"ФС.3.4.0006.18. Фармакопейная статья. Полыни горькой травы настойка"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том IV")

Настоящая фармакопейная статья распространяется на Полыни горькой травы настойку, получаемую из высушенной травы дикорастущего многолетнего травянистого растения полыни горькой Artemisia absinthium L., сем. астровых - Asteraceae, применяемую в качестве лекарственного средства.

Для получения настойки используют:

Описание. Прозрачная жидкость коричневато-зеленого цвета, с характерным запахом.

Раствор стандартного образца (СО) рутина. Около 0,001 г СО рутина (рутина тригидрата) растворяют при нагревании на водяной бане в 10 мл спирта 96% и перемешивают. Срок годности раствора не более 3 мес при хранении в прохладном, защищенном от света месте.

Раствор стандартного образца (СО) хлорогеновой кислоты. Около 0,001 г СО хлорогеновой кислоты растворяют в 10 мл спирта 96% и перемешивают. Срок годности раствора не более 3 мес при хранении в прохладном, защищенном от света месте.

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля наносят в виде полос длиной 10 мм и шириной 2 мм 20 мкл (0,02 мл) препарата и параллельно в одну полосу по 10 мкл (0,01 мл) растворов СО рутина и хлорогеновой кислоты. Пластинку с нанесенными пробами сушат в течение 5 мин, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 30 мин смесью растворителей этилацетат - муравьиная кислота безводная - вода (40:4:6), и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, выдерживают при температуре 100 - 105 °C в течение 2 - 3 мин и еще теплую обрабатывают последовательно дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствором 1% в спирте 96% и макрогола 400 раствором спиртовым 5% и просматривают через 30 мин в УФ-свете (365 нм).

На хроматограмме растворов СО рутина и СО хлорогеновой кислоты должны обнаруживаться: зона адсорбции с флуоресценцией желтого, желто-оранжевого или оранжевого цвета (рутин) и зона адсорбции с флуоресценцией голубого цвета (хлорогеновая кислота).

На хроматограмме препарата должны обнаруживаться: зона адсорбции с флуоресценцией желтого, желто-зеленого, желто-оранжевого или оранжевого цвета на уровне зоны адсорбции СО рутина; две зоны адсорбции с флуоресценцией голубого цвета на уровне зоны адсорбции СО хлорогеновой кислоты и выше нее; допускается обнаружение дополнительных зон адсорбции.

1. 10 мл препарата помещают в фарфоровую чашку, упаривают на водяной бане до объема около 1 мл, прибавляют 0,2 мл аммиака раствора 10%, 0,1 г смеси кальция и талька (1:1), перемешивают до получения порошкообразной массы, которую обрабатывают 10 мл эфира. Эфирные извлечения помещают в фарфоровую чашку, эфир отгоняют досуха. К сухому остатку прибавляют 0,5 мл серной кислоты концентрированной; должно наблюдаться красновато-коричневое окрашивание, переходящее в фиолетовое при прибавлении спирта 96% (гликозиды).

2. 10 мл препарата помещают в делительную воронку, прибавляют 10 мл воды, тщательно перемешивают и взбалтывают с эфиром 2 раза порциями по 10 мл в течение 3 мин. После разделения слоев эфирное извлечение сливают. Первое эфирное извлечение отбрасывают, второе эфирное извлечение осторожно упаривают на водяной бане досуха. Сухой остаток растворяют в 2 мл спирта 96%, осторожно прибавляют 2 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и нагревают на водяной бане; должно наблюдаться зеленое окрашивание, постепенно переходящее в коричневое (сесквитерпеновые лактоны азуленового ряда).

3. К остатку в делительной воронке (после обработки эфиром) прибавляют 5 мл бутанола, предварительно насыщенного водой (7:3), и взбалтывают в течение 3 мин. После разделения слоев бутанольное извлечение сливают и упаривают на водяной бане до полного удаления растворителя. Остаток бутанольного извлечения растворяют в 5 мл спирта 96%, прибавляют 0,2 г магния порошка и постепенно, осторожно приливают 1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной; через 20 - 30 мин должно наблюдаться красновато-коричневое окрашивание (флавоноиды).

Спирт этиловый. Не менее 64%. В соответствии с ОФС "Определение спирта этилового в лекарственных средствах".

<*> Метанол и 2-пропанол. Не более 0,05% метанола и не более 0,05% 2-пропанола. В соответствии с требованиями ОФС "Определение метанола и 2-пропанола".

--------------------------------

<*> Контролируется в течение технологического процесса.

Сухой остаток. Не менее 3,0%. В соответствии с ОФС "Настойки".

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. В соответствии с требованиями ОФС "Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах".

Объем содержимого упаковки. В соответствии с требованиями ОФС "Настойки".

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в препарате должно быть не менее 0,05%.

Раствор стандартного образца (СО) рутина. Около 0,05 г (точная навеска) СО рутина помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и растворяют при нагревании на водяной бане в 85 мл спирта 96%, охлаждают, доводят объем раствора тем же спиртом до метки и перемешивают (раствор А СО рутина). Срок годности раствора не более 1 мес при хранении в прохладном, защищенном от света месте.

1,0 мл раствора А СО рутина, 5 мл алюминия хлорида спиртового раствора 2% и 0,1 мл уксусной кислоты ледяной, помещенных в мерную колбу вместимостью 25 мл, доведенных спиртом 96% до метки (раствор Б СО рутина). Срок годности раствора не более 1 мес при хранении в прохладном, защищенном от света месте.

2,0 мл препарата помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят спиртом 70% до метки и перемешивают (испытуемый раствор А).

5,0 мл испытуемого раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 5 мл алюминия хлорида раствора 2% в спирте 96%, 0,1 мл уксусной кислоты разведенной 30%, доводят объем раствора спиртом 96% до метки и перемешивают (раствор Б испытуемого раствора).

Через 30 мин измеряют оптическую плотность испытуемого раствора Б на спектрофотометре при длине волны 410 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор, состоящий из 5 мл испытуемого раствора А, 0,1 мл уксусной кислоты разведенной 30%, доведенный спиртом 96% до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора Б СО рутина в таких же условиях. В качестве раствора сравнения используют раствор, состоящий из 1,0 мл раствора А СО рутина, 0,1 мл уксусной кислоты разведенной 30%, доведенный спиртом 96% до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл.

Содержание суммы флавоноидов в препарате в пересчете на рутин в процентах (X) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность раствора Б испытуемого раствора;

A₀ - оптическая плотность раствора Б СО рутина;

a - объем настойки, мл;

a₀ - навеска СО рутина, г;

P - содержание основного вещества в СО рутина, %.

Допускается содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин вычислять с использованием удельного показателя поглощения комплекса рутина с алюминия хлоридом по формуле:

где A - оптическая плотность раствора Б испытуемого раствора;

a - объем настойки, мл;

- удельный показатель поглощения комплекса рутина с алюминия хлоридом при длине волны 410 нм, равный 260.

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС "Настойки".