Описание
Источник публикации
"Методы определения микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде. Справочник", том 1. М., ВО "Колос", 1992
Примечание к документу
Документ включен в
Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (
Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
Название документа
"Методические указания по определению фурадана в растениях, почве и воде методом тонкослойной хроматографии"
(утв. Минздравом СССР 30.03.1981 N 2369-81)
"Методические указания по определению фурадана в растениях, почве и воде методом тонкослойной хроматографии"
(утв. Минздравом СССР 30.03.1981 N 2369-81)
Утверждены
Минздравом СССР
30 марта 1981 г. N 2369-81
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ФУРАДАНА В РАСТЕНИЯХ, ПОЧВЕ И ВОДЕ
МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
--------------------------------
<*> Разработаны Л.И. Бублик, Н.В. Федоренко (УкрНИИЗР).
Краткая характеристика препарата. Фурадан - O-(2,3-дигидро-2,2-диметил-
7-бензофуранил)-N-метилкарбамат. Брутто-формула C H O N. Молекулярная
12 15 3
масса 221,26. Общепринятое название - карбофуран. Кристаллическое вещество,
т. пл. 153 - 154 °C, т. пл. технического препарата 150 - 152 °C. Давление
паров 0,0027 Па при 33 °C и 0,015 Па при 50 °C. Растворимость при 25 °C,
г/100 мл: в воде - 0,7, ацетоне - 15, хлористом метилене - 12, этаноле -
4, петролейном эфире - 1. В кислотах и щелочах разлагается при кипячении, в
спиртовых растворах щелочей - при комнатной температуре. Для крыс ЛД
50
через рот 8 - 14 мг/кг.
Продукты метаболизма фурадана - O-(2,3-дигидро-2,2-диметил-3-гидрокси-
7-бензофуранил)-N-метилкарбамат (II), ЛД 18 мг/кг; 2,3-дигидро-2,2-
50
диметил-3-кето-7-бензофуранил-N-метилкарбамат (III), ЛД 69 мг/кг;
50
2,3-дигидро-2,2-диметил-7-бензофуранол (IV), ЛД 2200 мг/кг;
50
2,3-дигидро-2,2-диметил-3,7-бензофурандиол (V), ЛД 1350 мг/кг;
50
2,3-дигидро-2,2-диметил-3-оксо-7-бензофуранол (VI), ЛД 295 мг/кг.
50
Фурадан - акарицид, нематоцид, системный инсектицид. ДСД 0,01 мг/кг. Остаточные количества фурадана в сахарной свекле не допускаются.
Принцип метода. Метод основан на извлечении фурадана и его метаболитов из исследуемой пробы хлороформом или подкисленной водой, очистке путем перераспределения в двух несмешивающихся растворителях и определении методом ТСХ. Проявление основано на гидролизе препаратов спиртовым раствором щелочи и образовании окрашенных соединений с солями диазония.
Метрологическая характеристика метода. Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 96.
Таблица 96
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА
???????????????????????????????????????????????????????????????????????????
? Анализируемая ? Предел ?Срднее ? Стандартное ? Доверительный ?
? проба ?обнаружения,?значение ? отклонение, ? интервал при ?
? ? мг/кг ?опреде- ? % ?p = 0,95, n = 5, ?
? ? или мг/л ?ления ? ? % ?
? ??????????????????????????????????????????????????????????
? ? а ? б ? а ? б ? а ? б ? а ? б ?
???????????????????????????????????????????????????????????????????????????
?Вода ?0,002 ?0,02 ?82,5?80,9?+/- 9,3?+/- 6,5?+/- 14,8?+/- 10,3?
?Почва (чернозем)?0,010 ?0,10 ?85,6?82,4?+/- 3,8?+/- 4,9?+/- 6,0 ?+/- 7,8 ?
?Озимая пшеница ?0,050 ?0,30 ?92,0?91,5?+/- 3,7?+/- 3,4?+/- 5,8 ?+/- 4,1 ?
?(зеленая масса) ? ? ? ? ? ? ? ? ?
?Яблоки ?0,040 ?0,08 ?83,5?84,9?+/- 4,7?+/- 5,8?+/- 7,5 ?+/- 9,2 ?
?Картофель ?0,050 ?0,10 ?79,0?79,5?+/- 2,8?+/- 4,1?+/- 4,5 ?+/- 6,5 ?
?(клубни) ? ? ? ? ? ? ? ? ?
?Сахарная свекла ?0,050 ?0,10 ?81,8?82,5?+/- 4,9?+/- 5,2?+/- 7,6 ?+/- 8,3 ?
?(корнеплоды) ? ? ? ? ? ? ? ? ?
???????????????????????????????????????????????????????????????????????????
Примечание. а - на пластинке "Силуфол"; б - на пластинке КСК.
Избирательность метода. Метод специфичен. Севин и другие пестициды не мешают определению.
Реактивы и растворы. Ацетон х.ч. н-Гексан ч. Этиловый спирт ректиф., 96-процентный. Хлороформ х.ч. Хлороводородная кислота, 0,25 н и 0,1 н растворы. Вода дистиллированная. Сульфат натрия безводный ч.д.а. Едкое кали х.ч. п-Нитроанилин ч.д.а. Нитрит натрия х.ч. Соли диазония: прочный синий Б, прочный красный Б, прочный голубой Б (бис-диазотированный о-дианизидин). Фурадан и его метаболиты (II, III, IV, V, VI) - 99%. Силикагель КСК N 2,5. Гипс медицинский. Пластинки "Силуфол" размером 15 x 15 см. Бумага фильтровальная.
Приготовление стандартных растворов: 0,025 г фурадана растворяют в 25 мл ацетона; 10 мл полученного раствора переносят в мерную колбу на 100 мл и ацетоном доводят до метки. Аналогично готовят стандартные растворы метаболитов, содержащих 100 мкг в 1 мл. Хранят растворы в темных склянках с притертыми пробками в холодильнике.
Проявляющие реагенты: 15-процентный KOH в спиртово-водном растворе
(15 г KOH растворяют в 60 мл этанола и 40 мл воды); 0,01-процентный раствор
соли диазония в ацетоне (0,01 г соли диазония растворяют в 100 мл ацетона).
Хранят в темной склянке 3 сут.; 0,1-процентный раствор паранитроанилина в
0,1 н хлороводородной кислоте (0,1 г паранитроанилина растворяют в 100 мл
0,1 н раствора хлороводородной кислоты); 4-процентный водный раствор
нитрита натрия (4 г NaNO растворяют в 100 мл дистиллированной воды).
2
Приборы и посуда. Весы аналитические и технические. Аппарат для встряхивания. Вакуумный насос. Хроматоскоп. Электроплитка. Водяная баня. Колбы мерные на 100 мл; плоскодонные на 250 мл; круглодонные на 250 мл. Мерные цилиндры на 50 и 100 мл. Микропипетки на 0,1 мл. Воронки делительные на 100 и 500 мл. Эксикатор. Камера для хроматографирования. Пульверизаторы стеклянные. Пластинки "Силуфол".
Ход анализа. Экстракция. Пробу воды (200 мл) помещают в делительную воронку. Экстрагируют фурадан и его метаболиты дважды хлороформом порциями по 50 мл, встряхивают каждый раз по 5 мин. Хлороформный экстракт сливают через фильтр с 15 г безводного сульфата натрия в отгоночную колбу. Отгоняют хлороформ на водяной бане при температуре воды в ней 80 °C до объема 0,1 - 0,2 мл.
Навеску 50 г воздушно-сухой почвы растирают в фарфоровой ступке, переносят в коническую колбу и заливают 200 мл дистиллированной воды, подкисленной до pH 3. Встряхивают 20 мин. Экстракт отфильтровывают через бумажный фильтр в делительную воронку. Затем проводят реэкстракцию хлороформом. Далее поступают так, как описано выше.
Пробу образца озимой пшеницы (20 г) измельчают, помещают в коническую колбу и заливают 400 мл дистиллированной воды, подкисленной хлороводородной кислотой до pH 3. Встряхивают 20 мин. Затем экстракт отфильтровывают в делительную воронку. Проводят реэкстракцию фурадана и его метаболитов дважды хлороформом по 100 мл, как описано выше. Экстрагируемые примеси не мешают определению.
Пробу измельченного образца (50 г) яблок, картофеля (клубни), сахарной свеклы (корнеплоды) переносят в коническую колбу и заливают 100 мл хлороформа, экстрагируют при встряхивании 20 мин. Полученный экстракт переносят в колбу через воронку с бумажным фильтром и 15 г безводного сульфата натрия. Отгоняют хлороформ на водяной бане или на ротационном испарителе и остаток сушат досуха (оставляют колбу открытой при комнатной температуре). Сухой остаток растворяют в 100 мл дистиллированной воды, переносят в делительную воронку и проводят реэкстракцию 2 раза по 30 мл хлороформа. Дальнейшие операции проводят, как описано выше.
Хроматографирование. После отгонки хлороформный остаток (0,1 - 0,2 мл) капилляром наносят в центр пластинки с тонким слоем адсорбента на расстоянии 1,5 см от нижнего края. Слева и справа микрошприцем или микропипеткой наносят стандартные растворы фурадана и его метаболитов с содержанием 0,5 - 30 мкг. Одинаковые объемы (0,005 - 0,05 мл) фурадана и его метаболитов наносят в одну точку. Затем пластинку помещают в хроматографическую камеру с подвижной фазой, которой служит смесь н-гексан-ацетон (3:2). Когда растворитель поднимется на высоту 10 см, пластинку вынимают и сушат на воздухе.
Проявление пластинок. Пластинки опрыскивают проявляющим реагентом N 1,
подсушивают и затем опрыскивают проявляющим реагентом N 2 или смесью
проявляющих реагентов N 3 и N 4 в соотношении 10:1. В таблице 97
представлены R на пластинках "Силуфол" и с КСК для I - VI и окраска пятен.
f
Таблица 97
ВЕЛИЧИНА R И ЦВЕТ ПЯТЕН ОПРЕДЕЛЯЕМЫХ СОЕДИНЕНИЙ
f
???????????????????????????????????????????????????????????????????????????
?Соединение?Проявляющий реагент? Цвет пятен ?"Силуфол"? КСК ?
???????????????????????????????????????????????????????????????????????????
?I ?Прочный голубой Б ?Желтый ?0,63 ?0,70 ?
?II ?То же ?Розовый ?0,38 ?0,40 ?
?III ? -"- ?Сиреневый ?0,49 ?0,55 ?
?IV ? -"- ?Желтый ?0,78 ?0,85 ?
?V ? -"- ?Красный ?0,44 ?0,45 ?
?VI ? -"- ?Фиолетовый ?0,59 ?0,60 ?
?I ?Прочный синий Б ?Желтый ?0,63 ?0,70 ?
?II ?То же ?Розовый ?0,38 ?0,40 ?
?III ? -"- ?Сиреневый ?0,49 ?0,55 ?
?IV ? -"- ?Оранжевый ?0,78 ?0,85 ?
?V ? -"- ?Кирпично-красный ?0,44 ?0,45 ?
?VI ? -"- ?Фиолетовый ?0,59 ?0,60 ?
?I - VI ?Прочный красный Б ?Ярко-малиновый разных ? ? ?
? ? ?оттенков ? ? ?
?I - VI ?n-Нитроанилин ?Бордо ? ? ?
???????????????????????????????????????????????????????????????????????????
Обработка результатов анализа. Содержание фурадана и его метаболитов определяют, сравнивая площади и интенсивность окраски пятен стандартов и проб, или по площади пятен по формуле:
S - A
2 1
A = A - ------- (S - S),
2 S - S 2
2 1
где:
A - количество препарата, мкг;
S - площадь пятна определяемого вещества, кв. мм;
A , A , S , S - количества препарата и площади пятен (кв. мм)
1 2 1 2
стандартных растворов с явно большим и явно меньшим содержанием вещества по
сравнению с анализируемой пробой.
Количество фурадана и его метаболитов в пробе рассчитывают по формуле:
A = A + A + A + A + A + A .
мкг I II III IV V VI
Содержание фурадана (X, мг/кг или мг/л) рассчитывают по формуле:
A
X = -,
P
где:
P - масса анализируемой пробы, г.
Требования безопасности. Необходимо выполнять все требования безопасности работы с токсичными веществами, кислотами и щелочами.
