"МУК 4.1.1553-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по измерению концентрации монофосфорного эфира 4-метил-5-бета-оксиэтил-N-(2'-метил-4'-амино-5'-метилпиримидил)-тиазолия монофосфата (фосфотиамина) в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"
(утв. Минздравом России 29.06.2003)

Методические указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии "Научные основы гигиены труда и профпатологии". Утверждены Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко в июне 2003 г.

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 37) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Методика контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработана и подготовлена в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования".

Методика выполнена с использованием современных методов исследования, метрологически аттестована и дает возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны" и ГН 2.2.5.687-98 "Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны".

Структурная формула не приводится.

М. м. 442,4.

Фосфотиамин - монофосфорный эфир 4-метил-5-бета-оксиэтил-N-(2-метил-4-амино-5-метилпиримидил)-тиазолия фосфат - белый кристаллический порошок со слабым запахом. Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 95% и хлороформе.

В воздухе находится в виде аэрозоля и паров.

Обладает общетоксическим действием.

ОБУВ в воздухе - 0,1 мг/куб. м.

Методика основана на применении высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием УФ-детектора.

Отбор проб производится с концентрированием на фильтр и в метанол.

Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме (10 мкл) - 0,025 мкг.

Нижний предел измерения в воздухе - 0,05 мг/куб. м (при отборе 10 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций вещества в воздухе от 0,05 до 0,6 мг/куб. м.

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 20%.

Время выполнения измерения, включая отбор проб, - 1,5 часа.

Микроколоночный жидкостный хроматограф "Милихром" или другой модели с УФ-детектором.

Весы аналитические ВЛР-200, ГОСТ 24104-88Е.

Аспирационное устройство, ГОСТ 17.2.6.01-86.

Стаканы химические вместимостью 25 мл, ГОСТ 25336-82.

Вакуумная установка или роторный испаритель ИР-1, ТУ 25-11-917-76.

Колбы мерные вместимостью 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74Е.

Пипетки вместимостью 1, 2, 5, 10 мл, ГОСТ 29227-91.

Колбы грушевидные вместимостью 25 мл, ГОСТ 19908-90.

Пробирки мерные вместимостью 10 мл, ГОСТ 1770-74Е.

Поглотительные сосуды с пористой пластинкой, ТУ 25-11-1136-75.

Воронка фильтрующая.

Лупа измерительная ЛИ-3-10Х, ГОСТ 8309-75.

Фосфотиамин с содержанием не менее 90%, ФС 42-2331-85, Россия.

Спирт метиловый, ГОСТ 6995-77, 50% раствор.

Кислота о-фосфорная, ГОСТ 6552-80.

Элюент: к 100 мл 50% спирта метилового добавляют около 0,2 мл о-фосфорной кислоты до pH 2,4.

Стандартный раствор N 1 с концентрацией 1000 мкг/мл фосфотиамина готовят растворением 0,1100 г вещества в спирте метиловом 50% в мерной колбе вместимостью 100 мл.

Раствор устойчив в течение 2 недель при хранении в холодильнике.

Стандартный раствор N 2 с концентрацией 100,0 мкг/мл фосфотиамина готовят из стандартного раствора N 1 соответствующим разбавлением спиртом метиловым 50% в мерной колбе вместимостью 50 мл.

Градуировочные растворы с концентрацией 2,5-5-10-15-20-30 мкг/мл фосфотиамина готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 2 спиртом метиловым 50%.

Растворы применяют свежеприготовленными.

Фильтры АФА-ХА-10, ТУ 85-743-80.

Воздух с объемным расходом 1 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ХА-10 и поглотительный сосуд с 5 мл 50% метанола. Отбор проб производят с охлаждением. Для измерения 0,5 ОБУВ следует отобрать 10 л воздуха. Срок хранения отобранных проб - одни сутки в холодильнике.

Инжектируют в хроматограф от 0,025 до 0,3 мкг фосфотиамина из градуировочных растворов при максимальном объеме вводимой пробы 10 мкл.

Хроматографическая колонка промышленного изготовления.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят градуировочную кривую, выражающую зависимость площади пиков (кв. мм) от содержания вещества в хроматографируемом объеме пробы (мкг).

Построение градуировочного графика необходимо проводить не менее чем по 5 точкам, выполняя 6 параллельных измерений для каждого раствора. Проверку градуировочного графика следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Фильтр и содержимое поглотительного сосуда помещают в колориметрическую пробирку и доводят объем до 5 мл 50% метанола. Оставляют на 10 - 15 мин., периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр отжимают и удаляют. Степень десорбции с фильтра - 96%. Полученный раствор сливают в грушевидную колбу и упаривают досуха под вакуумом при температуре 50 - 60 °C. Сухой остаток растворяют в 0,2 мл спирта метилового 50%, подкисленного кислотой о-фосфорной до pH 2,4.

Параллельно с анализом проб проводят хроматографирование раствора, полученного обработкой чистого фильтра.

Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях, что и при построении градуировочного графика.

Количественное определение фосфотиамина (мкг) проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Концентрацию фосфотиамина в воздухе "C" (мг/куб. м) вычисляют по формуле:

где:

a - содержание вещества в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

B - общий объем раствора пробы, мл;

б - объем раствора пробы, взятый для хроматографирования, мл;

V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).

Приведение объема воздуха к стандартным условиям проводят по следующей формуле: