"МР 1.2.0043-11. 1.2. Гигиена, токсикология, санитария. Контроль наноматериалов в объектах окружающей среды. Методические рекомендации"
(утв. Роспотребнадзором 17.10.2011)

1. Разработаны Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека; Учреждением Российской академии медицинских наук "Научно-исследовательский институт питания РАМН"; Государственным учебно-научным учреждением "Биологический факультет Московского государственного университета имени М.В. Ломоносова"; ФГБУ "Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Почетного академика Н.Ф. Гамалеи" Минздравсоцразвития России; Учреждением Российской академии наук "Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН"; Федеральным государственным унитарным предприятием "Всероссийский научно-исследовательский институт метрологической службы"; Учреждением Российской академии наук "Центр "Биоинженерия" РАН; ФБУЗ "Федеральный центр гигиены и эпидемиологии" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека; ООО "Интерлаб".

2. Разработаны в рамках Федеральной целевой программы "Развитие инфраструктуры наноиндустрии в Российской Федерации на 2008 - 2011 годы".

3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 17 октября 2011 г.

4. Введены в действие 17 октября 2011 г.

5. Введены впервые.

1.1. Настоящие методические рекомендации определяют порядок контроля искусственных наноматериалов абиогенного и биогенного происхождения в объектах окружающей среды: атмосферном воздухе, водных объектах, гидробионтах, растениях и животных.

1.2. Настоящие методические рекомендации применяются в ходе контроля за содержанием наноматериалов в окружающей среде в целях принятия решений по оценке рисков для здоровья человека, связанных с наноматериалами искусственного происхождения.

1.3. Методические рекомендации разработаны с целью обеспечения единства измерений и адаптации имеющихся методов и средств измерений в ходе оценки безопасности наноматериалов и нанотехнологий для состояния здоровья человека, сельскохозяйственных и домашних животных, компонентов естественных биоценозов.

1.4. Методические рекомендации предназначены для специалистов органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, а также могут быть использованы научно-исследовательскими организациями гигиенического профиля, медицинскими учебными заведениями и иными организациями и учреждениями, проводящими исследования по оценке безопасности наноматериалов.

1.5. Положения настоящих методических рекомендаций не распространяются на контроль:

- потребительской продукции наноиндустрии (парфюмерно-косметическая продукция, средства бытовой химии, дезинфицирующие средства, строительные и отделочные материалы, текстиль, упаковочные материалы);

2.1. Федеральный закон от 22 июня 1993 г. N 5487-1 "Основы законодательства Российской Федерации об охране здоровья граждан".

2.2. Федеральный закон от 25 ноября 2009 г. N 267-ФЗ "О внесении изменений в Основы законодательства Российской Федерации об охране здоровья граждан и отдельные законодательные акты Российской Федерации".

2.3. Федеральный закон от 30 марта 1999 г. N 52-ФЗ "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения".

2.4. Федеральный закон от 2 января 2000 г. N 29-ФЗ "О качестве и безопасности пищевых продуктов".

2.5. Федеральный закон от 26 июня 2008 г. N 102-ФЗ "Об обеспечении единства измерений".

2.6. Федеральный закон от 27 декабря 2002 г. N 184-ФЗ "О техническом регулировании".

2.7. Федеральный закон от 10 января 2002 г. N 7-ФЗ "Об охране окружающей среды".

2.8. Федеральный закон от 24 июня 1998 г. N 89-ФЗ "Об отходах производства и потребления".

2.9. Постановление Правительства Российской Федерации от 21 декабря 2000 г. N 987 "О государственном надзоре и контроле в области обеспечения качества и безопасности пищевых продуктов".

2.10. Постановление Правительства Российской Федерации от 21 декабря 2000 г. N 988 "О государственной регистрации новых пищевых продуктов, материалов и изделий".

2.11. Постановление Правительства Российской Федерации от 2 февраля 2006 г. N 60 "Об утверждении Положения о проведении социально-гигиенического мониторинга".

2.12. Приказ Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 23 августа 2010 г. N 708н "Об утверждении Правил лабораторной практики".

2.13. Постановление Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 23 июля 2007 г. N 54 "О надзоре за продукцией, полученной с использованием нанотехнологий и содержащей наноматериалы".

2.14. Постановление Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 31 октября 2007 г. N 79 "Об утверждении Концепции токсикологических исследований, методологии оценки риска, методов идентификации и количественного определения наноматериалов".

2.15. Приказ Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека от 19 июля 2007 г. N 224 "О санитарно-эпидемиологических экспертизах, обследованиях, исследованиях, испытаниях и токсикологических, гигиенических и иных видах оценок".

2.16. Приказ Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека от 17 ноября 2006 г. N 367 "О Порядке проведения социально-гигиенического мониторинга, представления данных и обмена ими".

2.17. СанПиН 2.1.7.1322-03 "Гигиенические требования к размещению и обезвреживанию отходов производства и потребления".

2.18. СанПиН 2.1.5.980-00 "Гигиенические требования к охране поверхностных вод".

2.19. СанПиН 2.2.1/2.1.1.1200-03 (с изменениями от 10.04.2008 и от 06.10.2009) "Санитарно-защитные зоны и санитарная классификация предприятий, сооружений и иных объектов".

2.20. СанПиН 2.1.4.1074-01 "Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества".

2.21. ГН 1.2.2633-10 "Гигиенические нормативы содержания приоритетных наноматериалов в объектах окружающей среды".

2.22. СП 2.1.5.1059-01 "Гигиенические требования к охране подземных вод от загрязнения".

2.23. СП 1.1.1058-01 "Организация и проведение производственного контроля за соблюдением санитарных правил и выполнением санитарно-противоэпидемических (профилактических) мероприятий".

2.24. Р 2.2.2006-05 "Руководство по гигиенической оценке факторов рабочей среды и трудового процесса. Критерии и классификация условий труда".

2.25. Р 2.2.1766-03 "Руководство по оценке профессионального риска для здоровья работников. Организационно-методические основы, принципы и критерии оценки".

2.26. МУ 1.2.2520-09 "Токсиколого-гигиеническая оценка безопасности наноматериалов".

2.27. МУ 1.2.2636-10 "Проведение санитарно-эпидемиологической экспертизы продукции, полученной с использованием нанотехнологий и наноматериалов".

2.28. МУ 1.2.2744-10 "Порядок отбора проб для выявления, идентификации и характеристики действия наноматериалов в рыбах".

2.29. МУ 1.2.2740-10 "Порядок отбора проб для выявления, идентификации и характеристики действия наноматериалов в водных беспозвоночных".

2.30. МУ 1.2.2741-10 "Порядок отбора проб для выявления и идентификации наноматериалов в лабораторных животных".

2.31. МУ 1.2.2742-10 "Порядок отбора проб для выявления и идентификации наноматериалов в растениях".

2.32. МУ 1.2.2743-10 "Порядок отбора проб для выявления и идентификации наноматериалов в водных объектах".

2.33. МР 1.2.2522-09 "Выявление наноматериалов, представляющих потенциальную опасность для здоровья человека".

2.34. МР 1.2.2639-10 "Использование методов количественного определения наноматериалов на предприятиях наноиндустрии и в контролирующих организациях".

2.35. МР 1.2.2640-10 "Методы отбора проб, выявления и определения содержания наночастиц и наноматериалов в составе сельскохозяйственной, пищевой продукции и упаковочных материалов".

2.36. МР 1.2.2641-10 "Определение приоритетных видов наноматериалов в объектах окружающей среды, живых организмах и пищевых продуктах".

2.37. МР 1.2.0016-10 "Методика классифицирования нанотехнологий и продукции наноиндустрии по степени их потенциальной опасности".

2.38. ГОСТ 8.207-76 "Государственная система обеспечения единства измерений. Прямые измерения с многократными наблюдениями. Методы обработки результатов наблюдений. Основные положения".

2.39. ГОСТ 30333-2007 "Паспорт безопасности химической продукции. Общие требования".

2.40. ГОСТ 12.0.004-79 "Организация обучения работающих безопасности труда. Общие положения".

2.41. ГОСТ Р ИСО/МЭК 17025-2006 "Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий".

2.42. ГОСТ Р ИСО 7708-2006 "Качество воздуха. Определение гранулометрического состава частиц при санитарно-гигиеническом контроле".

2.43. ГОСТ Р ИСО 14644-3-2007 "Чистые помещения и связанные с ними контролируемые среды. Часть 3. Методы испытаний".

2.44. ГОСТ 2761-84 "Источники централизованного хозяйственно-питьевого водоснабжения. Гигиенические и технические требования и правила выбора".

2.45. ГОСТ 17.1.3.08-82 "Охрана природы. Гидросфера. Правила контроля качества морских вод".

2.46. ГОСТ 12.1.007-76 "Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности".

2.47. ГОСТ 12.1.005-88 "Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны".

2.48. ГОСТ 17.2.3.01-86 "Охрана природы. Атмосфера. Правила контроля качества воздуха населенных мест".

2.49. ГОСТ 7.32-2001 "Отчет о научно-исследовательской работе. Структура и правила оформления".

2.50. ГОСТ 17.1.5.05-85 "Охрана природы. Гидросфера. Общие требования к отбору проб поверхностных и морских вод, льда и атмосферных осадков".

2.51. ГОСТ 26929-94 "Сырье и продукты пищевые. Подготовка проб".

2.52. ГОСТ Р 52833-2007 (ИСО 22174:2005) "Микробиология пищевой продукции и кормов для животных. Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) для определения патогенных микроорганизмов. Общие требования и определения".

2.53. ISO/TR 12885:2008(E) Nanotechnologies - Health and safety practices in occupational settings relevant to nanotechnologies.

3.1. Контроль наноматериалов (НМ) в объектах окружающей среды осуществляется в целях:

- мониторинга состояния здоровья населения и среды обитания, анализа, оценки и прогноза возможных неблагоприятных последствий, связанных с распространением НМ;

- оценки рисков, связанных с ввозом в страну, производством, оборотом, применением и утилизацией НМ и содержащей их продукции;

- проведения санитарно-эпидемиологических экспертиз, обследований, исследований, испытаний и гигиенических оценок продукции в соответствии с Приказом Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека от 19 июля 2007 г. N 224 и МУ 1.2.2636-10.

3.2. Контроль НМ в объектах окружающей среды проводится органами и учреждениями Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека и научно-исследовательскими учреждениями (лабораториями, испытательными центрами), аккредитованными в установленном порядке на проведение таких исследований.

3.3. Организации, проводящие мероприятия по контролю НМ в объектах окружающей среды:

3.3.1. Руководствуются правилами надлежащей лабораторной практики в соответствии с Приказом Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 23 августа 2010 г. N 708н.

3.3.2. Оснащаются необходимым оборудованием и метрологически аттестованными средствами измерений, прошедшими поверку (калибровку) в установленном порядке; эксплуатируемыми в соответствии с техническим паспортом и инструкцией по применению.

Примечание: результаты проведения поверки (калибровки) и текущего ремонта оборудования фиксируются в специальном журнале, доступном в любое время сотрудникам, эксплуатирующим оборудование или обеспечивающим его обслуживание; применяются средства измерений, имеющие сертификат Ростехрегулирования и зарегистрированные в Государственном реестре средств измерений.

3.3.3. Имеют в своем распоряжении стандартные образцы наночастиц (НЧ) и НМ, подлежащих контролю.

3.3.4. Располагают выделенными оборудованными помещениями для работы с НМ и биологическими образцами; стандартными операционными процедурами (СОП); оборудованными хранилищами для НМ, образцами объектов окружающей среды и продукции.

3.4. Работы по контролю НМ в объектах окружающей среды метрологически обеспечиваются. Для этого в организации, проводящей исследования, используются метрологически аттестованные методики определения НМ в объектах окружающей среды, утвержденные в установленном порядке. Для верификации, стандартизации и калибровки методов, применяемых при выявлении и идентификации НМ, используются стандартные образцы НМ, аттестованные в установленном порядке.

Каждый из тестов, используемых при проведении количественных определений НМ в объектах окружающей среды, характеризуется по следующим показателям:

- минимальное определяемое количество вещества;

- диапазон линейности стандартного графика;

- приемлемый коэффициент вариации для анализа образца;

- воспроизводимость результатов.

3.5. Мероприятия по обеспечению качества проводимых исследований включают оформление перечня исследований, проводимых в организации, с указанием для каждого исследования заказчика и руководителя, названия определяемого НМ, даты начала и состояния каждого исследования на текущий момент времени, результатов оценки протоколов и методов исследования на соответствие правилам лабораторной практики, данных мониторинга текущих исследований, сведений о проведенных проверках и рекомендаций по устранению недостатков.

Для осуществления программы по обеспечению качества исследований все производственные операции проводятся в соответствии с СОП. Соблюдение СОП осуществляется в целях обеспечения качества, достоверности и воспроизводимости результатов исследования.

3.6. Организация, проводящая исследования по контролю НМ в объектах окружающей среды, обеспечивает конфиденциальность результатов исследований в рамках принятых ею обязательств и в соответствии с законодательством Российской Федерации. Сотрудники, принимающие участие в проведении исследований по контролю НМ в объектах окружающей среды, соблюдают конфиденциальность в отношении любых данных, полученных в ходе исследования, в соответствии с законодательством Российской Федерации.

3.7. Основным документом, подтверждающим результаты определения НМ, является отчет о проведенном исследовании. Отчет составляется в соответствии с пунктом 4.9 настоящих методических рекомендаций.

4.1. Организация, осуществляющая контроль НМ в объектах окружающей среды, составляет программу (план) контроля. Программа (план) контроля составляется ответственным исполнителем, утверждается руководителем организации, осуществляющей контроль, и содержит следующие основные положения.

4.1.1. Перечень НЧ/НМ, являющихся потенциальными загрязнителями объектов окружающей среды на территории контроля (мониторинга), с указанием их известных физических, физико-химических и токсикологических характеристик (при наличии).

4.1.2. Перечень объектов окружающей среды, подлежащих контролю (мониторингу) НМ на данной территории (в данном регионе), который может включать:

- атмосферный воздух (на территории производственных объектов предприятий наноиндустрии, в их санитарно-защитных зонах, в населенных пунктах);

- водные объекты (водопроводная вода, вода открытых водоемов, донные отложения, грунтовые воды, атмосферные осадки);

- гидробионты (рыбы, беспозвоночные);

- почвы;

- дикорастущие и сельскохозяйственные растения;

- дикие и домашние животные;

- сельскохозяйственное сырье растительного и животного происхождения;

- пищевые продукты.

4.1.3. Контрольные точки для отбора проб объектов окружающей среды.

4.1.4. Используемые методы отбора проб объектов окружающей среды для определения НЧ/НМ.

4.1.5. Обоснование и перечень применяемых методов анализа НЧ/НМ в объектах окружающей среды.

4.1.6. Перечень и величины гигиенических нормативов НЧ/НМ (при их наличии), подлежащих контролю в объектах окружающей среды.

4.1.7. Периодичность проведения мероприятий по контролю НМ во всех установленных контрольных точках.

4.1.8. Соблюдение правил надлежащей лабораторной практики при проведении процедур контроля.

4.1.9. Стандартизация и метрологический контроль измерений.

4.2. Приоритеты в выборе НЧ/НМ, подлежащих контролю в объектах окружающей среды, устанавливаются на основании:

- сведений о размещении производственных объектов, являющихся потенциальными источниками загрязнения окружающей среды НЧ/НМ на территории (в регионе), где проводятся контрольные мероприятия;

- ассортимента и объемов промышленного производства НЧ/НМ, ввоза содержащей их продукции на контролируемую территорию и тех видов ее использования, которые сопровождаются поступлением в значительных количествах НЧ/НМ в окружающую среду (например, в составе агрохимикатов, пестицидов и агромелиоративных препаратов, средств очистки воды, препаратов для искусственного стимулирования атмосферных осадков и так далее);

- потенциальной опасности НЧ/НМ для здоровья человека, устанавливаемой методом математического моделирования на основе представленных в литературе данных о физических, физико-химических, биологических и экологических свойствах НЧ/НМ согласно МР 1.2.2522-09 и МР 1.2.0016-10;

- наличия методов выявления, идентификации и специфического количественного выявления НЧ/НМ в подлежащих контролю объектах окружающей среды.

4.3. Критериями для установления перечня объектов окружающей среды, подлежащих контролю содержания НЧ/НМ, являются:

- вероятность экспонирования человека объектами окружающей среды, потенциально загрязненными НЧ/НМ ("степень близости к человеку" в терминологии МР 1.2.0016-10); особое внимание при этом уделяют вероятности экспонирования наиболее чувствительных к неблагоприятным воздействиям НЧ/НМ популяций (групп повышенного риска) - детей, беременных и кормящих женщин, больных хроническими заболеваниями и других;

- имеющиеся данные о маршрутах миграции НЧ/НМ от непосредственных источников загрязнения в различные объекты окружающей среды с потоками воздуха, воды, при межсредовых переходах, по трофическим цепям биосферы и т.д.;

- данные о способности НЧ/НМ к накоплению (тропизме) в отдельных объектах окружающей среды.

4.4. Выбор контрольных точек для отбора образцов объектов окружающей среды на обследуемой территории осуществляется в привязке к местам расположения предприятий, производящих и применяющих НЧ/НМ, и объектов, осуществляющих утилизацию НЧ/НМ (полигонов твердых бытовых и промышленных отходов, мусоросжигательных заводов и других), санитарно-защитным зонам, маршрутам движения загрязненных сред, населенным пунктам, объектам здравоохранения и рекреации и другому. При выборе контрольных точек необходимо учитывать факторы, способные оказать влияние на пути (маршруты) миграции НЧ/НМ в окружающей среде, в том числе геологическое строение, рельеф местности, метеоусловия (господствующее направление ветров) и так далее. Контрольные точки для отбора разнородных объектов окружающей среды (например, воздуха, воды и живых организмов) располагают таким образом, чтобы иметь возможность оценить при интерпретации полученных данных происходящие межсредовые переходы НЧ/НМ.

4.5. При составлении программы контроля заранее известных источников загрязнения природной среды НЧ/НМ (например, от предприятий с установленной номенклатурой продукции наноиндустрии) в программу (план) контроля вносятся следующие сведения о контролируемых НЧ/НМ:

1) наименование НЧ/НМ;

2) сведения об организации-производителе;

3) технология производства НМ, с оценкой возможности его поступления в производственную и окружающую природную среду; приложение - оценка потенциальной опасности технологии по МР 1.2.0016-10;

4) сведения о составе НМ: название, химическая формула вещества, номер CAS (при наличии), присутствие примесей.

Примечание: приводится информация о составе НМ, раскрывающая риск, связанный с его производством и применением;

5) физико-химические свойства:

- агрегатное состояние, средний размер частиц, удельная площадь поверхности, формфактор;

- наличие кристаллической либо аморфной высокодисперсной фазы;

- плотность;

- растворимость в воде и биологических средах;

- температура плавления, кипения, вспышки, воспламенения;

- возможность и условия самовозгорания;

- способность к агломерации и агрегации;

6) стабильность и химическая активность, с указанием условий, которых следует избегать (температура, удары и др.), чтобы не вызвать опасную реакцию; перечисление веществ, контакт с которыми следует избегать, чтобы не вызвать опасной реакции;

7) токсичность, с полным описанием вредных воздействий при контакте с организмом человека;

8) воздействие на окружающую среду: подвижность, стойкость, биокумулятивный потенциал (при наличии данных);

9) виды опасного воздействия и условия их возникновения, в том числе возможные результаты при неправильном использовании НМ; пути возможного поступления в организм;

10) средства предотвращения поступления НМ в производственную и окружающую природную среду. Меры по предотвращению чрезвычайных ситуаций; меры личной и коллективной безопасности;

11) правила обращения и хранения.

4.6. Отбор проб объектов окружающей среды, транспортировка, хранение и подготовка проб к анализу (исследованию) содержания НЧ/НМ осуществляется с учетом того, что образцы, содержащие НЧ/НМ, могут являться источниками биологической опасности. Отбор проб проводят таким образом, чтобы свести к минимуму неконтролируемые процессы физико-химической трансформации НЧ/НМ (растворение, агломерация, агрегация, коагуляция и другое), способные исказить результаты анализа. Общая процедура отбора проб состоит, как правило, в отборе достаточно представительного количества точечных проб, их соединения с получением объединенной пробы, ее гомогенизации (усреднения) с последующим выделением средней пробы в количестве, достаточном для проведения анализов, устанавливаемых планом исследования (лабораторная проба) и возможных проверочных и арбитражных процедур (контрольная проба). Пробы отбирают так, чтобы обеспечить их репрезентативность, то есть нечувствительность к вариабельности исследуемого показателя (содержания НЧ/НМ) между отдельными порциями контролируемого объекта окружающей среды. Для обеспечения этого используются частные процедуры пробоотбора и пробоподготовки, представленные в нормативно-методических документах, утвержденных в установленном порядке (МР 1.2.2640-10, МУ 1.2.2740-10, 1.2.2742-10 - 1.2.2744-10 и другие).

4.7. При выявлении, идентификации, качественном и количественном анализе НЧ/НМ в объектах окружающей среды используются методы измерений (анализа), метрологические характеристики которых отвечают цели и задачам проводимых исследований. В частности, при проведении контроля содержания НМ в объектах окружающей среды на соответствие действующим гигиеническим нормативам, минимальное определяемое количество НМ для используемого метода составляет не более 50% от референтного уровня (гигиенического норматива) содержания НМ в данном объекте. Применяются методы выявления и идентификации НЧ/НМ, способные дифференцировать НЧ/НМ от их химических аналогов в традиционной форме макроскопических дисперсий и сплошных фаз.

Основным методом анализа, позволяющим дифференцировать НЧ/НМ от их химических аналогов в традиционной форме макроскопических дисперсий и сплошных фаз в составе объектов окружающей среды, является просвечивающая электронная микроскопия (ПЭМ). Выявление НЧ/НМ в составе образца производится путем обнаружения в препарате элементов структуры в диапазоне размеров 1 - 100 нм, контрастно отличающихся по величине электронной плотности от окружения (матрикса, дисперсионной среды). Идентификация НЧ/НМ осуществляется путем сравнения характеристик выявленных в образце НЧ с соответствующими характеристиками аттестованных стандартных образцов НЧ/НМ. Подлежат сличению со стандартным образцом размер, форма частиц, распределение по размерам, характер и форма выявленных агрегатов частиц, наличие кристаллической структуры по данным дифракции электронов в выбранной области, качественный химический состав по данным спектров СХПЭЭ.

Количественная оценка содержания НЧ/НМ в образце осуществляется путем подсчета числа наноразмерных объектов на единицу объема жидкого образца или на единицу площади поверхности ультратонкого среза.

В случаях, когда источник загрязнения объектов окружающей среды НЧ/НМ известен заранее, при их контроле допускается применение высокочувствительных методов химического (элементного) анализа, не специфичных в отношении присутствия в образце частиц высокодисперсной фазы. Применимость данных методов к задачам контроля НЧ/НМ определяется следующими факторами:

- должен иметься химический элемент, специфически маркирующий НЧ/НМ данного вида;

- контролируемые НЧ/НМ должны быть нерастворимы и не подвержены необратимой агрегации в природных средах;

- фоновые уровни маркерного химического элемента в составе объектов окружающей среды должны быть достаточно низкими в сравнении с его содержанием в контролируемых НЧ/НМ.

Анализ фуллеренов в природных объектах осуществляется с использованием ВЭЖХ. При этом критерием выявления и идентификации фуллеренов данного вида являются время выхода с хроматографической колонки и спектральная характеристика по данным масс-спектрального или спектрофотометрического детектора, которые должны совпадать с характеристиками стандартного образца. Количественное определение фуллеренов проводится с использованием калибровочного графика в координатах масса - площадь пика, который строится с использованием ряда возрастающих концентраций стандартного образца.

Выявление, идентификация и количественное определение биогенных НМ, содержащих биополимеры (ДНК, РНК, белки), осуществляется с использованием специфических для данного биополимера молекулярно-генетических и иммунохимических методов анализа.

Во всех случаях при анализе НЧ/НМ в составе объектов окружающей среды применяются методики, утвержденные в установленном порядке для данного типа природных объектов. Перечень действующих (по состоянию на 2011 год) нормативно-методических документов, устанавливающих применимость таких методик, приведен в таблице 1.

4.8. При лабораторном контроле НЧ/НМ в составе объектов окружающей среды применяются стандартные образцы НЧ/НМ. Каждый стандартный образец должен быть оснащен "Паспортом безопасности наноматериалов", который составляется в соответствии с ГОСТ 30333-2007. Хранение стандартных образцов НМ осуществляется отдельно от остальных веществ (реактивов) с соблюдением условий хранения, указанных в паспорте безопасности, на протяжении всего срока годности образца.

Рекомендуемый перечень стандартных образцов НЧ/НМ, необходимых для проведения выявления и идентификации НЧ/НМ в объектах окружающей среды, представлен в Приложении 2.

4.9. По результатам контроля НЧ/НМ в объектах окружающей среды на обследуемой территории составляется отчет, в котором содержатся:

4.9.1. Наименование, адрес организации-исполнителя.

4.9.2. Наименование заказчика исследования.

4.9.3. Даты начала и завершения исследований.

4.9.4. Цель и задачи исследования.

4.9.5. Описание контролируемых НМ, включая имеющиеся сведения о физических, химических, биологических, токсикологических свойствах.

4.9.6. Характеристика контролируемой территории, в том числе:

- наличие предприятий наноиндустрии и других объектов, являющихся источниками выбросов НЧ/НМ в окружающую среду;

- наличие и расположение санитарно-защитных зон;

- краткая демографическая характеристика (перечень населенных пунктов, численность населения в них);

- краткая физико-географическая характеристика (климат, количество осадков, господствующие направления ветров, растительность, водоемы);

- наличие на территории особо охраняемых природных объектов (заповедников, заказников, национальных парков), объектов рекреации, крупных стационарных медицинских учреждений.

4.9.7. Перечень объектов окружающей среды, подлежащих контролю, в соответствии с пунктом 4.1.2.

4.9.8. Методы контроля, включая следующие:

- отбора проб;

- пробоподготовки;

- анализа НЧ/НМ;

- стандартные образцы;

- статистической обработки результатов.

4.9.9. Результаты исследования, представленные в виде обобщающих таблиц, рисунков с соответствующей статистической обработкой и комментариев к ним.

4.9.10. Обсуждение результатов, включая оценку рисков, обусловленных выявленными видами загрязнения НЧ/НМ на территории, подлежащей контролю.

4.9.11. Выводы.

4.9.12. Список использованной литературы.

4.9.13. Необходимые приложения, в частности протоколы отбора проб объектов окружающей среды, оформленные в установленном порядке.

Примечание: при проведении мероприятий по контролю НЧ/НМ на территории предприятий наноиндустрии отчет может содержать описание технологического процесса, использующего НЧ/НМ, критические контрольные точки производства (Серия технических отчетов ВОЗ N 908. - 2003, приложение 7).

Отчет о результатах проведенного исследования составляется ответственным исполнителем, утверждается руководителем контролирующей организации и скрепляется ее печатью.

Отчет оформляется в соответствии с ГОСТ 7.32-2001.

Специфика мероприятий по контролю искусственных НЧ/НМ в объектах окружающей среды, включая установление контрольных точек, периодичность исследования, методы отбора проб и анализа содержания НЧ/НМ, отражена в нормативно-методических документах, утвержденных в установленном порядке. Ниже приведены краткие сведения об особенностях процедуры контроля НЧ/НМ в отдельных видах объектов окружающей среды, приоритетных с позиций социально-гигиенического мониторинга.

5.1. Атмосферный воздух

5.1.1. При составлении программы контроля НЧ/НМ в воздухе оценивают вероятность их поступления в воздух с учетом данных паспортизации НМ согласно пункту 4.5. При этом особое внимание уделяется НМ (нанопорошкам), способным образовывать стойкие взвеси в воздухе (наноразмерные аэрозоли) как в условиях их использования по назначению, так и при производственной аварии, а также в ходе хранения, транспортировки, применения и утилизации. Сведения об указанных свойствах НМ получают из технологических регламентов и иной технической документации предприятий наноиндустрии.

5.1.2. Контроль НМ в воздухе осуществляется в целях обеспечения безопасности населения при поступлении в воздух рабочей зоны производств и атмосферный воздух населенных мест НЧ/НМ различного искусственного происхождения.

5.1.3. Перечень приоритетных НЧ/НМ, подлежащих контролю в атмосферном воздухе, устанавливается по сведениям о составе и характере выбросов от источников загрязнения на основе данных инвентаризации выбросов предприятий (объектов), ожидаемых концентраций (по результатам расчетов рассеивания примесей в атмосфере), а также с учетом потенциальных рисков воздействия НМ в аэрозольной форме.

5.1.4. При проведении процедур контроля НЧ/НМ в атмосферном воздухе руководствуются ГОСТ 17.2.3.01-86.

5.1.5. Организация, проводящая контроль НМ в воздухе рабочей зоны, составляет программу производственного контроля с учетом нормативно-методических документов по контролю вредных веществ (СП 1.1.1058-01; Руководство Р 2.2.2006-05; ГОСТ 12.1.007-76, 12.1.005-88), методов оценки и минимизации риска (Руководство Р 2.2.1766-03; ISO/TR 12885:2008(E), ИСО 14971) и других утвержденных в установленном порядке методик выполнения измерений.

5.1.6. Цель производственного контроля заключается в выявлении, идентификации и оценке содержания НМ в воздухе рабочей зоны, а при наличии гигиенических нормативов - установлении класса вредности и опасности условий труда и степени профессионального риска для здоровья работников и обоснования соответствующих мер защиты (Руководство Р 2.2.2006-05; 2.2.1766-03).

5.1.7. Для выявления опасных технологических участков, процессов и источников образования и выделения наноаэрозолей в воздух рабочей зоны проводится контроль максимальной их концентрации. Для оценки риска воздействия НМ на организм работника контролируется среднесменная концентрация наноаэрозоля с учетом длительности контакта конкретной профессии с вредным веществом на протяжении всей рабочей смены (Руководство Р 2.2.2006-05).

5.1.8. Перечень точек отбора проб для лабораторного исследования воздуха рабочей зоны должен содержаться в "Программе производственного контроля" (согласно СП 1.1.1058-01) в текстовом либо графическом виде.

5.1.9. Отбор проб воздуха проводят в зоне дыхания работника (постоянное рабочее место). При непостоянном рабочем месте отбор проб проводится в точках, в которых работник может находиться в течение смены. Устройства для отбора проб могут быть стационарными или персональными (индивидуальными).

5.1.10. При наличии технологических процессов с использованием высоких температур или размещении технологического оборудования на открытых промышленных площадках отбор проб рекомендуется проводить в теплый и холодный периоды года.

5.1.11. Периодичность контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны и количество проб устанавливается согласно ГОСТ 12.1.005-88 и Руководству Р 2.2.2006-05 (приложение 9, обязательное): для веществ I класса опасности периодичность контроля - не реже 1 раза в 10 дней; II класса опасности - 1 раз в месяц; III класса опасности - 1 раз в 3 месяца; IV класса опасности - 1 раз в 6 месяцев.

5.1.12. Отбор проб воздуха для определения НЧ, представленных в виде аэрозоля с твердой фазой, осуществляется с использованием методик, утвержденных в установленном порядке, и рекомендованного для этого оборудования. Рекомендуется использование аппарата Кротова (модель 818) или других пробоотборников, использование которых для целей улавливания взвешенных аэрозольных частиц разрешено в установленном порядке.

5.1.13. Выявление и идентификация НЧ/НМ в пробах атмосферного воздуха методом электронной микроскопии осуществляется в соответствии с МР 1.2.2639-10 (п. 6.4.1).

5.1.14. В целях скринингового оперативного контроля неорганических НМ рекомендуется использовать методы AES или ICP-MS в соответствии с МР 1.2.2641-10 (п. п. 6.1, 6.2). При выборе маркерных химических элементов для выявления отдельных видов НЧ/НМ ориентируются на МР 1.2.2639-10 (п. 7.1, таблица 13).

5.1.15. Для контроля содержания в воздухе производственных помещений углеродных нанотрубок используется метод ПЭМ с контрастированием солями тяжелых металлов согласно МР 1.2.2639-10 (п. 6.4.1).

5.1.16. Дополнительно для контроля НЧ в воздушной среде рекомендуется использовать методы оценки массовой концентрации и площади поверхности НЧ, а также измерение распределения НЧ, используя анализ подвижности частицы, инерционное смещение; измерения импакторами низкого давления (согласно ГОСТ Р ИСО 7708-2006, 14644-3-2007, ISO/TR 12885:2008(E)). Для количественного определения НЧ (число, поверхность, изображение) могут быть использованы следующие приборы: CPC - конденсационный счетчик частиц, DMA - дифференциальный анализатор подвижности, TEOM - измерители содержания массы пыли и др.

5.1.17. Проведение мероприятий по контролю НЧ/НМ в воздухе населенных пунктов включает установление постоянных и временных постов наблюдения за степенью загрязнения воздушной среды. Постом наблюдения является выбранное место (точка местности), на котором размещают соответствующие приборы для отбора (анализа) проб воздуха. Посты наблюдений устанавливаются 3 категорий: стационарные, маршрутные, подфакельные.

Стационарный пост предназначен для обеспечения непрерывной регистрации содержания загрязняющих веществ или регулярного отбора проб воздуха для последующего анализа.

Маршрутный пост предназначен для регулярного отбора проб воздуха в случаях, когда необходимо более детально изучить состояние загрязнения атмосферного воздуха в отдельных районах, например в жилых районах за пределами СЗЗ.

Подфакельный пост предназначен для отбора проб воздуха под дымовым (газовым) факелом с целью выявления зоны влияния данного источника промышленных выбросов. Подфакельные посты располагаются в точках на фиксированных расстояниях от источника выбросов. Они перемещаются в соответствии с направлением факела источника выбросов.

5.1.18. При проведении натурных исследований с целью выявления зон риска (зон загрязнения атмосферного воздуха НЧ) в окружении предприятий (или иных объектов) размещение постов отбора проб воздуха и последующие лабораторные исследования атмосферного воздуха проводятся на границе предполагаемой санитарно-защитной зоны (в соответствии с СанПиН 2.2.1/2.1.1.1200-03), основанной на расчетах вероятности поступления НЧ в атмосферный воздух, а также на территории ближайшей жилой застройки.

5.1.19. Выбор местоположения постов наблюдения проводится с учетом ситуационного плана взаимного размещения загрязняющего атмосферу объекта и жилых (и иных защищаемых) территорий. При подфакельных наблюдениях отбор проб воздуха осуществляется с подветренной стороны от промышленной площадки. Площадки размещения постов оборудуются в соответствии со специализированными нормативно-методическими документами, утвержденными в установленном порядке.

5.1.20. Организации, осуществляющие контроль НЧ/НМ в воздухе, согласовывают размещение постов наблюдений с территориальными органами Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Число стационарных постов наблюдений определяется в зависимости от характера рельефа местности, площадного распределения источников загрязнения, количества и территориальной близости жилых, рекреационных, курортно-санаторных и других территорий. Регулярные наблюдения на установленных стационарных или маршрутных постах (в соответствии с розой ветров для данной местности и направлению по странам света в отношении защищаемых территорий), осуществляющих отбор проб, проводятся по программе получения информации о разовых и среднесуточных концентрациях загрязняющих веществ. Частота отбора проб устанавливается по согласованию с территориальными органами Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

5.1.21. Одновременно с отбором проб воздуха определяют метеорологические параметры: направление и скорость ветра, температуру воздуха, атмосферное давление, состояние погоды и подстилающей поверхности.

5.2. Водные объекты

5.2.1. Контроль НЧ/НМ в водных объектах проводится в целях обеспечения безопасности хозяйственно-питьевого, культурно-бытового и рыбохозяйственного водопользования, предотвращения и/или снижения риска для возникновения заболеваний при водопользовании населения с учетом свойств и разнообразных условий применения НМ.

5.2.2. Загрязнение подземных вод НЧ/НМ возможно при проведении буровых работ, добыче полезных ископаемых открытыми разрезами, карьерами и шахтным способом, закачке в глубокие и продуктивные горизонты буровых растворов, жидких отходов (сточных вод) нанотехнологических производств, организации и эксплуатации полигонов твердых бытовых и промышленных отходов, шламохранилищ, при осуществлении хозяйственной и иной деятельности в пределах зон санитарной охраны источников питьевого водоснабжения, строительстве гидротехнических сооружений, изменяющих условия питания и разгрузки подземных вод.

5.2.3. Попадание НЧ/НМ в питьевую воду может происходить в результате поступления их в источники водоснабжения в ходе хозяйственной деятельности человека, применения в качестве конструкционных элементов оборудования (изоляционные материалы, лаки, краски, прокладки, герметики), конструкционных материалов (трубы, емкости для хранения воды), реагентов, добавляемых в воду при водоподготовке, в составе фильтрующих материалов.

5.2.4. Источниками загрязнения НЧ/НМ открытых водоемов, помимо вышеперечисленных факторов, является поступление НЧ/НМ с атмосферными осадками, в которых НЧ могут выступать в роли ядер конденсации пересыщенного водяного пара. Возможно также поступление в водоемы НЧ/НМ, содержащихся в наноструктурированных агрохимикатах и пестицидах в результате их смыва в водоемы дождевыми и талыми водами.

5.2.5. Контроль НЧ/НМ в водных объектах осуществляется органами и учреждениями Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека и уполномоченными лабораториями.

5.2.6. Выбор водных объектов, в которых осуществляется контроль НЧ/НМ, определяется путями попадания НЧ и НМ в воду и закономерностями циркуляции их в нативной либо модифицированной форме в воде и включает:

- водные ресурсы водных объектов или их участки, являющиеся источниками питьевого хозяйственно-бытового централизованного и нецентрализованного водоснабжения;

- водные ресурсы водных объектов или их участков для рекреационного водопользования;

- водные ресурсы подземных водных объектов;

- оросительные системы;

- сточные воды (промышленные и хозяйственно-бытовые).

5.2.7. Объектами для выявления и идентификации НМ в водоемах являются: вода, донные отложения и водная растительность.

5.2.8. Размещение контрольных точек устанавливается согласно СанПиН 2.1.5.980-00, СП 2.1.5.1059-01, СанПиН 2.1.4.1074-01.

5.2.9. Отбор проб воды водного объекта в местах водоотведения проводится в соответствии с МУ 1.2.2743-10 (п. 3.5.2).

5.2.10. Отбор проб воды в системах хозяйственно-питьевого водопользования проводится в соответствии с МУ 1.2.2743-10 (п. 3.5.3).

5.2.11. Отбор проб сточных вод рекомендуется проводить в точках до поступления стока на очистные сооружения и после его очистки.

5.2.12. Минимальная частота отбора проб для контроля НЧ/НМ в водных объектах определяется согласно ГОСТ 2761-84, 17.1.3.08-82, 17.1.5.05-85, СанПиН 2.1.5.980-00, 2.1.4.1074-01, СП 2.1.5.1059-01. При проведении контрольных мероприятий в случае производственной аварии и в других чрезвычайных ситуациях частота отбора проб может быть увеличена.

5.2.13. Методы определения искусственных НЧ/НМ в пробах воды и водных объектах с использованием ПЭМ устанавливаются МР 1.2.2639-10 (п. п. 6.4.5 - 6.4.6).

5.2.14. Контроль фуллеренов в образцах водных объектов воды осуществляется с использованием метода ВЭЖХ. Применяется аналитическое оборудование по МР 1.2.2639-10. Подготовка проб (экстракция проб воды органическим растворителем - толуолом или бромбензолом) проводится согласно МР 1.2.2641-10 (п. 7.2.6). Экстракцию (извлечение) фуллеренов из образцов донных отложений, водной флоры и фауны проводят методами экстракции подходящими органическими растворителями в соответствии с протоколами, утвержденными для данного типа объектов в установленном порядке. Анализ содержания фуллерена методом ВЭЖХ проводится согласно МР 1.2.2641-10 (п. п. 7.2.3, 7.2.4, 7.2.7).

5.2.15. Скрининговые оценки содержания НЧ/НМ в водных объектах проводят с использованием методов элементного анализа (ICP-MS или AES) согласно МР 1.2.2641-10 (п. п. 6.1, 6.2). Применимость методов устанавливается на основании критериев, изложенных в п. 4.7 настоящих методических рекомендаций.

5.3. Почвы

5.3.1. Источниками поступления НЧ/НМ в почву являются:

- наноструктурированные минеральные удобрения, стимуляторы роста растений, пестициды и агромелиоративные препараты, вносимые в почву сельхозугодий или смываемые дождевыми водами с обрабатываемых сельскохозяйственных растений;

- НЧ, поступающие в почву с атмосферными осадками в виде ядер конденсации водяного пара;

- НЧ, НМ и продукты их трансформации, содержащиеся в подвергающихся захоронению производственных и бытовых отходах.

5.3.2. Контрольные точки для определения НЧ/НМ в почвах устанавливаются на территории предприятий наноиндустрии, в их санитарно-защитных зонах, на сельхозугодьях, подвергающихся обработке наноструктурированными агрохимикатами, на территориях населенных пунктов и объектов рекреации, где возможнее контакт человека (особенно детей) с почвой.

5.3.3. Периодичность отбора проб почвы для контроля НЧ/НМ устанавливается органами и учреждениями Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека в субъектах Российской Федерации в соответствии с действующей программой мониторинга.

5.3.4. Отбор проб почвы для определения НЧ/НМ осуществляется в соответствии с методиками, утвержденными в установленном порядке. Методы выявления и идентификации НЧ/НМ в почвах с использованием ПЭМ представлены в МР 1.2.2639-10 (п. 6.4.7).

5.4. Растения

5.4.1. Объектами контроля НЧ/НМ в растениях являются:

- растительное сельскохозяйственное сырье, полученное с использованием наноструктурированных и нанодиспергированных и (или) содержащих искусственные НЧ и НМ минеральных удобрений, средств защиты растений, ядохимикатов (пестицидов);

- растительное сельскохозяйственное сырье, биомасса дикорастущих растений, водоросли и морские травы, подвергающиеся контаминации НЧ/НМ, содержащимися в промышленных и бытовых отходах, поступающими с грунтовыми водами и атмосферными осадками;

- растительное сырье и древесина, подвергнутые обработке искусственными НЧ и НМ в ходе промышленной переработки.

5.4.2. При выборе контрольных точек для отбора образцов растительности в целях контроля НЧ/НМ учитывают:

- характеристику территории, на которой производится обследование растений (местоположение, наличие антропогенных факторов загрязнения, близость к предприятиям наноиндустрии, наличие пылевых или жидких выбросов этих предприятий);

- сведения о применении наноструктурных агрохимикатов на подлежащих контролю сельскохозяйственных угодьях;

- видовой состав обследуемой флоры;

- сведения о свойствах контролируемого НМ (если он известен).

5.4.3. В качестве объектов для контроля НМ в растительном покрове рекомендуется выбирать массовые дикорастущие виды злаков - пырей (Agropyron sp. L.), тимофеевку (Phleum sp. L.) и др., культивируемые виды злаков - пшеницу (Tritucum sp. L.), ячмень (Hordeum sp. L.), рожь (Secale sp. L.), овес (Avena sp. L.), рис (Oryza sp. L.), а также другие виды одно- и многолетних травянистых растений. Выбор представителей семейства злаков (Poaceae) является оптимальным в связи с их повсеместным распространением (дикорастущие злаки) и с их разведением в сельском хозяйстве как основных зерновых культур. Большинство дикорастущих злаков - многолетние растения, ежегодно отрастающие от корневищ, зимующих в почве, что создает дополнительные возможности для аккумуляции НМ в подземных частях этих растений.

5.4.4. Древесная флора также может являться акцептором НЧ. В организм животных и человека НМ могут поступать по пищевым цепям, что вызывает необходимость контроля содержания НМ в лесных ресурсах. На степень воздействия НМ на лесной биогеоценоз могут влиять следующие факторы: действующие уровни НМ, видовая чувствительность, возрастная стадия роста и развития растений, тип лесной флоры и другое. По уровню содержания НМ в древесине и лиственной части деревьев при одинаковой плотности загрязнения НМ почвы и в одинаковых лесорастительных условиях основные лесообразующие породы образуют, в порядке убывания, следующий условный ряд: мягколиственные породы, твердолиственные породы, хвойные породы. Следует ожидать, что накопление НМ древесным ярусом будет происходить интенсивнее в молодых, чем в средневозрастных, приспевающих и спелых растениях, а деревья лучшего класса роста будут накапливать НМ больше и интенсивнее, чем угнетенные и отстающие в росте. У всех древесных пород наибольшее содержание НМ ожидается в вегетативных органах (листья или хвоя и побеги), а наименьшее - в древесине.

5.4.5. Контроль НЧ/НМ можно при необходимости проводить также в других компонентах лесного фитоценоза - мхах, лишайниках и грибах, которые могут подвергаться загрязнению НМ в том числе за счет их поступления из почвы. Следует ожидать, что большой способностью концентрировать НМ могут обладать мхи и лишайники. В некоторых видах грибов содержание НМ может быть таким же высоким, как в лишайниках и мхах. В шапках грибов ожидаемое содержание НМ выше, чем в ножке.

5.4.6. В зависимости от цели и задач контроля выделяют следующие виды наблюдений за уровнями загрязнения НЧ/НМ дикорастущей флоры:

- исходные наблюдения, фиксирующие уровни загрязнения дикорастущей флоры НМ на момент начала проведения мониторинга;

- плановые (периодические или сезонные) наблюдения в соответствии с регламентом контроля (мониторинга);

- внеплановые (оперативные) наблюдения при чрезвычайных ситуациях (промышленных аварийных выбросах);

- сплошное обследование с целью определения зоны поражения в случае промышленных аварийных выбросов.

5.4.7. Плановое определение содержания НМ в дикорастущей флоре проводится один раз в год (если другое не определено) - в период начала вегетации (для средней полосы России - май - июнь).

5.4.8. Внеплановое и сплошное обследование проводится после аварии с целью определения уровней загрязнения НМ и состава выпадений. Сплошное обследование дикорастущей флоры проводится на всей территории, расположенной на прогнозируемом следе выпадений НЧ, с учетом данных метеонаблюдений на момент аварии и последующие сутки, и территории, прилегающей к нему.

5.4.9. При отборе проб растений для контроля за НЧ/НМ состав и объем отбираемых проб, методы их консервации, хранения, транспортирования и маркировки определяются в соответствии с МУ 1.2.2742-10 и другими нормативно-методическими документами, утвержденными в установленном порядке.

5.4.10. Перечень реактивов и оборудования, применяемых при выявлении и идентификации НМ в растениях, а также порядок выявления НЧ в образцах методом просвечивающей электронной микроскопии представлен в МР 1.2.2639-10 (п. 6.4.4). Перечень реактивов и оборудования, применяемых при выявлении и идентификации фуллеренов в дикорастущей флоре, а также порядок выявления фуллеренов в образцах методом ВЭЖХ приведен в МР 1.2.2639-10, 1.2.2641-10.

5.5. Гидробионты

5.5.1. Контроль НМ в гидробионтах (рыбах, водных беспозвоночных) проводится в целях обеспечения безопасности продукции, предотвращения и/или снижения риска для возникновения заболеваний при использовании рыбопродукции населением с учетом свойств и разнообразных условий применения НМ.

5.5.2. Попадание в гидробионты НМ может происходить в результате поступления их в источники водоснабжения с атмосферными осадками, сточными водами предприятий наноиндустрии, стоками дождевых и талых вод с сельхозугодий, обработанных наноструктурированными агрохимикатами, при применении НЧ/НМ в составе конструкционных элементов оборудования (изоляционные материалы, лаки, краски, прокладки, герметики), конструкционных материалов (трубы, емкости для хранения воды), фильтрующих элементов, реагентов, добавляемых в воду при водоподготовке.

5.5.3. Выбор контрольных точек для отбора проб гидробионтов в целях определения содержания НЧ/НМ осуществляется на основе тех же принципов, что и в случае отбора проб водных объектов из открытых водоемов (пункт 5.2 настоящих методических рекомендаций). При отборе проб из проточных водоемов рекомендуется устанавливать контрольные точки выше и ниже места поступления сточных вод.

5.5.4. Периодичность отбора проб определяется согласно ГОСТ 2761-84, 17.1.3.08-82, 17.1.5.05-85, СанПиН 2.1.5.980-00, 2.1.4.1074-01, СП 2.1.5.1059-01. Указанные документы устанавливают обязательную минимальную частоту отбора проб в зависимости от типа водного объекта, его санитарного состояния. С учетом результатов санитарного надзора за состоянием водных объектов, питьевой воды на содержание НМ промышленного, сельскохозяйственного и бытового происхождения частота отбора проб может быть увеличена.

5.5.5. Выбор видов гидробионтов, в которых осуществляется определение НМ, определяется их численностью (фоновые виды) и промысловой значимостью. Использовать лучше всего фоновые для данной местности виды, чтобы иметь гарантию отлова одного и того же вида гидробионтов во всех изучаемых точках. Рекомендуется учитывать экологические характеристики водных организмов - распределение, типы питания и размножение.

5.5.6. Критическими органами для контроля НМ в рыбах являются в порядке убывания значимости: 1) жабры, 2) желудочно-кишечный тракт, 3) печень, 4) гонады, 5) головной мозг, 6) мышечная ткань (каркас). Отбор проб проводится в соответствии с МУ 1.2.2744-10.

5.5.7. Наиболее подходящими для контроля НЧ/НМ видами водных беспозвоночных являются организмы-фильтраторы (ветвистоусые рачки и двустворчатые моллюски) и детритофаги (ракообразные). Критическими органами для выявления НМ у двустворчатых моллюсков являются в порядке убывания значимости: 1) жабры, 2) желудочно-кишечный тракт, 3) печень, 4) сердце, 5) гонады, 6) мышечная ткань. Для выявления НМ в мелких ракообразных используют особь целиком. Отбор проб проводится в соответствии с МУ 1.2.2740-10.

5.5.8. При выявлении и идентификации искусственных НЧ/НМ в образцах гидробионтов используются методы ПЭМ, ICP-MS, AES, ВЭЖХ (фуллерены) в соответствии с МР 1.2.2639-10 (п. п. 6.4.4, 7.1 - 7.6, 8.1 - 8.5) и 1.2.2641-10 (п. п. 5.1, 6.1, 6.2). Возможно применение других методов, утвержденных в установленном порядке. Методы выявления, идентификации и количественного анализа НЧ/НМ в гидробионтах совпадают с методами, применимыми к анализу тканей теплокровных животных (п. 5.6 настоящих методических рекомендаций).

5.6. Организмы теплокровных животных

5.6.1. Контроль НМ осуществляется в организмах теплокровных животных в целях предупреждения/выявления загрязнения окружающей среды искусственными НЧ от расположенных на контролируемой территории промышленных объектов наноиндустрии и других потенциальных источников загрязнения НЧ/НМ.

5.6.2. При выборе объектов контроля среди представителей теплокровных животных рассматриваются возможные пути попадания и аккумуляции загрязняющих веществ в организмы животных, их участие в пищевых цепях биоценоза, а также распространенность животных и трудности, сопряженные с процессом отлова и проведения анализа. В качестве объектов контроля могут выступать представители отряда грызунов, например полевая мышь (Apodemus agrarius), полевки (Microtus arvalis Pall., Clethrionomys glareolus, Microtus argestis, Arvicola oeconomus и др.), водная полевка (Arvicola terrestris), домовая мышь (Mus musculus), лемминги (Lemmus sibiricus, Dicrostonyx torquatus, Myopus schisticolor); крыса черная (Rattus rattus), и насекомоядных, например бурозубки (Sorex auraneus, Sorex polustris, Sorex jacksoni).

Данные виды массово представлены на значительной части территории лесостепной и степной зон России, многие из них составляют большую долю биомассы грызунов. Для обеспечения достоверности исследования необходима группа животных отрицательного контроля, т.е. животных, отловленных в районах, где опасность загрязнения окружающей среды контролируемыми на заданном участке НЧ не прогнозируется.

5.6.3. Контроль НЧ/НМ в животных в плановом порядке осуществляется на обследуемой территории с периодичностью 1 раз в год (в соответствии с Приказом Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека от 17 ноября 2006 г. N 367 "О Порядке проведения социально-гигиенического мониторинга, представления данных и обмена ими"). Предпочтительно проведение мероприятий по контролю в весенне-летний период (май - сентябрь), когда поведенческая активность животных максимальна. В случае внепланового контроля либо внештатной ситуации на производстве и крупного выброса НЧ в окружающую среду проводится внеплановый забор материала для контроля, например, непосредственно после происшествия, через несколько часов, на следующие сутки, на третьи сутки, а также через неделю и месяц после аварии для отслеживания динамики аккумуляции НЧ в организмах животных. Частота отбора проб в случае аварии, контрольные точки и количество образцов устанавливаются для каждого конкретного объекта наноиндустрии индивидуально в зависимости от его локализации, типа производимых/используемых в технологическом цикле НЧ и их потенциальной опасности, а также их объема производства.

5.6.4. Животных отлавливают при контроле в количествах, достаточных для обеспечения репрезентативности контроля. Репрезентативность при отборе проб животных тканей обеспечивается в соответствии с МУ 1.2.2741-10 (п. 4.3).

5.6.5. В связи с тем, что грызуны являются носителями различных инфекций, все операции по отлову, транспортированию животных, препарированию биологических образцов рекомендуется проводить, строго руководствуясь правилами биологической безопасности. Отлов животных производится с помощью живоловок. Орудия лова и другой инструмент, соприкасающийся в процессе работы с грызунами (капканы, мешочки и т.д.), рекомендуется перевозить и переносить в закрытой таре. Хранить орудия лова, так же как и собранный материал, рекомендуется в специальных хранилищах, исключающих несанкционированный доступ. Живых грызунов помещают в металлические или обитые изнутри оцинкованным железом отсадники или ящики. Грызунов, добытых мертвыми, складывают в специальные мешочки, которые затем хранят в ящиках.

Вскрытие, забор проб органов и тканей животных проводится согласно МУ 1.2.2741-10 "Порядок отбора проб для выявления и идентификации НМ в лабораторных животных".

5.6.6. Контроль НЧ/НМ в органах и тканях наземных животных осуществляется в следующей последовательности:

1) органы пищеварительной системы (кишечник, печень);

2) органы дыхательной системы (легкие);

3) органы мочевыделительной системы (почки);

4) органы и ткани кровеносной системы (сердце, кровь);

5) органы нервной системы (мозг);

6) покровные ткани (кожа);

7) экскреты (моча, молоко, кал);

8) гонады.

В связи с тем, что проведение анализа на содержание искусственных НЧ во всех перечисленных органах представляет собой весьма трудоемкую задачу, рекомендуется конкретизировать набор органов для анализа в каждом случае, руководствуясь, в первую очередь, наиболее возможным путем поступления НЧ в организм животного - через желудочно-кишечный тракт, дыхательную систему или кожу:

- при пероральном попадании НМ: желудок, кишечник, печень (за исключением железосодержащих НЧ), почки, мозг, кровь, плазма, селезенка (за исключением железосодержащих НЧ), кал, моча;

- при попадании на кожу: эпидермис, дерма, кровь, плазма;

- при попадании ингаляционным путем: легкие, кровь, плазма, почки, мозг, печень (за исключением железосодержащих НЧ), селезенка (за исключением железосодержащих НЧ), моча.

5.6.7. Лабораторный анализ отобранных образцов проводится в соответствии с МР 1.2.2641-10 и 1.2.2639-10. Пробоподготовка биологических образцов проводится в соответствии с указанными методическими рекомендациями для каждого конкретного метода.

Метод ПЭМ применим для выявления и идентификации искусственных НЧ металлов и оксидов металлов, агрегатов углеродных частиц (нанотрубок и фуллеренов), некоторых полимерных частиц. На основании более высокой электронной плотности по сравнению с биологическим материалом, а также характерной формы и размера частиц возможно непосредственная визуализация НЧ в органах и тканях животных. Аналитические методики, такие как дифракция электронов и СХПЭЭ, позволяют идентифицировать детектируемые частицы. При составлении программы контроля учитывают, что метод ПЭМ позволяет детектировать НЧ только в случае высокой аккумуляции в организмах животных. Так, в общем случае метод ПЭМ применим для контроля НЧ в организмах в животных в случае большого выброса НЧ/НМ в окружающую среду. Можно применять его в отдельных контрольных точках либо после выявления элементов искусственных НЧ другими методами, например AES, ICP-MS, ВЭЖХ для визуализации искусственных НЧ в органах животных и определения их локализации.

Применение при скрининговой оценке содержания НЧ/НМ в органах и тканях животных методов AES, ICP-MS возможно в условиях, перечисленных в пункте 4.7.

5.6.8. В случае подтверждения факта наличия НЧ в организмах животных на контролируемых территориях вокруг производственного объекта область контроля расширяют и проводят дополнительный анализ за границами контролируемых во время планового контроля участков местности для выяснения границ распространения загрязнения; особое внимание уделяют контролю местности вблизи жилых районов и на сельхозугодьях.

БАД - Биологически активная добавка к пище

ВЭЖХ - Высокоэффективная жидкостная хроматография

ИФА - Иммуноферментный анализ

НМ - Наноматериалы

НЧ - Наночастицы

ОТ - Обратная транскрипция

СЗЗ - Санитарно-защитные зоны

ПЦР - Полимеразная цепная реакция

ПЭМ - Просвечивающая электронная микроскопия

СОП - Стандартные операционные процедуры

СХПЭЭ - Спектр характеристических потерь энергии электронов

ЭФ в ПААГ - Электрофорез в полиакриламидном геле

AES - Атомно-эмиссионная спектрометрия

ICP-MS - Масс-спектрометрия с индуктивно связанной плазмой