"ФС.2.6.0022.18. Фармакопейная статья. Календула оффициналис флорес (4). Настойка гомеопатическая матричная"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том IV")

Настоящая фармакопейная статья распространяется на Календула оффициналис флорес (4) - Calendula officinalis flores (4) настойку гомеопатическую матричную, получаемую из высушенных цветков ноготков лекарственных (календулы лекарственной) - Calendula officinalis L., сем. астровых - Asteraceae, и применяемую для производства/изготовления гомеопатических лекарственных препаратов.

Получение настойки гомеопатической матричной осуществляется по способу 4 ОФС "Настойки гомеопатические матричные"

Прозрачная жидкость от желто-оранжевого до светло-коричневого цвета с характерным ароматным запахом.

Раствор стандартного образца (СО) . 0,02 г СО растворяют в 100 мл хлороформа. Раствор используют свежеприготовленным.

Раствор стандартных образцов (СО) рутина и хлорогеновой кислоты. 0,0025 г СО рутина и 0,001 г СО хлорогеновой кислоты растворяют в 10 мл спирта 96% и перемешивают. Срок годности раствора 3 мес при хранении в хорошо укупоренной упаковке в прохладном защищенном от света месте.

1. На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля наносят полосой 10 мм 20 мкл настойки и 10 мкл раствора СО рутина и хлорогеновой кислоты. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру со смесью растворителей муравьиная кислота безводная - вода - этилацетат (10:10:80) и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры и высушивают на воздухе до удаления следов растворителей. Затем пластинку выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100 - 105 °C в течение 2 - 3 мин, еще теплую обрабатывают последовательно дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствором 1% в спирте 96%, макрогола 400 раствором спиртовым 5% и через 10 мин просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

На хроматограмме раствора СО рутина и хлорогеновой кислоты должны обнаруживаться зона адсорбции желтовато-коричневого цвета рутина, выше - зона светло-голубого цвета хлорогеновой кислоты.

На хроматограмме настойки должны обнаруживаться зона желтовато-коричневого цвета на уровне зоны на хроматограмме СО рутина и зона светло-голубого цвета на уровне зоны на хроматограмме СО хлорогеновой кислоты. Допускается обнаружение других зон.

2. 5,0 мл настойки помещают в колбу со шлифом вместимостью 50 мл, прибавляют 10 мл хлороформа, присоединяют к обратному холодильнику, нагревают кипящей на водяной в течение 10 мин и охлаждают. Полученный раствор фильтруют через бумажный фильтр и выпаривают на кипящей водяной бане до объема 1 мл (испытуемый раствор).

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля наносят 30 мкл испытуемого раствора и 20 мкл раствора СО . Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение 1 ч смесью растворителей гексан - бензол (85:15), и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, помещают в сушильный шкаф и выдерживают при температуре 110 °C в течение 5 мин и просматривают при дневном свете.

На хроматограмме СО должна обнаруживаться зона адсорбции темного цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции темного цвета на уровне зоны на хроматограмме СО ; допускается обнаружение 2 дополнительных зон адсорбции желто-оранжевого цвета ниже зоны на хроматограмме СО и зона на линии старта.

3. К 2 мл настойки прибавляют 0,2 мл раствора железа (III) хлорида 3%; должно появиться черно-зеленое окрашивание, исчезающее при добавлении серной кислоты разведенной (дубильные вещества).

4. К 1 мл настойки прибавляют 0,5 мл раствора натрия гидроксида 10%, 0,5 мл пикриновой кислоты насыщенного раствора, нагревают в течение нескольких минут на кипящей водяной бане; должно появиться темно-красное окрашивание (восстанавливающие сахара).

5. К 1 мл настойки прибавляют 8 мл воды и интенсивно встряхивают; должна образоваться обильная устойчивая пена (сапонины).

6. 10 мл препарата помещают в фарфоровую чашку и выпаривают на кипящей водяной бане до объема около 2 мл. К полученному остатку прибавляют 0,2 г магния порошка, постепенно приливают 0,5 мл кислоты хлористоводородной концентрированной, должно наблюдаться образование окрашивания коричнево-красного цвета (флавоноиды).

Сухой остаток. Не менее 2% (ОФС "Настойки").

Плотность. От 0,890 до 0,910 (ОФС "Плотность").

Тяжелые металлы. Не более 0,001% (ОФС "Настойки").

<*> Метанол и 2-пропанол. Не более 0,05% метанола и не более 0,05% 2-пропанола. В соответствии с требованиями ОФС "Определение метанола и 2-пропанола" (<*> контролируется в течение технологического процесса).

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в настойке должно быть не менее 0,05%.

Приготовление раствора стандартного образца (СО) рутина. Около 0,05 г (точная навеска) СО рутина, высушенного при температуре 100 - 105 °C в течение 1,5 ч, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 20 мл спирта 70%, доводят объем раствора спиртом 70% до метки, перемешивают (раствор А СО рутина). Срок годности раствора 30 сут.

0,5 мл раствора А СО рутина помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл прибавляют 3 мл алюминия хлорида раствора 3% в спирте 70% и 1 каплю уксусной кислоты раствора 3% (раствор Б СО рутина).

По 0,5 г (точная навеска) настойки помещают в две мерные колбы вместимостью 25 мл, в первую колбу прибавляют 3 мл алюминия хлорида раствора 3% в спирте 70%, 1 каплю уксусной кислоты раствора 3% (раствор А испытуемого раствора), а во вторую колбу - 1 каплю уксусной кислоты раствора 3%, доводят объем растворов в обеих колбах спиртом 70% до метки и перемешивают.

Через 40 мин измеряют оптическую плотность раствора А испытуемого раствора при длине волны 410 нм, в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор из второй колбы.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора Б СО рутина.

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в процентах (X) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность раствора А испытуемого раствора;

A₀ - оптическая плотность раствора Б СО рутина;

a₀ - навеска СО рутина, г;

a - навеска настойки, г;

P - содержание основного вещества в СО рутина, %.

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС "Настойки гомеопатические матричные".