"Методические указания по хроматографическому измерению концентраций бициклата в воздухе рабочей зоны"
(утв. Минздравом СССР 12.12.1988 N 4899-88)

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны предназначены для работников санитарно-эпидемиологических станций и санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также научно-исследовательских институтов системы здравоохранения России и других заинтересованных министерств и ведомств.

Методические указания разрабатываются и утверждаются с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны их предельно допустимым концентрациям (ПДК) - санитарно-гигиеническим нормативам, утвержденным Министерством здравоохранения СССР, оценки эффективности внедренных санитарно-гигиенических мероприятий, установления необходимости использования средств индивидуальной защиты органов дыхания, оценки влияния вредных веществ на состояние здоровья работающих.

Включенные в данный выпуск Методические указания подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны" и ГОСТ 12.1.016-79 "ССБТ. Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных веществ" и одобрены Проблемной комиссией "Научные основы гигиены труда и профессиональной патологии". Методические указания являются обязательными при осуществлении вышеуказанного контроля.

Бициклат (бициклофос, хостаквик, гептенофос) - действующее начало 0,0-диметил-0-(6-хлорбицикло)3,2,0)гептадиен-1,5-ил)фосфат.

В воздухе находится в виде паров и аэрозоля.

Бициклат относится к высокотоксичным фосфорорганическим пестицидам, опасным при попадании на кожу. Кумулятивный эффект проявляется слабо.

В механизме токсического действия этого пестицида ведущее значение имеет угнетение функции нервной системы, печени и почек.

ПДК бициклата в воздухе 0,5 мг/куб. м.

Метод основан на использовании газожидкостной (с пламенно-фотометрическим детектором) и тонкослойной хроматографии.

Отбор проб с концентрированием - бумажный фильтр "синяя лента", ацетон-вода 7:3.

Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме 0,005 мкг (ГЖХ), 2 мкг (ТСХ).

Нижний предел измерения в воздухе 0,1 мг/куб. м (ГЖХ), 0,2 мг/куб. м (ТСХ) (при отборе 10 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций - 0,1 - 1 мг/куб. м.

Измерению не мешают наполнители технического препарата.

Суммарная погрешность определения +/- 23%.

Время выполнения измерения, включая отбор проб, - 2 часа.

Хроматограф с пламенно-фотометрическим (ПФД) детектором по фосфору (тип Цвет-164 и др.).

Микрошприц МШ на 10 мкл.

Колонка стеклянная, длина 1 м, диаметр 3 мм.

Аспирационное устройство.

Поглотительные приборы с пористой пластинкой N 1.

Ротационный испаритель с набором колб марки ИР-1 и ТУ 25-11-91776.

Фильтры бумажные "синяя лента", ТУ 6-09-1678-77.

Секундомер.

Фильтродержатели.

Пипетки, колбы, мерная посуда, ГОСТ 20292-74 и ГОСТ 1770-74.

Ацетон, ч., ГОСТ 2601-79.

Хлороформ, ч., ГОСТ 20015-74.

Сульфат натрия безводный, ч., ГОСТ 4166-76.

Хроматрон N-AW с 5% SE-30 (Хемапол, ЧССР).

Стандартный раствор N 1 бициклата с содержанием 100 мкг/мл.

Готовят растворением 10 мг препарата в мерной колбе на 100 мл ацетона. Хранят в холодильнике, устойчив в течение 2-х месяцев.

Стандартные растворы бициклата с содержанием 10, 5 и 1 мкг/мл готовят соответствующим разведением ацетоном стандартного раствора N 1. Хранят не более 5 дней.

Азот газообразный, ГОСТ 9293-74.

Водород газообразный, ГОСТ 3022-70.

Воздух с объемным расходом 1 л/мин. последовательно аспирируют через помещенный в фильтродержатель фильтр "синяя лента" и поглотитель, содержащий 10 мл смеси ацетон-вода 7:3 (при охлаждении льдом).

Для определения 1/2 ПДК достаточно отобрать 10 л воздуха. Длительность хранения пробы в холодильнике (+4 °C) не более 2-х дней.

Хроматографическую колонку с помощью вакуума заполняют готовой насадкой (около 2 г) - Хроматон N-AW с 5% SE-30 и кондиционируют при 220 °C в течение 5 - 6 часов в токе газа-носителя.

Градуировочные растворы с содержанием бициклата от 1 до 10 мкг/мл готовят соответствующим разведением стандартного раствора N 1 ацетоном согласно таблице. Стандартные растворы бициклата устойчивы при хранении в холодильнике в течение 5 дней.

Вводят 5 мкл каждого градуировочного раствора в хроматограф через самоуплотняющуюся мембрану. Строят градуировочную кривую, выражающую зависимость высоты пика (мм) от концентрации компонента (мкг/мл).

Для каждой концентрации проводят не менее 5 параллельных измерений.

--------------------------------

<*> При необходимости для работы можно использовать термоионный детектор (ТИД).

Бумажный фильтр, содержащий аэрозоль, из фильтродержателя переносят в коническую колбу и заливают 20 мл ацетона. Экстрагируют бициклат в течение 30 мин. Экстракцию повторяют дважды. Объединяют, сушат безводным сульфатом натрия и сливают в колбу для отгонки растворителей.

Смесь ацетон-вода 7:3 из поглотителя переносят в делительную воронку, прибавляют 200 мл дистиллированной воды и реэкстрагируют препарат дважды по 20 мл хлороформом. Объединенный хлороформный экстракт сушат безводным сульфатом натрия (5 - 7 г) и сливают в колбу для отгонки растворителей, где находится экстракт из фильтра. Концентрируют растворитель при температуре бани не выше 50 °C до объема 0,2 - 0,3 мл, досуха упаривают на воздухе.

Остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и 5 мкл микрошприцем вводят в испаритель хроматографа через самоуплотняющуюся мембрану. Записывают хроматограмму, замеряют высоту пика и по градуировочному графику находят концентрацию измеряемого компонента.

Концентрацию бициклата в мг/куб. м "С" вычисляют по формуле:

где:

а - концентрация вещества, найденная в поглотительном растворе по градуировочному графику, мкг/мл;

в - общий объем поглотительного раствора, мл;

V - объем воздуха, отобранный для анализа, приведенный к стандартным условиям, л.

Аспирационное устройство.

Поглотительные приборы с пористой пластинкой N 1.

Ротационный испаритель с набором колб марки ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.

Фильтры бумажные "синяя лента", ТУ 6-09-1678-77.

Фильтродержатели, ТУ 25-11-1062-75.

Пипетки, колбы, мерная посуда, ГОСТ 20292-74 и ГОСТ 1770-74.

Облучатель ртутно-кварцевый, ТУ 64-1-1618-82.

Камера хроматографическая, ГОСТ 1770-79.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-79.

Ацетон, ч., ГОСТ 2601-79.

Хлороформ, ч., ГОСТ 20015-79.

Сульфат натрия безводный, ч., ГОСТ 4166-76.

Аммиак водный 25%, ГОСТ 3760-79.

н-Гексан, ч., ТУ 6-09-3375-78.

Диэтиловый эфир, х.ч., ГОСТ 6662-79.

Нитрат серебра, ч.д.а., ГОСТ 277-79.

Пластинки "силуфол" (Хемапол, ЧССР).

Стандартный раствор бициклата, содержащий 100 мкг/мл вещества, готовят растворением 10 мг препарата в мерной колбе на 100 мл в ацетоне.

Проявляющий реактив - водно-ацетоновый раствор аммиака серебра. 0,5 г нитрата серебра растворяют в 5 мл дистиллированной воды, добавляют 7 мл аммиаката (d = 0,9 г/куб. см) и доводят до 100 мл ацетоном. Срок хранения 5 - 6 дней в холодильнике. Подвижная фаза гексан-ацетон 2:1.

Воздух со скоростью 1 л/мин. последовательно аспирируют через помещенный в фильтродержатель фильтр "синяя лента" и поглотитель, содержащий 10 мл смеси ацетон-вода 7:3 (при охлаждении льдом).

Для определения 1/2 ПДК следует отобрать 10 л воздуха. Длительность хранения пробы в холодильнике (+4 °C) не более 2-х дней.

Бумажный фильтр, содержащий аэрозоль, из фильтродержателя переносят в коническую колбу и заливают 20 мл раствора. Экстрагируют бициклат в течение 30 мин. Экстракцию повторяют дважды. Объединяют экстракт, сушат безводным сульфатом натрия и сливают в колбу для отгонки растворителей. Смесь ацетон-вода 7:3 из поглотителя переносят в делительную воронку, прибавляют 200 мл дистиллированной воды и реэкстрагируют препарат дважды по 20 мл хлороформом. Объединенный хлороформный экстракт сушат безводным сульфатом натрия (5 - 7 г) и сливают в колбу для отгонки растворителей, где находится экстракт из фильтра. Концентрируют растворитель при температуре бани не выше 50 °C до объема 0,2 - 0,3 мл. Остаток в колбе количественно наносят при помощи капиллярной пипетки на хроматографическую пластинку так, чтобы диаметр пятна не превышал 1,5 см. Колбу с экстрактом смывают небольшими порциями диэтилового эфира, который наносят в центр пятна. Справа и слева от пятна наносят серию стандартных растворов, содержащих 2, 5, 7 и 10 мкг препарата. Пластинку с нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, в которую за 30 мин. до хроматографирования залита смесь гексан-ацетон 2:1. После поднятия фронта подвижного растворителя на 10 см пластинку вынимают и оставляют на несколько минут на воздухе для испарения подвижного растворителя. После этого пластинку обрабатывают из пульверизатора водно-ацетоновым раствором нитрата серебра и подвергают УФ-облучению в течение 30 мин. Бициклат проявляется в виде черного пятна на белом фоне.

Количественное определение пестицида проводят путем сравнения интенсивности окраски и измерения площади пятна пробы и стандартного раствора. Измерение площади проводят с помощью миллиметровой бумаги. Прямолинейная зависимость между интенсивностью и площадью пятна с содержанием препарата в пятне соблюдается и интервале 2 - 10 мкг.

Концентрацию вещества "С" в воздухе (в мг/куб. м) вычисляют по формуле:

где:

а - количество вещества, найденное в пробе, мкг;

V - объем воздуха (в л), отобранный для анализа, приведенный к стандартным условиям (см. Приложение 1).

Приведение объема воздуха к стандартным условиям проводят по следующей формуле: