"Методические указания по определению рицида-П в рисе, воде и почве методом газожидкостной хроматографии"
(утв. Минздравом СССР 28.01.1980 N 2143-80, 08.06.1989 N 5001-89)

--------------------------------

<*> Разработаны Ф.Р. Мельцер, К.Ф. Новиковой (ВНИИХСЗР).

Принцип метода. Метод основан на извлечении рицида-П из риса этилацетатом, из воды - гексаном, а из увлажненной почвы - смесью гексана с ацетоном (4:1), удалении растворителя, перераспределении рицида-П в гексан и определении методом ГЖХ с ТИД.

Метрологическая характеристика метода. Диапазон измеряемых концентраций: в рисе - 0,025 - 0,5 мг/кг, в воде - 0,0005 - 0,002 мг/л, в почве - 0,05 - 2,00 мг/кг. Предел обнаружения в хроматографируемой пробе 0,2 - 8,0 нг. Нижний предел определения в почве 0,05 мг/кг. Среднее значение определения стандартных количеств (n = 15) 74,8 +/- 3,3% в рисе, 94,6 +/- 4,8% в воде, 95,3 +/- 3,5% в почве.

Доверительный интервал среднего значения определения (n = 5, p = 0,95) +/- 4,1% в рисе, +/- 6,0% в воде, +/- 4,8% в почве.

Избирательность метода. Метод селективен. Селективность обеспечивается сочетанием трех альтернативных колонок различной полярности и ГЖХ с ТИД.

Реактивы и растворы. Гексан свежеперегнанный. Ацетон. Этилацетат. Хроматон N-AW-DMCS (0,200 - 0,250 мм) с 5% XE-60. Хроматон N-супер (0,16 - 0,20 мм) с 3% SE-30. Хроматон N-AW-HMDS (0,16 - 0,20 мм) с 2% ПДЭГС. Газообразный азот особой чистоты из баллона или гелий. Водород из баллона или получаемый из генератора водорода. Воздух из баллона или нагнетаемый компрессором. Натрия сульфат безводный. Стандартный раствор рицида-П в ацетоне с содержанием 100 мкг/мл (раствор N 1) и 1 мкг/мл (раствор N 2). Для приготовления раствора N 1 в мерную колбу вместимостью 100 мл помещают навеску рицида-П (100 мг), взятую на аналитических весах с точностью +/- 0,0002 г. Навеску растворяют в ацетоне и доводят до метки тем же растворителем. Из раствора N 1 пипеткой отбирают 1 мл, переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят до метки гексаном. Растворы N 1 и N 2 стабильны при хранении в холодильнике в течение года.

Приборы и посуда. Хроматограф "Цвет-106" или аналогичный прибор с ТИД. Ротационный вакуумный испаритель или аналогичный с набором колб. Механический встряхиватель или аналогичный. Колбы: круглодонные вместимостью 50, 300 и 500 мл; плоскодонные вместимостью 250 мл, 1 л; мерные вместимостью 100 мл. Пипетки на 10; 5 и 1 мл с делениями. Эксикатор. Грушевидные колбочки с пробками на шлифах вместимостью 100 мл. Почвенное сито. Микрошприц. Секундомер. Фарфоровая чашка.

Подготовка к определению. Подготовка колонки. Готовят насадку с 2% ПДЭГС на хроматоне N-AW-HMDS. В круглодонную колбу на 300 мл помещают навеску ПДЭГС (1 г), взвешенную с точностью +/- 0,2 г, и растворяют жидкую фазу в 200 мл хлороформа. В полученный раствор при непрерывном равномерном помешивании постепенно высыпают 49 г хроматона N-AW-HMDS (0,16 - 0,20 мм). Объем раствора должен быть не менее чем в два раза больше насыпного объема сорбента. С помощью ротационного вакуумного испарителя при слабом нагревании водяной бани удаляют растворитель. После того как носитель при вращении колбы начинает легко осыпаться со стенок, его переносят в фарфоровую чашку и выдерживают в сушильном шкафу при температуре 60 - 70 °C в течение 1 ч. После охлаждения в эксикаторе носитель пересыпают в стеклянную емкость с плотно закрываемой пробкой.

Заполненную носителем колонку присоединяют к хроматографу и кондиционируют при скорости потока азота или гелия 75 мл/мин. сначала в режиме программирования температуры от 50 до 210 °C со скоростью нагрева 1 °C/мин., а затем при 210 °C в течение 10 ч без подсоединения колонки к детектору. После завершения кондиционирования колонку подсоединяют к детектору, прибор подготавливают согласно инструкции.

Подготовка проб к анализу. Рис измельчают в кофейной мельнице до размера частиц, как в манной крупе. Для анализа берут 50 г измельченного риса.

Почву просеивают через почвенное сито, подготавливают 3 - 5 параллельных навесок массой 10 г. Перед анализом каждую пробу помещают в плоскодонную колбу вместимостью 250 мл и увлажняют 5 мл дистиллированной воды.

Ход анализа. Экстракция. Навеску риса 50 г помещают в круглодонную колбу на 500 мл, добавляют 150 мл этилацетата и экстрагируют рицид-П с помощью механического встряхивания колбы в течение 30 мин. Экстракт фильтруют в коническую колбу на 1 л. Рицид-П из риса экстрагируют еще трижды этилацетатом порциями по 100 мл. Объединенный экстракт сушат над безводным сульфатом натрия (примерно 40 г) в течение 10 мин. Небольшими порциями декантируют раствор в круглодонную колбу на 50 мл и отгоняют растворитель с помощью ротационного вакуумного испарителя. Промывают сульфат натрия небольшими порциями этилацетата. Последнюю порцию растворителя отгоняют полностью. К сухому остатку пипеткой добавляют 5 мл гексана. Колбу закрывают притертой пробкой, тщательно обмывают стенки колбы растворителем. В хроматограф вводят 2 мкл полученного раствора.

Пробу воды (1 л) переносят в делительную воронку на 1,5 л, добавляют 20 - 30 г хлорида натрия, и рицид-П экстрагируют гексаном порциями по 100 мл четыре раза. Объединенный гексановый экстракт сушат над безводным сульфатом натрия. Небольшими порциями декантируют раствор в круглодонную колбу на 50 мл. Растворитель отгоняют с помощью ротационного вакуумного испарителя до объема 1 - 2 мл. Безводный сульфат натрия промывают небольшими порциями гексана. Последнюю порцию гексана отгоняют до объема 1 - 2 мл и переносят остаток количественно с помощью ацетона в грушевидную колбу вместимостью 10 - 15 мл. Растворитель из грушевидной колбы отгоняют досуха. К сухому остатку пипеткой добавляют 2 мл ацетона, колбу закрывают пришлифованной пробкой, тщательно обмывают стенки колбы растворителем. В хроматограф вводят 2 мкл полученного раствора.

Навеску увлажненной анализируемой пробы почвы заливают 50 мл смеси гексана с ацетоном (4:1) и экстрагируют рицид-П с помощью механического встряхивания колбы в течение 30 мин. Экстракт пропускают через бумажный фильтр в плоскодонную колбу вместимостью 250 мл. Экстракцию рицида-П повторяют еще два раза тем же количеством растворителя. Объединенный экстракт сушат над безводным сульфатом натрия (примерно 20 г), а затем порциями фильтруют в грушевидную колбу на 100 мл. Концентрируют раствор с помощью ротационного вакуумного испарителя до объема около 1 - 2 мл. Сульфат натрия и стенки колбы несколько раз обмывают ацетоном (общий объем 5 мл), полученный раствор также переносят в грушевидную колбу. Из последней порции фильтрата растворитель удаляют полностью. К сухому остатку пипеткой добавляют 5 мл гексана. Колбу закрывают пробкой на шлифе и ее стенки тщательно обмывают растворителем. В хроматограф вводят 2 мкл полученного раствора.

Условия хроматографирования представлены в таблице 42.

Обработка результатов анализа. Количественное определение проводят методом соотношения со стандартом по высоте пиков. Содержание рицида-П в анализируемой пробе (X, мг/кг или мг/л) вычисляют по формуле:

Если при введении в хроматограф получаются слишком большие пики или происходит "зашкаливание", в подготовленную пробу пипеткой вносят известное количество гексана и анализируют более разбавленные растворы.

Требования безопасности. Соблюдают правила безопасности, установленные для работы с легковоспламеняющимися жидкостями и ФОП.