"ФС.2.1.0175.18. Фармакопейная статья. Рутозид. Рутозида тригидрат"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том III")

Содержит не менее 95,0% и не более 101,0% рутозида C₂₇H₃₀O₁₆ в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Описание. Желтый или зеленовато-желтый мелкокристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в метаноле, умеренно или мало растворим в спирте 96%, практически нерастворим в воде и хлороформе.

1. ИК-спектрометрия. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца рутозида тригидрата.

2. Спектрофотометрия. Спектр поглощения 0,002% раствора субстанции в метаноле в области длин волн от 210 до 450 нм должен иметь максимумы при 257 нм и 358 нм с удельным показателем поглощения при 358 нм от 305 до 330.

3. Качественная реакция. 5 мг субстанции растворяют в 5 мл натрия гидроксида раствора 1 М; должно появиться желто-оранжевое окрашивание.

4. Качественная реакция. 20 мг субстанции растворяют в 5 мл горячего спирта 96%, прибавляют несколько капель хлористоводородной кислоты концентрированной и 50 мг цинка порошка; раствор должен постепенно окраситься в красный цвет.

Вещества нерастворимые в метаноле. Не более 3,0%. 2,5 г субстанции встряхивают в течение 15 мин в 50 мл метанола при температуре 20 - 25 °C. Раствор фильтруют при пониженном давлении через предварительно высушенный при температуре 100 - 105 °C, охлажденный в эксикаторе и взвешенный стеклянный фильтр (диаметр пор не более 1,0 - 1,6 мкм). Промывают три раза по 20 мл метанола. Фильтр сушат при температуре 100 - 105 °C в течение 30 мин и охлаждают в эксикаторе. Масса осадка не должен превышать 75 мг.

Светопоглощающие примеси. 0,2 г субстанции растворяют в 40 мл 2-пропанола, перемешивают в течение 15 мин, доводят объем раствора до 50,0 мл и фильтруют. Оптическая плотность полученного раствора в области длин волн от 450 до 800 нм в кювете с толщиной слоя 1 см не должна превышать 0,10, раствор сравнения - 2-пропанол.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Буферный раствор. 15,6 г натрия дигидрофосфата растворяют в 600 мл воды, доводят pH раствора фосфорной кислотой концентрированной до 3,0 и доводят объем раствора до 1,0 л.

Подвижная фаза А (ПФА). Тетрагидрофуран - буферный раствор 5:95.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Тетрагидрофуран - буферный раствор 40:60.

Испытуемый раствор. Около 0,1 г субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 20 мл метанола и доводят объем раствора ПФБ до метки.

Раствор сравнения. 1,0 мл испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят ПФБ до метки.

Раствор стандартного образца рутозида тригидрата. Около 20 мг стандартного образца рутозида тригидрата, содержащего примесь B, помещают в мерную колбу вместимостью 20 мл, растворяют в 4,0 мл метанола и доводят объем раствора ПФБ до метки.

Примечание.

Примесь A: , CAS 21637-25-2;

примесь B: , CAS 17650-84-9;

примесь C: 3,5,7-дигидрокси-2-(3,4-дигидроксифенил)-4H-1-бензопиран-4-он, CAS 117-39-5.

Хроматографируют испытуемый раствор, растворы сравнения и раствор стандартного образца рутозида тригидрата.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца рутозида тригидрата разрешение (R) между пиками рутозида и примеси B должно быть не менее 2,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков используется хроматограмма прилагаемая к стандартному образцу рутозида тригидрата.

Относительное время удерживания соединений. Рутозид - 1 (около 7 мин); примесь B - около 1,1; примесь A - около 1,2; примесь C - около 2,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчета содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь A - 0,8; примесь C - 0,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь каждого из пиков примесей A, B и C не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0%);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 4,0%).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,05 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,1%).

Вода. От 7,5% до 9,5% (ОФС "Определение воды", метод 1). Для определения используют около 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют около 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

Количественное определение. Определение проводят методом титриметрии.

Около 0,2 г (точная навеска) субстанции растворяют в 20 мл диметилформамида и титруют 0,1 М раствором тетрабутиламмония гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС "Потенциометрическое титрование").

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора тетрабутиламмония гидроксида соответствует 30,53 мг безводного рутозида C₂₇H₃₀O₁₆.

Хранение. В плотно закрытой упаковке в защищенном от света месте.