"ФС.2.1.0070.18. Фармакопейная статья. Бетаметазона натрия фосфат"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)

Содержит не менее 96,0% и не более 103,0% бетаметазона натрия фосфата C₂₂H₂₈FNa₂O₈P в пересчете на безводное и не содержащее остаточных органических растворителей вещество.

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

<*> Очень гигроскопичен.

--------------------------------

<*> Приводится для информации.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96%, практически нерастворим в метиленхлориде.

1. ИК-спектрометрия. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца бетаметазона натрия фосфата.

Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец бетаметазона натрия фосфата растворяют в спирте 96%, выпаривают на водяной бане досуха и регистрируют спектры сухих остатков.

2. Тонкослойная хроматография (ОФС "Тонкослойная хроматография").

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля 60 F₂₅₄.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная - вода - бутанол 20:20:60.

Испытуемый раствор. 10 мг субстанции растворяют в 10,0 мл метанола.

Раствор сравнения. 10 мг стандартного образца бетаметазона натрия фосфата растворяют в 10,0 мл метанола.

Контрольный раствор. 5 мг стандартного образца бетаметазон натрия фосфата и 5 мг стандартного образца преднизолона натрия фосфата растворяют в 10,0 мл метанола.

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора, раствора сравнения и контрольного раствора. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт подвижной фазы пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в ультрафиолетовом свете при 254 нм.

На хроматограмме испытуемого раствора должна наблюдаться зона адсорбции, по положению, интенсивности поглощения и величине соответствующая зоне адсорбции на хроматограмме раствора сравнения. Результаты испытания считаются достоверными, если на хроматограмме контрольного раствора наблюдаются две зоны адсорбции, которые могут быть не полностью разделены.

3. Качественная реакция. К 2 мг субстанции прибавляют 2 мл серной кислоты концентрированной и перемешивают. В течение 5 мин должно появиться интенсивное красно-коричневое окрашивание. Раствор осторожно выливают при перемешивании в 10 мл воды. Окрашивание должно исчезнуть и должен остаться прозрачный раствор.

4. Качественные реакции. К 40 мг субстанции прибавляют 2 мл серной кислоты концентрированной и осторожно нагревают до появления белого дыма. По каплям прибавляют азотную кислоту и продолжают нагревание до тех пор, пока раствор не станет почти прозрачным, и охлаждают. Прибавляют 2 мл воды, нагревают до повторного появления белого дыма и охлаждают. Прибавляют 10 мл воды и нейтрализуют раствор по красной лакмусовой бумаге разбавленным раствором аммиака. Полученный раствор дает характерные реакции на натрий и фосфаты.

<**> Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС "Прозрачность и степень мутности жидкостей").

<**> Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании "Прозрачность раствора", не должна превышать эталон сравнения B₇ (ОФС "Степень окраски жидкостей").

pH. От 7,5 до 9,0 (1% раствор, ОФС "Ионометрия", метод 3).

Удельное вращение. От +98 до +104 в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (1% раствор субстанции, ОФС "Поляриметрия").

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Подвижная фаза (ПФ). Смешивают 1,36 г калия дигидрофосфата и 0,60 г гексиламина, выдерживают в течение 10 мин, растворяют в 185 мл воды и смешивают с 65 мл ацетонитрила.

Испытуемый раствор. 60 мг субстанции растворяют в 25,0 мл ПФ.

Раствор сравнения. 1,0 мл испытуемого раствора доводят ПФ до 100,0 мл.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. 2 мг стандартного образца бетаметазона натрия фосфата и 2 мг стандартного образца дексаметазона натрия фосфата растворяют в 25 мл ПФ.

Колонку промывают ПФ не менее 45 мин.

Относительные времена удерживания соединений: бетаметазона фосфат - 1,0 (около 14 мин), дексаметазона фосфат - около 1,1.

Пригодность хроматографической системы: На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (R) между пиками бетаметазона фосфата и дексаметазона фосфата должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика бетаметазона фосфата на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0%), при этом площадь пика только одной примеси может превышать площадь пика бетаметазона фосфата на хроматограмме раствора сравнения (более 1,0%);

- сумма площадей всех пиков примесей не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика бетаметазона фосфата на хроматограмме раствора сравнения (не более 3,0%).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,05 площади пика бетаметазона фосфата на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05%).

Неорганические фосфаты. Не более 1%. 50 мг субстанции растворяют в воде и доводят объем водой до 100,0 мл. К 10 мл полученного раствора прибавляют 5 мл молибденованадиевого реактива, перемешивают и выдерживают 5 мин. Появляющееся желтое окрашивание не должно превышать окрашивание стандартного раствора, приготовленного таким же образом с использованием 10 мл стандартного раствора фосфата 0,0005%.

Вода. Не более 8,0% (ОФС "Определение воды"). Для определения используют около 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС "Остаточные органические растворители".

<**> Бактериальные эндотоксины. Не более 17,5 ЕЭ на 1 мг активного вещества субстанции (ОФС "Бактериальные эндотоксины").

--------------------------------

<**> Контроль по показателям качества "Прозрачность раствора", "Цветность раствора" и "Бактериальные эндотоксины" проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Испытание проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания "Родственные примеси".

Испытуемый раствор. Около 60 мг (точная навеска) субстанции растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до 50,0 мл. 4,0 мл полученного раствора доводят ПФ до 20,0 мл.

Стандартный раствор. Около 60 мг (точная навеска) стандартного образца бетаметазона натрия фосфата растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до 50,0 мл. 4,0 мл полученного раствора доводят ПФ до 20,0 мл.

Хроматографируют испытуемый и стандартный растворы.

Пригодность хроматографической системы: на хроматограмме стандартного раствора относительное стандартное отклонение площади пика бетаметазона фосфата должно быть не более 1,0% (6 определений).

Содержание бетаметазона натрия фосфата C₂₂H₂₈FNa₂O₈P в субстанции в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика бетаметазона натрия фосфата на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика бетаметазона натрия фосфата на хроматограмме стандартного раствора;

a₁ - навеска субстанции, мг;

a₀ - навеска стандартного образца бетаметазона натрия фосфата, мг;

W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;

P - содержание основного вещества в стандартном образце бетаметазона натрия фосфата, %.

Хранение. В плотно закрытой упаковке в защищенном от света месте.