"ФС.3.1.0005.18. Фармакопейная статья. Амоксициллин, таблетки"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)

Настоящая фармакопейная статья распространяется на лекарственный препарат амоксициллин, таблетки. Препарат должен соответствовать требованиям ОФС "Таблетки" и нижеприведенным требованиям.

Содержит не менее 90,0% и не более 110,0% от заявленного количества амоксициллина C₁₆H₁₉N₃O₅S.

Описание. Содержание раздела приводится в соответствии с ОФС "Таблетки".

1. Тонкослойная хроматография (ОФС "Тонкослойная хроматография").

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля силанизированного на стеклянной подложке.

Подвижная фаза (ПФ). Пиридин-вода-хлороформ-метанол 1:3:8:9.

Испытуемый раствор. Навеску порошка растертых таблеток, эквивалентную около 20 мг амоксициллина тригидрата, встряхивают с 5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и фильтруют.

Раствор стандартного образца амоксициллина. Растворяют 20 мг стандартного образца амоксициллина тригидрата в 5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют около 20 мг стандартного образца амоксициллина тригидрата и около 20 мг стандартного образца ампициллина тригидрата в 5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М.

На линию старта пластинки наносят по 1 мкл испытуемого раствора (4 мкг), раствора стандартного образца амоксициллина (4 мкг) и раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе до удаления следов растворителей и опрыскивают нингидрина раствором 0,2%, нагревают при температуре 130 °C в течение 10 мин и просматривают при дневном свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны наблюдаться две четко разделенных зоны адсорбции.

Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, интенсивности окраски и величине должна соответствовать зоне адсорбции амоксициллина на хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика амоксициллина на хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина (раздел "Количественное определение").

Растворение. Определение проводят в соответствии с ОФС "Растворение для твердых дозированных лекарственных форм" методом спектрофотометрии (ОФС "Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях").

Испытуемый раствор. В каждый сосуд для растворения с предварительно нагретой средой растворения помещают одну таблетку. Через 30 мин отбирают пробу раствора и фильтруют, отбрасывая первые порции фильтрата. При необходимости полученный раствор разводят средой растворения до концентрации амоксициллина около 0,1 мг/мл.

Раствор стандартного образца амоксициллина. Около 23 мг (точная навеска) стандартного образца амоксициллина тригидрата помещают в мерную колбу вместимостью 20 мл, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора средой растворения до метки.

Раствор сравнения. Среда растворения.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора и раствора стандартного образца амоксициллина на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 272 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.

Количество амоксициллина, перешедшее в раствор, в процентах (X) вычисляют по формуле:

где A₁ - оптическая плотность испытуемого раствора;

A₀ - оптическая плотность раствора стандартного образца амоксициллина;

a₀ - навеска стандартного образца амоксициллина тригидрата, мг;

F - фактор дополнительного разведения испытуемого раствора;

P - содержание амоксициллина в стандартном образце амоксициллина тригидрата, %;

L - заявленное количество амоксициллина в одной таблетке, мг.

Через 30 мин в раствор должно перейти не менее 75% (Q) амоксициллина C₁₆H₄₉N₃O₅S.

Вода. Не более 14,5% (ОФС "Определение воды", метод 1).

Светопоглощающие примеси. Оптическая плотность испытуемого раствора не должна превышать 0,3. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС "Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях").

Испытуемый раствор. Точную навеску порошка растертых таблеток, эквивалентную около 0,25 г амоксициллина помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 20 мл воды, перемешивают, доводят объем раствора водой до метки и фильтруют.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 325 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.

Раствор сравнения. Вода.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Все растворы используют свежеприготовленными или хранят при температуре 4 °C не более суток.

Буферный раствор pH 5,0. В мерную колбу вместимостью 1 л помещают 250 мл калия дигидрофосфата раствора 0,2 М, доводят значение pH до 5,00 +/- 0,05 натрия гидроксида раствором 2 М и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил-Буферный раствор pH 5,0 1:99.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил-Буферный раствор pH 5,0 20:80.

Испытуемый раствор. Навеску порошка растертых таблеток, эквивалентную около 0,15 г амоксициллина, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 80 мл ПФА и перемешивают в течение 15 мин. Смесь выдерживают на ультразвуковой бане в течение 1 мин, охлаждают до комнатной температуры, доводят объем раствора ПФА до метки и фильтруют.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Около 4 мг стандартного образца цефадроксила и около 30 мг стандартного образца амоксициллина тригидрата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в ПФА и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Примечание.

Цефадроксил: (6R,7R)-7-[(2R)-2-амино-2-(4-гидроксифенил) ацетамидо]-3-метил-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота, CAS 66592-87-8.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R) между пиками амоксициллина и цефадроксила должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

- относительное стандартное отклонение площади пика амоксициллина должно быть не более 2% (6 определений);

- фактор асимметрии пика (A_s) амоксициллина должен быть не более 2,0;

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику амоксициллина, должна составлять не менее 1500 теоретических тарелок.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1%);

- площадь пика только одной примеси может превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения, но не более чем в 1,5 раза (не более 1,5%);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать пятикратной площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 5%).

Однородность дозирования. Определение проводят в соответствии с ОФС "Однородность дозирования" (способ 1 или способ 2). При использовании способа 1 определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания "Количественное определение".

Испытуемый раствор. Одну таблетку помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 200 мл ПФА и перемешивают в течение 15 мин. Смесь выдерживают на ультразвуковой бане до полного распада таблетки, после охлаждения до комнатной температуры доводят объем раствора ПФА до метки и фильтруют. При необходимости полученный раствор разводят ПФА до концентрации амоксициллина около 0,6 мг/мл.

Содержание амоксициллина C₁₆H₁₉N₃O₅S в одной таблетке в процентах (X) от заявленного количества вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь основного пика на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина;

a₀ - навеска стандартного образца амоксициллина тригидрата, мг;

P - содержание амоксициллина в стандартном образце амоксициллина тригидрата, %;

F - фактор дополнительного разведения испытуемого раствора;

L - заявленное количество амоксициллина в одной таблетке, мг.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания "Родственные примеси".

Подвижная фаза (ПФ). ПФА-ПФБ 92:8.

Испытуемый раствор. Точную навеску порошка растертых таблеток, эквивалентную около 30 мг амоксициллина, помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 40 мл ПФА и перемешивают в течение 15 мин. Смесь выдерживают на ультразвуковой бане в течение 1 мин, после охлаждения до комнатной температуры доводят объем раствора ПФА до метки и фильтруют.

Раствор стандартного образца амоксициллина. Около 35 мг (точная навеска) стандартного образца амоксициллина тригидрата помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в ПФА и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца амоксициллина и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина:

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику амоксициллина, должна быть не менее 2000 теоретических тарелок;

- фактор асимметрии пика (A_s) амоксициллина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика амоксициллина должно быть не более 2% (6 определений).

Содержание амоксициллина C₁₆H₁₉N₃O₅S в процентах от заявленного количества (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика амоксициллина на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика амоксициллина на хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина;

a₁ - навеска порошка растертых таблеток, мг;

a₀ - навеска стандартного образца амоксициллина тригидрата, мг;

P - содержание амоксициллина в стандартном образце амоксициллина тригидрата, %;

G - средняя масса одной таблетки, мг;

L - заявленное количество амоксициллина в одной таблетке, мг.

Хранение. В защищенном от света месте.