"МУК 4.1.910-99. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по измерению концентраций 2-карбокси-4,5-диметоксифенилмочевины методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны"
(утв. Минздравом России 30.12.1999)

Методические указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии "Научные основы гигиены труда и профпатологии". Утверждены Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко в декабре 1999 г.

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 36) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Данная методика контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработана и подготовлена в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования".

Методика выполнена с использованием современных методов исследования, метрологически аттестована и дает возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны" и ГН 2.2.5.687-98 "Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны".

2-карбокси-4,5-диметоксифенилмочевина - твердое вещество белого цвета, Т. пл. - 163 °С. Вещество слабо растворимо в воде, растворимо в ацетоне, бензоле, метаноле.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Обладает общетоксическим действием.

ОБУВ в воздухе - 3 мг/куб. м.

Методика основана на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии со спектрофотометрическим детектированием.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 0,06 мкг.

Нижний предел измерения в воздухе - 1,5 мг/куб. м (при отборе 20 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций 2-карбокси-4,5-диметоксифенилмочевины в воздухе от 1,5 мг/куб. м до 25 мг/куб. м.

Определению вещества не мешает присутствие сульфат-п-циклогексилмочевины.

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 19,3%.

Время выполнения измерения, включая отбор проб, 30 минут.

Жидкостной хроматограф НРР-5001 с насосом высокого давления <...>.

Хроматографическая колонка 150 х 3,3 мм.

Весы лабораторные ВЛР-200 аналитические.

Аспирационное устройство.

Микрошприцы МШ-10, ТУ 2-833-106.

Колбы мерные вместимостью 25, 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Пипетки вместимостью 1, 2, 5 мл, ГОСТ 20292-74.

Мерные цилиндры вместимостью 100 мл, ГОСТ 1730-84.

Пробирки колориметрические с притертыми пробками вместимостью 10 мл, ГОСТ 1770-74.

Фильтродержатель.

2-карбокси-4,5-диметоксифенилмочевина 94%, ч.

Метанол для жидкостной хроматографии, ОСЧ ТУ 6-09-2192-85.

Вода бидистиллят, перегнанная с перманганатом калия.

Фильтры АФА-ХП-20.

Подвижная фаза - смесь метанола и воды в объемном соотношении 7:3.

Стандартный раствор N 1 с концентрацией 2-карбокси-4,5-диметоксифенилмочевины 1 мг/мл готовят растворением 25 мг вещества в смеси метанол:вода (7:3) в мерной колбе вместимостью 25 мл. Раствор устойчив в течение 1 месяца.

Градуировочные растворы с концентрацией 2-карбокси-4,5-диметоксифенилмочевины 6,0; 12,0; 25,0; 50,0; 100,0 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 смесью метанол:вода (7:3).

Растворы устойчивы в течение 48 часов.

Воздух с объемным расходом 2 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ХП-20, помещенный в фильтродержатель.

Для определения 1/2 ОБУВ вещества необходимо отобрать 20 л воздуха.

Срок хранения отобранных проб - 2 дня.

Подготовку хроматографа к работе проводят согласно инструкции. Готовят подвижную фазу, смешивая 70 мл метанола и 30 мл воды. Насос хроматографа заполняют подвижной фазой. Готовят колонку к работе, пропуская через нее подвижную фазу в объеме 70 мл с рабочей скоростью 0,5 мл/мин.

Для построения градуировочного графика по 10 мкл градуированных растворов с концентрациями 2-карбокси-4,5-диметоксифенилмочевины 6,0; 12,0; 25,0; 50,0; 100,0 мкг/мл вводят микрошприцем в колонку хроматографа, что соответствует 0,06; 0,12; 0,25; <...>; 1,0 мкг 2-карбокси-4,5-диметоксифенилмочевины.

С помощью интегрального компьютера или линейки и измерительной лупы на записанной хроматограмме измеряют площадь пика вещества. Для каждого градуировочного раствора делают не менее 5-ти измерений.

Затем строят градуировочный график зависимости площади пика (в кв. мм) от содержания 2-карбокси-4,5-диметоксифенилмочевины (в мкг).

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

Фильтр с отобранной пробой переносят в мерную пробирку с притертой пробкой, заливают 5 мл смеси метанола и воды (7:3) и оставляют на 10 минут, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества.

Степень десорбции вещества с фильтра - 97%.

Аликвота пробы объемом 10 мкл вводится с помощью микрошприца в колонку хроматографа.

Концентрацию 2-карбокси-4,5-диметоксифенилмочевины в мг/куб. м (С) рассчитывают по формуле:

где:

а - содержание 2-карбокси-4,5-диметоксифенилмочевины, найденное по градуировочному графику, мкг;

в - общий объем раствора пробы, мл;

с - объем раствора пробы, взятой для анализа;

V - объем воздуха, л, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям (см. Приложение 1).

Приведение объема воздуха к условиям по ГОСТ 12.1.016-79 (температура 20 °С, давление 760 мм рт. ст.) проводят по следующей формуле: