"ФС.3.4.0015.22. Фармакопейная статья. Алоэ древовидного листьев сок + Календулы лекарственной цветков экстракт жидкий + Левоментол + Ромашки аптечной цветков экстракт жидкий + Эвкалипта листьев масло эфирное, линимент"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 11.04.2022 N 246)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание")

Настоящая фармакопейная статья распространяется на лекарственный препарат Алоэ древовидного листьев сок + Календулы лекарственной цветков экстракт жидкий + Левоментол + Ромашки аптечной цветков экстракт жидкий + Эвкалипта листьев масло эфирное, линимент. Препарат должен соответствовать требованиям ОФС "Мази" и ниже приведенным требованиям.

Содержит не менее 0,07% суммы флавоноидов в пересчете на рутин; не менее 0,10% суммы дубильных веществ в пересчете на танин.

Описание. Однородная густая масса светло-коричневого цвета с характерным запахом.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота безводная - вода - этилацетат (10:10:80).

Испытуемый раствор. 25 мл раствора А, полученного для количественного определения, выпаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 1 мл спирта 50%.

Раствор сравнения. Около 1 мг стандартного образца (СО) кофейной кислоты, 1 мг СО хлорогеновой кислоты и 2,5 мг СО рутина растворяют в 10,0 мл спирта 96% и перемешивают.

Срок годности раствора 1 мес при хранении в прохладном, защищенном от света месте.

Реактив для детектирования 1. Дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствор 1% в спирте 96%.

Реактив для детектирования 2. Макрогола 400 раствор спиртовой 5%.

На линию старта хроматографической пластинки в виде полос длиной 10 мм и шириной не более 2 мм наносят 80 мкл испытуемого раствора и 10 мкл раствора сравнения. Пластинку с нанесенными пробами сушат до удаления следов растворителей, затем помещают в хроматографическую камеру, предварительно насыщенную в течение 1 ч ПФ, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры и сушат до удаления следов растворителей. Хроматограмму обрабатывают реактивом для детектирования 1, затем реактивом для детектирования 2, выдерживают при температуре 100 - 105 °C в течение 10 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

На хроматограмме раствора сравнения должны обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией желтого или коричневато-желтого цвета (СО рутин), две зоны адсорбции с флуоресценцией голубого цвета выше зоны СО рутина (по возрастанию: хлорогеновая кислота, кофейная кислота).

На хроматограмме испытуемого препарата должны обнаруживаться: зона адсорбции с флуоресценцией желтого или коричневато-желтого цвета на уровне зоны адсорбции СО рутина, две зоны адсорбции с флуоресценцией голубого цвета на уровне зон адсорбции СО хлорогеновой кислоты и СО кофейной кислоты; допускается обнаружение других зон адсорбции.

1. Качественная реакция. 5 г препарата помещают в колбу, прибавляют 30 мл воды, 10 мл хлористоводородной кислоты разведенной 10%, перемешивают и нагревают на водяной бане в течение 2 ч. После охлаждения смесь переносят в делительную воронку вместимостью 100 мл и экстрагируют хлороформом трижды порциями по 20 мл, каждый раз перемешивая в течение 1 - 2 мин. После разделения фаз хлороформные извлечения сливают в одну колбу. Объединенные хлороформные извлечения фильтруют через бумажный фильтр.

10 мл хлороформного извлечения помещают в пробирку и осторожно по стенке приливают 5 мл 0,5 М раствора натрия гидроксида; на границе слоев должно появиться оранжево-красное окрашивание (антраценпроизводные соединения).

2. Качественная реакция. 30 г препарата помещают в делительную воронку вместимостью 100 мл и экстрагируют трижды порциями по 20, 10 и 10 мл. Объединенные эфирные извлечения фильтруют через бумажный фильтр в колбу вместимостью 100 мл и упаривают на водяной бане под вакуумом при температуре не выше 30 °C до полного удаления растворителя. К остатку прибавляют 5 мл спирта 95%, встряхивая в течение 5 мин, спиртовое извлечение декантируют и фильтруют через бумажный фильтр.

2 мл спиртового извлечения помещают в колбу вместимостью 25 мл, приливают 1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и 1 мл уксусной кислоты ледяной, встряхивают и нагревают до кипения; должно появиться окрашивание: верхнего слоя в зеленый цвет, нижнего - в коричневый с зеленоватым оттенком (сесквитерпеновые лактоны азуленового ряда).

3. Качественная реакция. К 5 г препарата прибавляют 20 мл спирта 90%, встряхивают в течение 2 мин, дают отстояться в течение 10 мин, затем фильтруют через бумажный фильтр.

5 мл спиртового извлечения помещают в пробирку и осторожно по стенке приливают 2 мл ванилина раствора 1% в серной кислоте; на границе слоев должно появиться красновато-коричневое кольцо (тритерпеноиды).

4. Качественная реакция. К 5 мл спиртового извлечения, полученного в качественной реакции 3, прибавляют 0,5 мл железа(III) хлорида раствора 3%; должно появиться зеленовато-коричневое окрашивание (дубильные вещества).

Масса содержимого упаковки. В соответствии с требованиями ОФС "Масса (объем) содержимого упаковки".

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".

Сумма флавоноидов. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС "Спектрофотометрия в УФ и видимой областях".

Испытуемый раствор. Около 5,0 г (точная навеска) препарата помещают в колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 10 мл воды, перемешивают и переносят в делительную воронку вместимостью 100 мл. Колбу ополаскивают 5 мл воды, которую переносят в ту же делительную воронку. Смесь экстрагируют хлороформом 4 раза порциями по 20 мл, каждый раз перемешивая по 1 - 2 мин. Хлороформные извлечения отбрасывают. Обезжиренную водную фазу переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл. Делительную воронку ополаскивают 10 мл спирта 70%, который присоединяют к основной фазе в мерной колбе, и перемешивают. Полученный раствор нагревают на водяной бане при температуре 80 °C в течение 15 мин, охлаждают до комнатной температуры, доводят объем раствора спиртом 95% до метки, перемешивают и фильтруют через вату (раствор А).

5 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 2 мл алюминия хлорида раствора 2% в спирте 70%, 0,5 мл уксусной кислоты разведенной 30%, доводят объем раствора спиртом 70% до метки и перемешивают (раствор Б).

Раствор стандартного образца (СО) рутина. Около 0,05 г (точная навеска) СО рутина помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 50 мл спирта 70%, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают.

Стандартный раствор. 1 мл раствора СО рутина помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 2 мл алюминия хлорида раствора 2% в 70% спирте, 0,5 мл уксусной кислоты разведенной 30%, доводят объем раствора спиртом 70% до метки и перемешивают.

Раствор сравнения 1. 5 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 0,5 мл уксусной кислоты разведенной 30%, доводят объем раствора спиртом 70% до метки и перемешивают.

Раствор сравнения 2. 1 мл раствора СО рутина помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 0,5 мл уксусной кислоты разведенной 30%, доводят объем раствора спиртом 70% до метки и перемешивают.

Оптическую плотность раствора Б измеряют через 30 мин на спектрофотометре при длине волны 410 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения 1.

Параллельно при аналогичных условиях измеряют оптическую плотность стандартного раствора относительно раствора сравнения 2.

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в процентах (X) вычисляют по формуле:

где: A - оптическая плотность раствора Б;

A_o - оптическая плотность стандартного раствора;

a_o - навеска СО рутина, г;

a - навеска препарата, г.

Определение суммы дубильных веществ в пересчете на танин. Около 5 г (точная навеска) препарата помещают в колбу вместимостью 100 мл с притертой пробкой, экстрагируют ацетоном трижды порциями по 50, 30 и 20 мл каждый раз интенсивно встряхивая в течение 2 мин с последующим растиранием осадка стеклянной палочкой. После отстаивания в течение 2 мин ацетоновые извлечения декантируют в колбу вместимостью 250 мл. К полученным извлечениям прибавляют 5 мл индигокармина раствора 0,25% и сразу же титруют 0,1 М раствором калия перманганата со скоростью 0,5 - 0,6 мл/мин при энергичном встряхивании до желтого окрашивания, неисчезающего в течение 30 с.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Содержание дубильных веществ в пересчете на танин в процентах (X) вычисляют по формуле:

где: V - объем титранта, израсходованный на титрование испытуемого раствора, мл;

V₀ - объем титранта, израсходованный на титрование раствора в контрольном опыте, мл;

a - навеска препарата, г;

T - титр 1 мл 0,1 М раствора калия перманганата, соответствует 0,004157 г танина;

K - поправка к титру 0,1 М раствора калия перманганата, г.

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС "Хранение лекарственных средств".