"Методические указания по определению гидразида малеиновой кислоты в табаке колориметрическим методом"
(утв. Минздравом СССР 12.04.1985 N 3251-85)

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Госагропрома СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

Гидразид малеиновой кислоты (ГМК, малеингидразид, МН-30, МГ, регулокс) - 3-Оксипиридазон-6 - белое кристаллическое вещество.

Молекулярная масса - 112,03.

Температура плавления - 296 - 298 °С.

Растворимость в воде при 25 °С - 0,6%, в диметилформамиде - 2,4%, растворимость в 1 л воды: натриевой соли - 200 г, калиевой соли - 400 г, диэтиламиновой соли - 700 г.

В СССР МДУ в табаке - 8,0 мг/кг.

В зависимости от концентрации применяется для борьбы с заразихой и для пасынкования табака. Выпускается в виде натриевой, калиевой и диэтиламиновой соли ГМК.

2.1.1. Принцип метода

Методика основана на измерении оптической плотности продукта взаимодействия сернокислого гидразина с п-диметиламинобензальдегидом при длине волны 455 нм после восстановления малеинового гидразида до янтарного гидразида, который затем гидролизуется, отгонки освобожденного гидразина в раствор серной кислоты, очистки дистиллята активированным углем и концентрирования.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

Метод характеризуется среднеквадратичной ошибкой определения 3,18 - 5,14 мкг (Р = 0,95; n = 24).

Минимально определяемое количество ГМК с вероятностью Р = 0,95 равно 3,48 мкг.

Диметиламинобензальдегид-пара (п-ДМАБА), ТУ 6-09-3272-77, 1,5-процентный раствор в 1 Н серной кислоте. Реактив устойчив в течение месяца при хранении в темноте, в противном случае его необходимо готовить ежедневно.

Предварительно п-ДМАБА очищают по следующей схеме: 20 г п-ДМАБА растворяют в 150 мл этанола, добавляют 4 г активированного угля, перемешивают в течение 5 мин. и фильтруют под вакуумом через воронку Бюхнера. К фильтрату постепенно при перемешивании добавляют 200 мл холодной (0 °С) дистиллированной воды и выпавшие белые кристаллы отфильтровывают под вакуумом, промывают 50 мл холодной воды и сушат в вакуум-эксикаторе над концентрированной серной кислотой. Хранят реактив в темной склянке в защищенном от света месте.

Железо двухлористое, х.ч., ГОСТ 4149-74.

Цинк металлический, х.ч., ГОСТ 989-72.

Натр едкий, х.ч., ГОСТ 4328-77, 50-процентный раствор.

Активированный уголь марки ОУ-А. Уголь предварительно очищают следующим образом: к 200 г активированного угля приливают 1 л водного раствора соляной кислоты (1:9), смесь нагревают до кипения и фильтруют под вакуумом через бумажный фильтр. Уголь на фильтре промывают дистиллированной водой до нейтральной реакции по индикаторной бумаге и сушат в сушильном шкафу при 110 °С в течение 5 часов при перемешивании.

Кристаллический гидразид малеиновой кислоты.

Для приготовления стандартных растворов ГМК в мерной колбе на 500 мл растворяют 100 мг ГМК в 50 мл воды, содержащей 0,4 г едкого натра. Раствор доводят до метки дистиллированной водой. В мерные колбы на 200 мл отбирают по 10, 20, 30, 40 мл этого раствора и доводят до метки водой. Эти растворы содержат соответственно 10, 20, 30, 40 мкг ГМК в 1 мл раствора.

Соляная кислота, х.ч., ГОСТ 7118-77.

Серная кислота, х.ч., ГОСТ 4204-77, 1 Н раствор.

Этиловый спирт ректификат, ТУ 6-09-1710-77.

Ацетон, х.ч., ТУ 6-09-3513-75.

Универсальная индикаторная бумага, ТУ 6-09-1181-71.

Калий азотнокислый, ч., ГОСТ 4217-77.

Натрий азотнокислый, ч., ГОСТ 4432-77.

Натрий азотистокислый, ч., ГОСТ 4398-77.

Солевая баня приготавливается из 7% нитрата натрия, 40% нитрита натрия, 53% нитрата калия (температура плавления 142 °С).

Спектрофотометр СФ-16 или другой марки, позволяющий проводить измерения в видимой области спектра.

Установка для перегонки с водяным паром.

Колбы плоскодонные на 250, 500, 2000 мл, ГОСТ 10394-72.

Стаканы химические на 250 мл, ГОСТ 10394-72.

Термометр ртутный на 200 °С, ГОСТ 16590-71.

Мензурки на 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Цилиндр мерный на 100, 250, 1000 мл, ГОСТ 1770-74.

Колбы мерные на 25, 50, 100, 200 и 500 мл, ГОСТ 1770-74.

Пипетки на 10 мл, 1 мл, ГОСТ 20292-74.

Колба Бунзена, ГОСТ 6514-75.

Воронка Бюхнера, ГОСТ 9147-73.

Воронки химические диам. 35, 75 мм, ГОСТ 8613-75.

Электроплитки ПЭК-800/3, ТУ 92-208-74.

Колбы длинногорлые круглодонные со шлифом на 500 мл, ГОСТ 10394-72.

Насадка склянки для промывания газов СН2-50, ГОСТ 10378-73.

Ротационный вакуум-испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Фильтры бумажные с синей полосой, ТУ 6-60-1678-77.

Колбы круглодонные со шлифом на 100 мл, ГОСТ 10394-72.

Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.

2.4.1. Построение калибровочного графика

2.4.2. Отбор, хранение и доставка пробы

Отбор и хранение проб табака производят в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб...", утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР А.И. Заиченко за N 2051-79 от 21 августа 1979 г.

2.5.1. 1 г исследуемого образца помещают в дистилляционную колбу установки для перегонки с водяным паром, добавляют 50 мл раствора щелочи и погружают колбу в солевую баню, нагретую до 165 °С. Содержимое колбы кипятят в течение 10 - 15 мин., охлаждают 5 мин., добавляют 0,5 г хлорида железа, 15 г цинковой стружки и присоединяют колбу к установке для перегонки с водяным паром. Отгонку ведут при температуре солевой бани 175 °С. Приемником служит мензурка, содержащая 4 мл 1 Н серной кислоты. Подачу пара регулируют так, чтобы за 20 минут в приемнике собралось 100 мл дистиллята. К полученному дистилляту добавляют 2 г активированного угля, перемешивают одну минуту и фильтруют через складчатый фильтр. Осадок на фильтре промывают водой (5 - 10 мл), выпаривают фильтрат на ротационном вакуум-испарителе или электроплитке до 6 мл. Охлажденный концентрат количественно переносят в 25 мл мерную колбу, добавляют 6 мл раствора п-ДМАБА, доводят водой до метки, тщательно перемешивают и оставляют в темноте на 20 мин. Экстинцию раствора измеряют на спектрофотометре при 455 нм по отношению к раствору, содержащему 6 мл раствора п-ДМАБА, разбавленного водой до 25 мл. Количество ГМК определяют по калибровочному графику.

Содержание остаточных количеств ГМК в анализируемой пробе вычисляют как среднее из трех параллельных определений.

Результаты анализа рассчитывают по формуле:

где:

Х - содержание остаточных количеств ГМК в пробе, мг/кг;

а - количество ГМК, определенное по калибровочному графику, мкг;

Н - навеска табака или вес сгоревшего табака, г;

В - влажность табака, %.

Необходимо соблюдать правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсическими веществами.

Необходимо регулярно проверять дистилляционные колбы, так как из-за использования концентрированного раствора щелочи срок их использования ограничен.

Каждый раз после окончания дистилляции необходимо выливать содержимое колбы с остатками цинковой стружки в отдельный резервуар, а колбу промыть трижды 30-процентным раствором азотной кислоты для полного удаления каустических и цинковых остатков, а затем трижды - водой.

4. Методические указания разработаны:

Пискловым В.П., Пережогиной Т.А., Тумасьян Г.И. - Всесоюзный научно-исследовательский институт табака и махорки им. А.И. Микояна (ВИТИМ), г. Краснодар.