"ФС.2.5.0073.18. Фармакопейная статья. Ели обыкновенной шишки"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том IV")

Собранные летом до созревания семян и высушенные шишки дикорастущего и культивируемого растения ели обыкновенной - Picea abies (L.) Karst., сем. сосновых Pinaceae.

Внешние признаки. Цельное сырье. Шишки овально-цилиндрические или продолговато-эллиптические, длиной 3 - 14 см, шириной 1,5 - 5 см; чешуя двух типов: наружная - кроющая и внутренняя - семенная. Обе чешуи срастаются друг с другом. Шишки образованы спирально расположенными кроющими чешуями, в пазухах которых имеются более крупные семенные чешуи. Кроющие чешуи ланцетовидные, пленчатые, с вытянутой бахромчатой по краю верхушкой, красновато-коричневого цвета. Семенные чешуи у молодых шишек удлиненно-овальные, зеленовато-коричневые. У более зрелых шишек семенные чешуи значительно крупнее - длиной 2,5 - 2,7 см, шириной 1,4 - 1,5 см, широко ромбические, на верхушке усеченные, неравно-зубчатые, у основания клиновидно-суженные; их поверхность зеленовато- или светло-коричневая, в верхней части блестящая, у основания более темная, матовая. У основания каждой семенной чешуи лежат два семени, прикрытые пленчатым крылом. Семена яйцевидные, коричневые, длиной до 5 мм, шириной до 3 мм; свободный конец крыла длиной до 11 мм, шириной до 6 мм. Между семенными чешуями часто заметны смолистые выделения.

Запах характерный. Вкус водного извлечения вяжущий, горьковато-пряный.

Измельченное сырье. Смесь кусочков сырья различной формы, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 10 мм. При рассмотрении должны быть видны кусочки семенной чешуи коричневого, светло-коричневого, зеленовато-коричневого цвета. Кроющие чешуи, измельченные или целые красновато-коричневого цвета. Семена яйцевидные, коричневые, длиной до 5 мм, шириной до 3 мм. Должны быть видны частички крыла семени разного размера и формы. Запах ароматный. Вкус водного извлечения вяжущий, горьковато-пряный.

Микроскопические признаки. Цельное сырье. При рассмотрении микропрепаратов поперечного среза семенной чешуи в средней части должны быть видны клетки эпидермиса с обеих сторон, овальные, толстостенные, покрытые толстым слоем кутикулы.

На поверхности чешуи, особенно на внутренней стороне, часто встречаются простые одноклеточные, реже двухклеточные волоски сосочковидной или конической формы. На внешней стороне волоски меньшего размера и расположены реже. Под эпидермисом с обеих сторон расположены 1 - 4 слоя механических клеток с сильно утолщенными и более или менее (в зависимости от стадии развития шишки) одревесневшими оболочками, пронизанными тонкими порами. На срезе верхней части семенной чешуи с внешней стороны должны быть видны клетки эпидермиса с толстым слоем кутикулы, под эпидермисом расположен слой колленхимы. С внутренней стороны находятся клетки эпидермиса с тонким слоем кутикулы, а под эпидермисом расположен слой склеренхимы. На срезе центральной и нижней части чешуи с обеих сторон под эпидермисом находится слой склеренхимы.

1 - поперечный срез семенной чешуи (160x): а - двухклеточные волоски; б - клетки склеренхимы; в - смоляные ходы; г - паренхимные клетки; д - клетки эпидермиса; 2 - смоляной ход (460x); 3 - эпидермис внутренней поверхности (640x); 4 - волоски кроющей чешуи (640x); 5 - волоски кроющей чешуи (640x); 6 - устьица кроющей чешуи (640x); 7 - клетки крыла семени (160x).

Клетки склеренхимы с сильно утолщенными и полуодревесневшими оболочками. Количество слоев склеренхимы от верхушки к основанию семенной чешуи увеличивается. В срединной части мезофилла расположены тонкостенные паренхиматозные клетки. У молодых шишек паренхимные клетки зеленые, хлорофиллоносные, у более зрелых - коричневого, светло-коричневого цвета, часто смятые и сдавленные. В срединной части мезофилла расположены смоляные ходы и коллатеральные проводящие пучки (8 - 12 шт). Проводящие пучки сдавленные, мелкие в верхней части и более крупные у основания чешуи. Диаметр смоляных ходов увеличивается от верхушки к основанию чешуи.

Кутикула, содержимое смоляных ходов, а также маслянистые включения, в виде мелких капель в клетках эпидермиса и мезофилла окрашиваются раствором судана III в оранжевый цвет.

В микропрепарате кроющей чешуи с поверхности должны быть видны: вытянутые клетки эпидермиса с четковидно-утолщенными оболочками. На верхушке чешуи и по краю - многоклеточные и реже одноклеточные простые волоски. В верхней части кроющей чешуи и вдоль центральной жилки должны быть видны мелкие устьица. На внешней поверхности кроющей чешуи одноклеточные, реже двухклеточные волоски продолговатой и конической формы. Волоски расположены на внешней поверхности вдоль центральной жилки ближе к основанию чешуи. У основания чешуи расположены 2, реже 3 смоляных хода, которые достигают половины длины чешуи.

В кожуре семени с поверхности должны быть видны толстостенные каменистые клетки с темно-коричневым содержимым. Клетки крыла семени вытянутые с четковидно-утолщенными оболочками.

Измельченное сырье. При рассмотрении поперечного среза частичек семенной чешуи должны быть видны клетки эпидермиса с обеих сторон, овальные, толстостенные, покрытые толстым слоем кутикулы.

На поверхности семенной чешуи расположены простые одноклеточные, реже двухклеточные волоски сосочковидной или конической формы. На внешней стороне волоски меньшего размера и расположены реже. Под эпидермисом с обеих сторон расположены 1 - 4 слоя механических клеток с сильно утолщенными и более или менее (в зависимости от стадии развития шишки) одревесневшими оболочками, пронизанными тонкими порам. С внутренней стороны клетки эпидермиса с тонким слоем кутикулы, а под эпидермисом расположен слой склеренхимы. Клетки склеренхимы с сильно утолщенными и полуодревесневшими оболочками. В срединной части мезофилла расположены тонкостенные паренхиматозные клетки. Паренхиматозные клетки хлорофилловые, зеленые, у молодых шишек, и отмирающие коричневого, светло-коричневого цвета часто смятые и сдавленные, у более зрелых. В срединной части мезофилла расположены смоляные ходы и проводящие пучки.

Кутикула, содержимое смоляных ходов, а также маслянистые включения, в виде мелких капель в клетках эпидермиса и мезофилла.

В препарате кроющей чешуи с поверхности должны быть видны: вытянутые клетки эпидермиса с четковидно-утолщенными оболочками. На верхушке чешуи и по краю - многоклеточные и реже одноклеточные простые волоски. В верхней части кроющей чешуи и вдоль центральной жилки должны быть видны мелкие устьица. На внешней поверхности кроющей чешуи видны одноклеточные, реже двухклеточные волоски продолговатой и конической формы. Волоски расположены на внешней поверхности вдоль центральной жилки ближе к основанию чешуи. У основания чешуи расположены 2, реже 3 смоляных хода, которые достигают половины длины чешуи. В кожуре семени с поверхности должны быть видны толстостенные каменистые клетки с темно-коричневым содержимым. Клетки крыла семени вытянутые с четковидно-утолщенными оболочками.

Желатина раствора 1%. К 1,0 г желатина прибавляют 50 мл воды и оставляют на 1 час при частом встряхивании, затем воду сливают, а к желатину добавляют новую порцию 60 мл воды и растворяют, встряхивая и нагревая при температуре не выше 50 - 60 °C. К полученному раствору желатина прибавляют 10,0 г натрия хлорида, перемешивают и после охлаждения раствор фильтруют в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Раствор используют свежеприготовленным.

Ели обыкновенной шишек отвар. Сырье, измельченное до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 10 мм, заливают водой комнатной температуры в соотношении 1:10 и настаивают в плотно закрытом инфундирном аппарате или в соответствующей емкости на кипящей водяной бане при частом перемешивании в течение 30 мин. Процеживают без предварительного охлаждения и упаривают наполовину. Отвар используют свежеприготовленным.

Ели обыкновенной шишек отвар (испытуемый раствор).

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля с флуоресцентным индикатором наносят в виде полосы 50 мкл (0,05 мл) испытуемого раствора. Пластинку с нанесенной пробой сушат на воздухе в течение 5 мин и помещают в хроматографическую камеру с уксусной кислотой 15% и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат в вытяжном шкафу при комнатной температуре в течение 15 мин, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100 - 105 °C в течение 10 мин, затем просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции сине-голубого цвета.

Затем хроматографическую пластинку обрабатывают алюминия хлорида раствором спиртовым 5% и выдерживают при температуре 100 - 105 °C в течение 1 - 3 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться зоны адсорбции (по возрастанию): сине-фиолетового цвета, с флуоресценцией темно-желтого цвета, с флуоресценцией желтого цвета и зона темного цвета.

1. На предметное стекло наносят 1 каплю отвара ели обыкновенной шишек, добавляют 1 каплю железа (III) аммония сульфата раствора 1%, должно наблюдаться постепенное образование черно-зеленого окрашивания (дубильные вещества).

2. На предметное стекло наносят 1 каплю отвара ели обыкновенной шишек, добавляют 1 каплю желатина раствора; должно наблюдаться образование белого осадка (дубильные вещества).

Влажность. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 13%.

Зола общая. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 8%.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 1%.

Измельченность сырья. Измельченное сырье. Частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 10 мм, не более 5%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, не более 5%.

Шишек, у которых половина или более семян высыпались. Цельное сырье - не более 20%.

Других частей ели (хвоя, мелкие веточки и др.). Цельное сырье, измельченное сырье - не более 5%.

Органической примеси. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 1%.

Минеральной примеси. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 0,5%.

Тяжелые металлы и мышьяк. В соответствии с требованиями ОФС "Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах".

Радионуклиды. В соответствии с требованиями ОФС "Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах".

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с требованиями ОФС "Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах".

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Цельное сырье, измельченное сырье. Эфирного масла - не менее 0,2%; экстрактивных веществ, извлекаемых водой - не менее 5%; дубильных веществ - не менее 6%.

Определение содержания эфирного масла проводят в соответствии с требованиями ОФС "Определение содержания эфирного масла в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах" (метод 1, из 20,0 г сырья, измельченного до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 5 мм, время перегонки 1,5 ч).

Определение дубильных веществ проводят в соответствии с требованиями ОФС "Определение содержания дубильных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах" (метод 1, из навески 1,0 г сырья измельченного до размера частиц 3 мм).

Определение экстрактивных веществ проводят в соответствии с требованиями ОФС "Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье" (метод 2, экстрагент - вода, из навески 10,0 г сырья, измельченного до размера частиц 1 мм).

Упаковка, маркировка и транспортирование. В соответствии с требованиями ОФС "Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов".

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС "Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов".