"МУК 4.1.1552-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по измерению концентрации метилового эфира эстрона в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"
(утв. Минздравом России 29.06.2003)

Методические указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии "Научные основы гигиены труда и профпатологии". Утверждены Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко в июне 2003 г.

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 37) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Методика контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработана и подготовлена в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования".

Методика выполнена с использованием современных методов исследования, метрологически аттестована и дает возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны" и ГН 2.2.5.687-98 "Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны".

Структурная формула не приводится.

М. м. 284,40.

Метиловый эфир эстрона (3-метокси-1,3,5-эстратриен-17-она) - производное эстрона, активного эстрогенного гормона, используется в синтезе анаболических препаратов феноболина и силаболина. Белый с желтоватым оттенком мелкокристаллический порошок с температурой плавления 167 - 171 °C. В воде нерастворим, растворим в хлористом метилене, метаноле, изопропаноле.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Метиловый эфир эстрона - малотоксичное вещество при внутрижелудочном введении. Не обладает раздражающим действием на кожу и слизистые, легко проникает через неповрежденные кожные покровы, оказывая системное влияние на организм. У женщин эстрогены вызывают циклические изменения эпителия влагалища и эндометрия, что приводит к кровотечению, у мужчин - угнетают сперматогенез, вызывают признаки феминизации.

ОБУВ в воздухе - 0,0001 мг/куб. м.

Определение основано на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с УФ-детектированием.

Отбор проб проводится с концентрированием на фильтры АФА-ХА-20 или АФА-ХП-20.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 0,003 мкг.

Нижний предел измерения в воздухе - 0,00005 мг/куб. м (при отборе 1480 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций от 0,00005 до 0,001 мг/куб. м.

Измерению не мешает диметилсульфат изопропанола.

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 18,5%.

Время выполнения измерения - 1 час 40 мин., включая отбор проб.

Хроматограф с УФ-детектором для жидкостной хроматографии.

Колонка из нержавеющей стали длиной 0,25 м, шириной 8,2 мм.

Аспирационное устройство с расходомером, модель 822, ТУ 64-1-862-72.

Весы лабораторные аналитические, ГОСТ 24104-88Е.

Разновесы Г-22210, 1 класс, ГОСТ 7328-75.

Мерные колбы вместимостью 25, 50 и 100 мл, ГОСТ 1770-74Е.

Пипетки на 1, 5 и 10 мл, ГОСТ 29227-91.

Ротационный испаритель типа ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.

Аппарат Сокслета, ГОСТ 28165-89.

Фильтры АФА-ХА-20 или АФА-ХП-20, ОСТ 95-743-80.

Метиловый эфир эстрона - порошок.

Спирт метиловый, хч, ГОСТ 6295-75, абсолютизированный по стандартным методикам.

Силикагель "для хроматографии" фирмы "Zorbak" с размером частиц 4,0 - 5,0 мкм, диаметром пор 6 - 60 нм, устойчивый в водных растворах в интервале pH I - II.

Стандартный раствор N 1 с концентрацией 100 мкг/мл метилового эфира эстрона готовят растворением навески вещества 0,0100 г в 100 мл метанола. Градуировочные растворы с концентрацией 0,15-0,30-1,0-2,0-3,0 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 метиловым спиртом. Растворы устойчивы в течение 25 дней.

Воздух с объемным расходом 100 л/мин. аспирируют через два фильтра типа АФА-ХА или АФА-ХП. Для определения 1/2 ОБУВ следует отобрать 1480 л воздуха. Отобранные пробы можно хранить на протяжении 15 суток.

Прибор выводят на рабочий режим в соответствии с инструкцией, прилагаемой к жидкостному хроматографу. Стандартную хроматографическую колонку, заполненную силикагелем "для хроматографии", промывают в течение 10 - 15 мин. метиловым спиртом до получения стабильной нулевой линии.

При построении градуировочного графика в хроматограф последовательно вводят по 20 мкл градуировочных растворов метилового эфира эстрона, что соответствует 0,003-0,006-0,02-0,04-0,06 мкг препарата. На полученной хроматограмме обсчитывают с помощью ЭВМ "SP-4100" площади хроматографических пиков в мВ/мин. и строят градуировочную зависимость их величины (ось ординат) от концентрации вещества в мкг/мл (ось абсцисс).

Условия хроматографирования градуировочных растворов и анализируемых проб:

Колонка длиной 0,25 м, диаметром 8,2 мм.

Насадка для колонки - силикагель "для хроматографии" с размером частиц 4,0 - 5,0 мкм, диаметром пор 6 - 60 нм.

Температура колонки - 50 °C.

Объем вводимой пробы - 20 мкл.

Элюент - метанол - подается со скоростью 0,7 мл/мин.

Детектор - ультрафиолетовый, длина волны 280 нм.

Чувствительность определения - 0,4 Д на всю шкалу.

Время удерживания вещества - 16 мин. 10 с.

Фильтр с отобранной пробой помещают в аппарат Сокслета, заливают 10 мл метанола и экстрагируют в течение 7 мин. Экстракцию повторяют дважды. Степень извлечения составляет 98,9%. Объединенные экстракты упаривают в ротационном испарителе при 70 °C. Сухой остаток растворяют в 0,5 мл метанола и вводят в хроматограф через инжекторное устройство, снабженное дозирующей петлей объемом 20 мкл. Количественное определение вещества (в мкг/мл) проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Концентрацию метилового эфира эстрона в воздухе "C" (мг/куб. м) вычисляют по формуле:

где:

a - концентрация метилового эфира эстрона в анализируемом объеме, найденная по градуировочному графику, мкг/мл;

B - объем раствора пробы, мл;

V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).

Приведение объема воздуха к стандартным условиям проводят по следующей формуле: