"ФС.2.6.0014.18. Фармакопейная статья. Бриония. Настойка гомеопатическая матричная"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том IV")

Настоящая фармакопейная статья распространяется на Бриония - Bryonia, настойку гомеопатическую матричную, получаемую из свежих, собранных перед цветением корней брионии двудомной - Bryonia cretica ssp. dioica (Jacq.) Tutin или брионии белой - Bryonia alba L., сем. тыквенных - Cucurbitaceae, и применяемую для производства/изготовления гомеопатических лекарственных препаратов.

Получение настойки гомеопатической матричной осуществляется по методу 2 ОФС "Настойки гомеопатические матричные".

Прозрачная жидкость от светло-желтого до темно-желтого цвета без характерного запаха.

Ванилина раствор в фосфорной кислоте. 0,50 г ванилина растворяют в смеси, состоящей из 15,0 мл кислоты ортофосфорной концентрированной и 85,0 мл спирта 96%, осторожно перемешивают. Срок годности 2 сут.

Раствор стандартного образца (СО) фенолфталеина. 0,1 г СО фенолфталеина растворяют в 10 м спирта 96%. Раствор используют свежеприготовленным.

В делительную воронку вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл настойки, прибавляют 20,0 мл хлороформа, встряхивают в течение 3 мин и оставляют до разделения фаз. Нижнюю фазу сливают в круглодонную колбу вместимостью 50 мл. Хлороформное извлечение выпаривают с помощью роторного испарителя при нагревании на кипящей водяной бане досуха. Сухой остаток растворяют в 1,0 мл этилового спирта 96% (испытуемый раствор).

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля наносят полосой длиной 10 мм и шириной не более 2 мм 15 мкл испытуемого раствора и 0,5 мкл раствора СО фенолфталеина. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в хроматографическую камеру, предварительно насыщенную в течение 10 мин смесью растворителей: хлороформ - ацетон (6:1), и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, хроматограмму вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают ванилина раствором в фосфорной кислоте, выдерживают при температуре 100 °C в течение 5 - 8 мин и просматривают при дневном свете.

На хроматограмме раствора СО фенолфталеина в нижней трети должна обнаруживаться зона адсорбции розового цвета, обесцвечивающаяся в течение нескольких минут.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться: на линии старта зона адсорбции серо-коричневого или желто-коричневого цвета, зона адсорбции желтого цвета ниже уровня зоны адсорбции СО фенолфталеина, выше несколько зон фиолетового и розово-фиолетового цвета на уровне или немного ниже зоны адсорбции СО фенолфталеина, три и более зон от фиолетового до ярко-фиолетового цвета выше уровня зоны адсорбции СО фенолфталеина и еще выше зона красновато-фиолетового цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции желтого или светло-фиолетового цвета.

2. К 2 мл настойки прибавляют 0,2 мл железа (III) хлорида раствора 1%; должно наблюдаться образование коричневого окрашивания с помутнением. К полученной смеси осторожно по стенке пробирки прибавляют 1 мл серной кислоты концентрированной; на границе раздела фаз должно наблюдаться образование сине-зеленого окрашивания (гликозиды).

3. К 2 мл настойки, прибавляют 0,5 мл натрия гидроксида раствора 10% и 0,1 мл пикриновой кислоты насыщенного раствора, нагревают в течение 3 мин на кипящей водяной бане; должно наблюдаться окрашивание красного цвета (гликозиды).

Сухой остаток. Не менее 1,7% (ОФС "Настойки").

Плотность. От 0,940 до 0,965 (ОФС "Плотность").

Тяжелые металлы. Не более 0,001% (ОФС "Настойки").

<*> Метанол и 2-пропанол. Не более 0,05% метанола и не более 0,05% 2-пропанола. В соответствии с требованиями ОФС "Определение метанола и 2-пропанола" (<*> контролируется в течение технологического процесса).

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Суммы кукурбитацинов в пересчете на кукурбитацин E (C₃₂H₄₄O₈; М.м. 556,7) в настойке должно быть не менее 0,001% и не более 0,020%

Раствор стандартного образца (СО) кукурбитацина E. Около 2,0 мг (точная навеска) СО кукурбитацина E помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, прибавляют 4 мл метанола, перемешивают до полного растворения, доводят объем раствора метанолом до метки, перемешивают.

Срок годности растворов не более 30 сут при хранении в плотно укупоренной таре в прохладном, защищенном от света месте.

Хроматографическая система считается пригодной, если выполняются следующие условия:

- относительное стандартное отклонение площади пика кукурбитацина E должно быть не более 2,0%;

- фактор асимметрии пика кукурбитацина E должен быть не более 2,0;

- эффективность хроматографической колонки, рассчитанная по пику кукурбитацина E, должна быть не менее 5000 теоретических тарелок.

Около 5,0 г (точная навеска) настойки фильтруют через нейлоновый фильтр (с размером пор 0,45 мкм) в мерную колбу, вместимостью 5 мл и доводят спиртом 90% до метки (испытуемый раствор).

Хроматографируют попеременно испытуемый раствор и раствор СО кукурбитацина E, получая не менее 3 хроматограмм. Результаты считаются достоверными, если выполняются требования теста "Проверка пригодности хроматографической системы".

Время удерживания пиков веществ относительно кукурбитацина E (время удерживания кукурбитацина E около 15 мин) составляет:

Время регистрации хроматограммы должно не менее чем в 2 раза превышать время удерживания пика кукурбитацина E.

Содержание суммы кукурбитацинов в настойке гомеопатической матричной в пересчете на кукурбитацин E в процентах (X) вычисляют по формуле:

S - сумма площадей пиков кукурбитацинов на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика кукурбитацина E на хроматограмме раствора СО кукурбитацина E;

a - навеска настойки, г;

a₀ - навеска стандарта, г;

P - содержание кукурбитацина E в стандартном образце, %.

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС "Настойки гомеопатические матричные".

Хранить с осторожностью.