"ФС.2.6.0028.18. Фармакопейная статья. Коффея арабика. Коффея (4). Настойка гомеопатическая матричная"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том IV")

Настоящая фармакопейная статья распространяется на Коффея арабика (Коффея) (4) - Coffea arabica (Coffea) (4) настойку гомеопатическую матричную, получаемую из высушенных, очищенных от оболочек, необжаренных семян кофейного дерева - Coffea arabica L., сем. мареновых - Rubiaceae и применяемую для производства/изготовления гомеопатических лекарственных средств.

Получение настойки гомеопатической матричной осуществляется по способу 4 ОФС "Настойки гомеопатические матричные".

Прозрачная жидкость желтого цвета, характерного запаха.

Калия йодида йодированный раствор подкисленный. 1,0 г йода и 10,0 г калия йодида растворяют в 98 мл воды, затем приливают 2 мл уксусной кислоты и перемешивают.

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля наносят 20 мкл настойки и 5 мкл раствора СО кофеина (см. Количественное определение") в виде точки. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе в течение 15 мин и помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение 40 мин смесью растворителей хлороформ - спирт 96% (90:10) и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат при температуре 100 °C в течение 10 мин, обрабатывают калия йодида йодированным раствором подкисленным, затем хлористоводородной кислотой разведенной 8,3%, сушат и просматривают при дневном свете.

На хроматограмме раствора СО кофеина должна обнаруживаться зона адсорбции коричневого или фиолетово-коричневого цвета.

На хроматограмме настойки должна обнаруживаться зона адсорбции коричневого или фиолетово-коричневого цвета на уровне зоны адсорбции на хроматограмме раствора СО кофеина; допускается обнаружение зоны коричневатого цвета, зоны желтого цвета на линии старта.

2. 1 мл настойки помещают в пробирку вместимостью 5 мл, прибавляют 0,1 мл железа(III) хлорид раствора 3%; должно наблюдаться появление черно-зеленого окрашивания. К смеси осторожно прибавляют по стенке пробирки 1 мл серной кислоты концентрированной; граница раздела фаз должна окраситься в темно-красный или коричневато-красный цвет, верхняя фаза - в коричневый цвет (гликозиды).

3. К 1 мл настойки прибавляют 1 мл аммиака раствора 10% и осторожно нагревают на водяной бане при температуре около 70 °C; должно постепенно появиться зеленое окрашивание (кофеин, пуриновые основания).

4. На фильтровальную бумагу наносят пипеткой 0,05 мл настойки, сушат; в УФ-свете при длине волны 365 нм должна наблюдаться флуоресценция голубого цвета (кофеин).

Сухой остаток. Не менее 1,5% (ОФС "Настойки").

Плотность. От 0,890 до 0,905 (ОФС "Плотность").

Тяжелые металлы. Не более 0,001% (ОФС "Настойки").

<*> Метанол и 2-пропанол. Не более 0,05% метанола и не более 0,05% 2-пропанола. В соответствии с требованиями ОФС "Определение метанола и 2-пропанола" (<*> контролируется в течение технологического процесса).

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Содержание кофеина в настойке должно быть не менее 0,06%.

Приготовление раствора стандартного образца (СО) кофеина. Около 0,015 г (точная навеска) СО кофеина, растворяют в мерной колбе вместимостью 100 мл в 50 мл спирта 96%, доводят объем раствора тем же спиртом до метки и перемешивают (раствор А СО кофеина). Срок годности раствора 30 сут.

2,0 мл раствора А СО кофеина, помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, объем раствора доводят спиртом 70% до метки и перемешивают (раствор Б СО кофеина).

Около 5,0 г (точная навеска) настойки помещают в делительную воронку вместимостью 100 мл, прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты разведенной 8,3%, 15 мл этилацетата и встряхивают в течение 10 мин. Отделяют нижнюю фазу в колбу. Экстракцию повторяют еще два раза с 10 мл и 5 мл хлористоводородной кислоты разведенной 8,3%. Объединенные кислотные извлечения помещают в делительную воронку, прибавляют 10 мл этилацетата и встряхивают в течение 10 мин. Этилацетатное извлечение отбрасывают. Кислотное извлечение помещают в делительную воронку вместимостью 200 мл, прибавляют 25 мл аммиака раствора, 25 мл хлороформа и встряхивают в течение 10 мин. Хлороформное извлечение отделяют в колбу. Экстракцию повторяют еще два раза по 20 мл хлороформа. Объединенные хлороформные извлечения промывают два раза по 50 мл воды, осторожной взбалтывая, затем отделяют и фильтруют через бумажный складчатый фильтр с 10 г натрия сульфата безводного в круглодонную колбу. Фильтр промывают 10 мл хлороформа, последний присоединяют к извлечению. Растворитель отгоняют под вакуумом с помощью роторного испарителя при нагревании на кипящей водяной бане досуха. Сухой остаток растворяют в 25 мл спирта 70% (раствор А испытуемого раствора).

2,0 мл раствора А испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят спиртом 70% объем раствора до метки и перемешивают (раствор Б испытуемого раствора).

Измеряют оптическую плотность раствора Б испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 273 нм, в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют спирт 70%.

Параллельно аналогичным образом измеряют оптическую плотность раствора Б СО кофеина.

Содержание кофеина в процентах (X) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность раствора Б испытуемого раствора;

A₀ - оптическая плотность поглощения раствора Б СО кофеина;

a - навеска испытуемой настойки, г;

a₀ - навеска СО кофеина г;

P - содержание основного вещества в СО кофеина, %.

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС "Настойки гомеопатические матричные".