"Инструкция по выявлению, локализации и ликвидации очагов фомопсиса (серой пятнистости) подсолнечника"
(утв. Минсельхозпродом России 10.09.1996)

Инструкция подготовлена специалистами Росгоскарантина, Всероссийского НИИ по карантину растений (ВНИИКР), Всероссийского НИИ масличных культур (ВНИИМК), Пограничной инспекцией по карантину растений по Краснодарскому краю А.М. Косенко, О.В. Скрипка, Л.В. Маслиенко, В.Т. Пивень, Э.Л. Слюсарь, А.Г. Измалковой, В.Н. Харченко, И.А. Ярышевой.

Фомопсис - серо-коричневая или бурая пятнистость (гниль, рак) стеблей, фомопсиоз - опасное заболевание подсолнечника.

Возбудителем болезни является гриб Phomopsis helianthi Munt.-Cvet. et al., относящийся к классу Deuteromycetes, порядку Sphaeropsidales, роду Phomopsis. Совершенная (телеоморфная) стадия гриба Diaporthe helianthi Munt.-Cvet. et al. относится к классу Ascomycetes, порядку Diaporthales.

Возбудитель Ph. helianthi поражает культурные и дикорастущие виды рода подсолнечника, а также, возможно, и некоторые сорняки (сем. Compositae).

Впервые заболевание обнаружено в Югославии в 1960 г. на единичных растениях подсолнечника. С 1977 г. происходило быстрое распространение и интенсивное нарастание болезни в стране, которое привело к сильной эпифитотии в 1979 - 1982 гг. В настоящее время фомопсис подсолнечника зарегистрирован в Европе: Болгария, Венгрия, Германия, Испания, Италия, Молдова, Польша, Украина, Россия, Румыния, Франция, Чехословакия, Югославия.

Азия: Иран, Пакистан.

Африка: Марокко.

Северная и Южная Америка: Аргентина, Бразилия, Канада и США.

На территории России болезнь впервые зарегистрирована в 1990 г. в Ставропольском крае; в 1992 - 1994 гг. фомопсис подсолнечника проявился в Ростовской области, Краснодарском и Ставропольском краях, Республиках: Адыгея, Кабардино-Балкария и Карачаево-Черкесия. В 1995 г. на юге Краснодарского края проявление фомопсиса носило эпифитотийный характер.

При сильной степени поражения в период бутонизации растения, обычно, погибали.

При средней степени поражения урожайность семян снижалась на 60 - 66%, масличность на 3 - 4%.

Потери урожая семян в Югославии в 1980-х годах составили свыше 50%. Урожайность подсолнечника уменьшилась с 2,6 т/га в 1977 г. до 1,42 т/га в 1982 г. У зараженных семян снижались выход (до 40%) и качество масла, уменьшалась всхожесть, масса семян и их выполненность. При развитии болезни до цветения потери урожая достигали 50%, во время цветения - 20 - 30%, а при поражении подсолнечника в стадии молочной спелости составляли 10 - 20% урожая.

Возбудитель болезни - гриб Phomopsis (Diaporthe) heli-anthi поражает все надземные органы в течение вегетации (рис. 1).

На листьях заболевание проявляется сначала в виде мелких, потом крупных коричнево-серых или буро-черных пятен (некрозов), которые начинаются с верхушки или периферии и разрастаются между жилками листа. Некрозы разнообразной формы (часто треугольной) и размеров иногда окружены светлой хлоротической зоной. Пораженный лист увядает, засыхает, темнеет и поникает вдоль стебля, словно обожженный, а гриб развивается вдоль главной жилки к черешку и стеблю. Растение постепенно теряет тургор и увядает. Вместе с тем, споры гриба могут сразу заражать стебли подсолнечника, от которых позже поражаются черешки и листья растений.

Наиболее характерные признаки болезни образуются на стеблях в виде округлых или удлиненных пятен вначале светло-коричневого, а позднее бурого, серого и даже черного цвета, расположенных обычно в пазухах листьев. Реже они появляются в верхних участках междоузлий. Обычно поражение стебля отмечается выше четвертой пары листьев, число и размер пятен варьирует. Во влажных условиях они сливаются и окольцовывают стебель. Гриб, проникая в эпидермис, поражает вначале поверхностные ткани коры стебля, а затем разрушает его сердцевину частично или полностью, вследствие чего при нажатии на пораженный участок стебля он вдавливается. При сильном ветре пораженные части растений легко ломаются, что приводит к значительным потерям урожая. Период появления первых пятен до увядания растений во многом зависит от температуры и влажности воздуха, возраста и генотипа растения. У молодых растений он продолжается 10 - 12 дней, у более зрелых - 20 - 30 дней.

В период цветения и созревания растений могут также поражаться корзинки, при этом на их тыльной стороне развивается мягкое коричневое пятно, которое при благоприятных погодных условиях быстро увеличивается в размерах, сохраняя темно-коричневый цвет. При раннем заражении мицелий гриба заполняет всю сердцевину корзинки и проникает в семянки, которые чаще остаются невыполненными. При позднем заражении семена сильно поражены только в очаге заражения, при этом пятно занимает небольшую часть и четко выделяется с лицевой стороны корзинки. Пораженные семена щуплые и легко выпадают из корзинки. Во влажную погоду они покрываются белым мицелием, на котором позднее образуются темные точки-пикниды гриба. Ядра в пораженных семянках легко отделяются от плодовой оболочки (лузги) и имеют коричневую окраску (от светлой до темной). Сильно зараженные семена теряют всхожесть.

На пораженных участках летом при высокой влажности или осенью образуется анаморфная (пикнидиальная) стадия гриба - Phomopsis helianthi в виде коричнево-серых или черных пикнид шарообразной или неправильной формы при их скученном образовании. Размеры пикнид варьируют на листьях, черешках и стеблях от 120 до 450 мкм в диаметре. В них развиваются два или один тип спор , которые могут появляться в разное время (рис. 2). В пикнидах гриба, распространенного на юге России, образуются преимущественно только . Они одноклеточные с гиалиновой оболочкой, имеют удлиненную или изогнутую форму на одном или двух концах, обычно в виде кочерги, размеров 16 - 42,5 x 0,5 - 6,9 мкм, в среднем 25,8 x 2,5 мкм, одноклеточные бесцветные, эллипсоподобной формы, размером 5 - 16 x 1,7 - 5,5 мкм, в среднем 10,8 x 3,8 мкм.

Минимальная температура для развития гриба колеблется от 5 до 10 °C, максимальная 30 - 35 °C, оптимальная температура между 22 и 27 °C. Свет положительно влияет на развитие гриба и образование пикнид.

Весной на пораженных стеблях подсолнечника в тканях коры одиночно или группами образуются перитеции гриба. Зрелые перитеции черного цвета, обычно имеют форму неправильной сферы, размером 150 - 290 x 180 - 450 мкм со слегка вытянутыми носиками от 260 до 850 мкм и более. Аски удлиненные, булавовидные, 8-споровые, размером 44 - 67 x 7,5 - 12,5 мкм. Аскоспоры бесцветные, удлиненно-эллиптической формы с одной перегородкой 12,5 - 19,5 x 2,8 - 7,5 мкм. Показано, что в условиях высокой влажности и средних температур выше 10 °C патоген может закончить полный цикл развития осенью.

Источники и пути распространения заболевания: гриб перезимовывает в виде мицелия и пикнид на пораженных остатках растений и семенах подсолнечника. Вместе с тем, в условиях Югославии показано, что аскоспоры D. helianthi являются основным источником первичного заражения растений на следующий год. Выход аскоспор из перитециев происходит с конца апреля по сентябрь последовательными волнами и, таким образом, они заражают подсолнечник в течение всей вегетации. Аскопоры подхватываются воздушными течениями и разносятся на большие расстояния.

На ранних стадиях развития болезни по внешним признакам фомопсис подсолнечника можно спутать с другими заболеваниями, образующими пятнистости на подсолнечнике. Симптомы основных болезней и морфологические признаки возбудителей приведены в таблице.

В целях своевременного выявления фомопсиса подсолнечника необходимо проводить систематические обследования посевов подсолнечника.

В первую очередь в два срока следует обследовать посевы подсолнечника, засеянные импортными семенами в семеноводческих хозяйствах, на госсортоучастках, и семеноводческие и селекционные посевы научно-исследовательских и опытных учреждений, а также фермерских землепользований. Лучшими сроками для обследования посевов и выявления фомопсиса подсолнечника являются: фаза бутонизации и цветения, при этом пятнистости образуются на листьях, черешках и стеблях; а также перед уборкой урожая, когда характерные признаки болезни проявляются на стеблях и корзинках.

В интродукционно-карантинных питомниках обследования проводятся согласно положению, т.е. ежедекадно.

Производственные посевы подсолнечника обследуются в один срок - за 10 - 15 дней до уборки урожая.

Обследования в период вегетации должны проводиться силами и средствами самих хозяйств и силами специалистов-фитопатологов указанных организаций. Контроль и методическое руководство за обследованиями осуществляют Госинспекции по карантину растений.

Обследование участка проводится по ступенчатой диагонали. С площади до 10 га берется 10 проб (по 10 растений в каждой), на площади с 11 - 25 га - 20 проб, с 25 - 50 га - 30 проб и 51 - 100 га - 50 проб. Первая проба берется, отступая 10 - 15 м в глубь посева, а последующие пробы располагаются через равные промежутки. На каждые последующие 50 га просматриваются дополнительно по 100 растений.

Примерная норма при сплошном обследовании - 2 - 3 га в течение рабочего дня на одного обследователя, а при обследовании производственных посевов - 25 - 30 га.

В случае необходимости получения уточненной информации по распространению фомопсиса рекомендуется схема обследования, разработанная во ВНИИМК. На поле тщательно осматривается 100 растений подсолнечника в девяти линиях, равномерно расположенных по всему полю. Первые три линии располагаются на равных расстояниях, отступив на 15 - 20 метров от края поля, следующие три - посередине поля и последние три, отступив на 15 - 20 метров от другого края поля. Всего осматривается 900 растений. По каждой линии подсчет обычно проводит один человек, который отсчитывает 100 растений и при обнаружении среди них больных, отрывает лист подсолнечника. По количеству собранных листьев определяется процент пораженных растений.

В ходе обследования при обнаружении фомопсиса подсолнечника отмечают характер поражения (единичное, очаговое или равномерное), распространенность и степень развития болезни.

При очаговом или равномерном поражении посевов определяют процент пораженных растений, интенсивность поражения и степень развития болезни. Учеты проводятся в 3 - 4-кратной повторности.

Процент пораженных растений вычисляют по формуле:

где

C - процент пораженных растений (распространенность);

H - количество больных растений;

A - общее число учтенных растений.

Интенсивность пораженных отдельных органов (листья, стебли) учитывают по 5-балльной шкале визуально:

0 - поражение отсутствует.

1 - Коричневые пятна на листьях, переходят на черешок, стебель без признаков поражения.

2 - Коричнево-серое пятно на стебле, размером до 5 см. На поперечном срезе стебля видно поражение первичной коры.

3 - Пятно на стебле достигает длины 10 - 15 см. На поперечном срезе стебля поражение доходит до сосудистого цилиндра.

4 - Пятно на стебле до 20 - 25 см, если их несколько, они сливаются. Мицелий гриба проникает глубоко в ткань, до внутренней полости стебля. Стебель часто переламывается.

Степень развития заболевания определяют по формуле:

P - развитие болезни (в %);

(b·d) - сумма произведений числа пораженных растений (b) на соответствующий балл (d);

N - общее число учтенных растений в выборке (брать не менее 30 растений);

K - высший балл шкалы учета.

В ходе обследования отбираются пораженные растения или их часть с характерными признаками заболевания для проведения экспертизы. Отобранные образцы на месте обнаружения помещают в бумажные пакеты, снабдив их этикеткой (приложение N 1). По мере накопления образцы гербаризируют (подсушивают на воздухе или перекладывают фильтровальной бумагой), так как невысушенные образцы часто сгнивают при пересыпке в случае, если они упакованы в полиэтиленовые пакеты.

Сразу после сбора образцы направляют для анализа в ближайшую карантинную лабораторию, а при первичном выявлении объекта в крае, области, республике для подтверждения правильности определения - во ВНИИКР (отдел арбитражных экспертиз).

Результаты обследований посевов подсолнечника заносятся в журнал, который представляет собой первичную документацию и хранится у обследователя. Одновременно заполняется акт о проведенном обследовании, который подписывается обследователем и представителем хозяйства или владельцем землепользования и заверяется печатью.

В случае обнаружения и подтверждения болезни необходимо срочно поставить в известность местную Госинспекцию по карантину растений и Росгоскарантин.

Диагностика возбудителя фомопсиса подсолнечника из пораженных растений и семян проводится следующими методами. Для обнаружения гриба в семенном материале из среднего образца отбираются шероховатые, щуплые, покрытые беловатым налетом семена или растительные примеси с наличием пикнид на поверхности. Пораженные участки микроскопируют с целью определения видовой принадлежности возбудителя.

При отсутствии видимых признаков поражения от образца отбирают 200 - 400 штук семян, промывают проточной водой в течение часа и дезинфицируют 96% спиртом или 0,001 сулемой в течение 4 - 6 минут. Далее семена промывают 2 - 3 раза стерильной дистиллированной водой и раскладывают в чашки Петри на 2% картофельно-глюкозный агар (не более 6 - 8 семян на чашку) или на увлажненную фильтровальную бумагу (не более 10 - 15 штук на чашку). Семена инкубируют при 22 - 27 °C. Первое наблюдение проводят на 2 - 4 сутки. Возбудитель фомопсиса подсолнечника сначала образует белый, рыхлопушистый воздушный мицелий, неоднородной плотности, позже колония гриба приобретает местами беловато-серый или желтовато-зеленый оттенок, субстратный мицелий бежевого цвета с темными вкраплениями. Пикниды гриба появляются на 7 - 14 сутки. Анализ пораженных растительных органов (черешков, стеблей) вначале проводится визуально, а затем анатомическим методом (с помощью срезов некротизированной ткани и последующего их просмотра под микроскопом для выявления пикнид и спор гриба). При отсутствии зрелого спороношения гриба проводится выделение Ph. helianthi из пораженной ткани во влажной камере или на питательной среде.

1. Ввоз семян подсолнечника на территорию Российской Федерации, перевозки внутри страны семенного материала осуществляются в соответствии с "Правилами по охране территории РФ от карантинных вредителей, болезней растений и сорняков". М., 1996.

Из зарубежных стран завоз семян подсолнечника допускается при наличии фитосанитарного сертификата страны-экспортера и импортного карантинного разрешения Росгоскарантина, в котором определяются карантинные требования при их завозе и использовании.

Семенной материал разрешается завозить в Россию при условии его незараженности фомопсисом подсолнечника, установленной путем обследования культуры в период вегетации в районах выращивания, а также в результате карантинного досмотра и лабораторной экспертизы образцов подсолнечника в соответствии с действующим ГОСТом. Зараженные партии семян подлежат возврату или технической переработке.

Импортирующие организации при заключении торговых договоров (контрактов) на ввоз в Россию семян подсолнечника обязаны представлять информацию о фитосанитарном состоянии посевов подсолнечника за последние 3 года в местах его заготовки с указанием перечня вредителей, патогенов и степени поражения ими, а также характеристику устойчивости к фомопсису экспортируемых гибридов и сортов подсолнечника (по распространенности и оценке степени развития болезни).

2. Перед отправкой в Россию партии семенного подсолнечника должны быть протравлены рониланом 50% с. п. (3 кг/т) или фундазолом (бенлатом) 50% с. п. (3 кг/т) на территории страны-экспортера и затарены в соответствующую упаковку, что фиксируется в сопроводительных документах.

3. При ввозе семенного материала на территорию России (края, области, района) грузополучатель ставит в известность региональную Госинспекцию по карантину растений, предъявляет партию груза для вторичного карантинного досмотра и экспертизы.

4. Ввозимые семена подсолнечника для производственных посевов из зарубежных стран должны высеваться на специально выделенных участках хозяйств и научно-исследовательских учреждений по согласованию с карантинной службой.

5. Запрещается высев семян, не прошедших карантинную проверку и протравливание.

6. В период вегетации специалисты службы карантина растений регулярно обязаны проводить контрольные фитосанитарные обследования посевов подсолнечника согласно методике (см. стр. 7).

7. При обнаружении очагов фомопсиса подсолнечника на хозяйства накладывается карантин.

Очагом фомопсиса подсолнечника считается поле (участок), занимаемое культурой в бригаде, отделении хозяйства, подразделении акционерного общества, коллективно-долевого хозяйства, товарищества, научно-исследовательского учреждения, учебного, опытного или подсобного хозяйства, фермерского или приусадебного землепользования, на котором обнаружено заболевание.

Карантин налагается на хозяйство или землепользование решением органов исполнительной власти на местах по представлению Государственных инспекций по карантину растений. Основанием для наложения карантина является акт проведения обследования с приложением свидетельства карантинной экспертизы. Местные инспекции ставят в известность о принятом решении Госинспекцию по карантину растений Министерства сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации и соответствующие заинтересованные учреждения, предприятия и организации.

8. В целях локализации и ликвидации очагов фомопсиса подсолнечника проводятся следующие мероприятия:

- Устанавливаются границы выявленных очагов заболевания путем обследований зоны очага и пограничных с ним хозяйств.

- Семенные участки, где выявлено заболевание, выбраковываются, а собранные семена подсолнечника складируются отдельно и используются на техническую переработку.

- При выявлении болезни на госсортучастках и интродукционно-карантинных питомниках все растения скашиваются и уничтожаются, участок перепахивается.

- Посев подсолнечника проводится в соответствии с существующим севооборотом, но не ранее, чем через 6 лет на полях, где выявлены очаги болезни.

- После уборки подсолнечника в очаге поражения проводится измельчение растительных остатков и сорняков с последующей глубокой заделкой их в почву.

В зимне-весенний период партии семян подсолнечника, предназначенные для посева, подвергаются лабораторному анализу в госинспекциях по карантину растений с выдачей рекомендаций по их использованию.

- Не допускаются бесконтрольные перевозки семян подсолнечника в пределах Российской Федерации. Каждая партия семян подсолнечника должна сопровождаться карантинным сертификатом.

- Карантинные мероприятия реализуются с учетом особенностей хозяйств и землепользований (ферма и др.) и осуществляется под контролем местной администрации и госинспекции по карантину растений.

Основанием для снятия карантина является отсутствие рецидивов болезни в течение 6 лет, что фиксируется в документах, подтверждающих проведение карантинных мероприятий и мер борьбы по ликвидации очагов заражения. Карантин снимается с хозяйств или землепользования решением органов исполнительной власти на местах по представлению местных Государственных инспекций по карантину растений, которые извещают Госинспекцию по карантину растений Российской Федерации и соответствующие учреждения и организации.

В целях предупреждения распространения фомопсиса подсолнечника и снижения вредоносности болезни рекомендуется:

На полях, где выявлено заболевание, уборку проводить с низким срезом стебля.

Послеуборочные остатки тщательно измельчать с глубокой заделкой в почву (на 15 - 30 см). Для ускорения разложения растительных остатков подсолнечника следует перед или после их измельчения вносить азотные удобрения, лучше в форме аммиачной селитры (50 - 60 кг/га).

Если озимая пшеница высеяна после подсолнечника без заделки послеуборочных остатков, то после уборки таких посевов пшеницы необходимо проводить полупаровую обработку почвы, включающую дисковое лущение стерни вслед за уборкой культуры, вспашку без разрыва с лущением, немедленную заделку и прикатывание поля.

Использовать в качестве предшественников подсолнечника зерновые колосовые культуры.

Строго соблюдать ротацию подсолнечника в севообороте и не допускать насыщенности севооборотов посевами подсолнечника свыше 6 - 9%.

Не размещать посевы подсолнечника вблизи посевов сои и не сеять подсолнечник после сои и наоборот.

Посев подсолнечника проводить в оптимальные сроки, в хорошо прогретую почву.

Соблюдать пространственную изоляцию при размещении как семенных, так и производственных посевов подсолнечника относительно друг друга, своевременно уничтожать сорняки и самосев подсолнечника.

Не допускать загущенности посевов (для гибридов - не более 45 - 55 тысяч растений на гектар и 30 - 50 тысяч - для сортов), а также использования больших доз азотных удобрений.

Провести тщательную очистку и калибровку семенного материала.

Перед посевом протравить семена одним из фунгицидов, разрешенных для применения в сельском хозяйстве: рониланом 50% с. п. (3 кг/т) или фундазолом (бенлатом) 50% с. п. (3 кг/т), целесообразно с инкрустацией и окрашиванием.

Специалистами ВНИИМК рекомендовано обеззараживать семена композиционным составом ПТС-21 или биологическим препаратом "Вермикулен" в смеси с микродозами ронилана (1,5 - 2 кг вермикулена или 200 - 300 г вермикулена-пасты и 60 г ронилана на 1 т семян).

В районах распространения болезни следует проводить профилактические двукратные обработки семенных посевов подсолнечника рониланом 50% с. п. 1,0 - 1,5 кг/га или ровралем ФЛО 25% к. е. 0,5% сусп. в фазу образования 4 - 6 пары листьев и в начале бутонизации. За рубежом показана высокая эффективность двукратных опрыскиваний посевов бенлатом или беномилом (1,5 - 3 кг/га).

Основным способом борьбы является использование для посева устойчивых и толерантных к болезни гибридов и сортов подсолнечника отечественной и зарубежной селекции.

Необходимо использовать для посева оптимальное соотношение сортов и гибридов подсолнечника, различающихся по группам спелости.

Семенные склады, инвентарь, сельскохозяйственные машины и орудия, имевшие контакт с пораженным материалом, необходимо продезинфицировать 5% водным раствором 40%-ного формалина.

Рекомендуется проводить предуборочную десикацию растений, своевременную уборку, быструю очистку, сушку и сортировку семян.