"Методические указания по газохроматографическому измерению содержания 1-фенил-4,5-дихлорпиридазона (дихлорпиридазона) и 1-фенил-6-амино-5-хлорпиридазона-6 (феназона) на коже"
(утв. Минздравом СССР 28.09.1989 N 5135-89)

На коже человека феназон вызывает легкое воспаление, на глазах вызывает конъюнктивит с дальнейшим нарушением зрения. Дихлорпиридазон (ДХП) оказывает на кожу более слабое действие.

Методика основана на газохроматографическом определении обработанной пробы с использованием детектора постоянной скорости рекомбинации.

В качестве смывающей жидкости используется этиловый спирт.

Диапазон измеряемых концентраций ДХП 0,00004 - 0,0007 мг/кв. см и феназона 0,0002 - 0,01 мг/кв. см. Погрешность определения не превышает 15%.

Определению не мешают мукохлорная кислота, анилин и фенилгидразин.

ПДУ дихлорпиридазона и феназона на коже не установлены.

Феназон, перекристаллизованный, с Т. пл. 205 - 206 °C.

Дихлорпиридазон, перекристаллизованный, с Т. пл. 161 - 164 °C.

Метил-бета-цианэтиленсилоксановый каучук ХЕ-60 жидкая фаза для хроматографии.

Хроматон-AW-ДMCS фирмы "Chemapol, ЧССР, зер. 0,20 - 0,25 мм - твердый носитель для хроматографии.

Хлороформ, ГОСТ 215-74, х.ч.

Этиловый эфир, ТУ 39-69.

Этиловый спирт, ГОСТ 18300-72.

Газообразный азот особой чистоты в баллонах с редуктором.

Основные растворы с содержанием 1 мг/мл готовят растворением 100 мг феназона и дихлорпиридазона в 100 мл этанола.

Срок хранения - 2 месяца в холодильнике.

Вата гигроскопическая.

Образцы ткани.

Хроматограф серии "Цвет-100" с детектором постоянной скорости рекомбинации.

Хроматографическая колонка стеклянная размером (100 х 0,4) см.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 100 и 50 мл.

Пробирки с пришлифованными пробками вместимостью 10 мл.

Пипетки, ГОСТ 20292-74, на 1,5 и 10 мл.

Микрошприц МШ-10.

Секундомер, ГОСТ 5072-72.

Баня водяная, ТУ 64-4-2850-76.

Пинцет медицинский.

Фарфоровая чашка диаметром 120 мм.

Лупа измерительная, ГОСТ 8309-85.

Линейка логарифмическая.

Участок загрязненной кожи 100 кв. см обрабатывают 10 мл этанола, нагретого до 40 °C, налитого в фарфоровую чашку. Ватным тампоном 0,3 г, смоченным в спирте, обмывают участок кожного покрова сверху вниз. Одновременно проводят смыв с кожи у рабочих, не контактирующих с определяемыми веществами. Отобранная проба может сохраняться месяц.

Вату отжимают, промывают 1 мл этанола, вновь отжимают, измеряют количество экстрагента, доводят до 10 мл и 1 мкл последнего вводят в испаритель хроматографа.

Общую подготовку прибора проводят согласно инструкции.

Условия хроматографирования:

Длина колонки 100 см.

Внутренний диаметр - 0,3 см.

Хроматографическая насадка - 10% XE-60 на хроматоне AW-ДMCS, зер. 0,20 - 0,25 мм. Температура колонки для феназона 260 °C, для ДХП 190 °С.

Температура испарителя 280 °C.

Температура камеры детектора 280 °C.

Скорость газа-носителя (азота особой чистоты) для продувки:

колонки 90 мл/мин.,

детектора 150 мл/мин.

Скорость движения диаграммной ленты 60 мм/ч.

Объем вводимой пробы 1 мкл.

Время удерживания ДХП 3 мин. 30 с,

феназона 4 мин.

Количественное определение ДХП и феназона проводят методом абсолютной градуировки по высотам пиков для ДХП и по площадям пиков для феназона. Для построения градуировочной характеристики в хроматографическую колонку в пятикратной повторности вводят по 1 мкл градуировочных растворов, полученных разбавлением исходных стандартных растворов с содержанием феназона: 0,002; 0,004; 0,006; 0,02; 0,1 мкг/мкл и дихлорпиридазона: 0,0004; 0,00068; 0,00136; 0,0068; 0,0076 мкг/мкл.

Строят градуировочный график в координатах: высота пика (см) от количества ДХП и площадь пика (кв. см) от количества феназона в вводимой пробе.

Содержание ДХП и феназона C (мг/кв. см) вычисляют по формуле:

где Q - количество искомого вещества, найденное во всей пробе, мг;

S - площадь исследуемой части тела, кв. см.