Пластинку с нанесенной пробой сушат на воздухе в течение 2 - 3 мин, затем помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 30 мин хлороформом, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителя и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться одна основная зона адсорбции фиолетового цвета и не менее 3 зон адсорбции фиолетового цвета: одна выше и две ниже основной зоны адсорбции.

0,5 г сырья экстрагируют 25 мл спирта 70% в течение 30 мин. Полученное извлечение после охлаждения упаривают на кипящей водяной бане досуха. К сухому остатку добавляют 2 мл хлористого метилена и 3 - 5 капель серной кислоты концентрированной; должно наблюдаться красно-коричневое окрашивание (лигнаны).

Влажность. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 12%.

Зола общая. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 3%.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 0,5%.

Измельченность сырья. Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 5 мм, - не более 5%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, - не более 5%.

Поврежденные семена. Цельное сырье - не более 5%.

Другие части растения. Цельное сырье - не более 3%.

Органическая примесь. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 1%.

Минеральная примесь. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 0,5%.

Тяжелые металлы и мышьяк. В соответствии с требованиями ОФС "Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах".

Радионуклиды. В соответствии с требованиями ОФС "Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах".

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Цельное сырье, измельченное сырье - содержание суммы лигнанов в пересчете на схизандрин не менее 1%.

Раствор стандартного образца (СО) дифенила. Около 0,025 г (точная навеска) СО дифенила растворяют в спирте 70% в мерной колбе вместимостью 25 мл, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают (раствор А СО дифенила). Срок годности раствора 7 суток.

1,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора спиртом 70% до метки и перемешивают (раствор Б СО дифенила). Раствор используют свежеприготовленным.

Хроматографическая система считается пригодной, если выполняются следующие условия:

- эффективность хроматографической колонки, рассчитанная по пику дифенила на хроматограмме раствора Б СО дифенила, должна быть не менее 5000 теоретических тарелок;

- относительное стандартное отклонение площади пика дифенила на пяти хроматограммах не должна превышать 3%;

- фактор асимметрии пика дифенила должен быть не менее 0,8 и не более 1,5%.

Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. Около 1,0 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляют 50 мл спирта 70%, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 45 мин. Полученное извлечение охлаждают до комнатной температуры и фильтруют в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора спиртом 70% до метки и перемешивают (раствор А испытуемого раствора).

10,0 мл раствора А испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора спиртом 70% до метки и перемешивают (раствор Б испытуемого раствора).

Хроматографируют раствор Б СО дифенила, получая не менее 5 хроматограмм. Результаты считаются достоверными, если выполняются требования теста "Проверка пригодности хроматографической системы".

Хроматографируют попеременно раствор Б испытуемого раствора и раствор Б СО дифенила, получая не менее 3 хроматограмм. Расчет содержания суммы лигнанов проводят по методу внешнего стандарта.

Содержание суммы лигнанов в пересчете на схизандрин в абсолютно сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

где a - навеска сырья, г;

a₀ - навеска СО дифенила, г;

k - коэффициент пересчета на схизандрин, k = 1,89;

S₀ - площадь пика на хроматограмме раствора Б СО дифенила;

S_x - суммарная площадь пиков на хроматограмме раствора Б испытуемого раствора с относительными временами удерживания (по дифенилу) в интервале от 0,3 до 2,3;

W - влажность сырья, %.

Упаковка, маркировка и транспортирование. В соответствии с требованиями ОФС "Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов".

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС "Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов".