"МУК 4.1.923-99. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по измерению концентраций прегнадиен-1,4-триол-11бета,17-альфа,21-диона-3,20 (преднизолона) в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"
(утв. Минздравом России 30.12.1999)

Методические указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии "Научные основы гигиены труда и профпатологии". Утверждены Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко в декабре 1999 г.

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 36) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Данная методика контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработана и подготовлена в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования".

Методика выполнена с использованием современных методов исследования, метрологически аттестована и дает возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны" и ГН 2.2.5.687-98 "Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны".

Структурная формула (не приводится).

М. м. 360,45.

Преднизолон - белый или белый со слабым желтоватым оттенком кристаллический порошок без запаха с температурой разложения <...> - 232 °С. Практически не растворим в воде, трудно растворим в ацетоне, диоксане, мало растворим в хлороформе, растворим в метиловом и 95% этиловом спиртах.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Обладает общетоксическим действием.

ПДК в воздухе - 0,01 мг/куб. м.

Методика основана на применении высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием УФ-детектора.

Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме (10 мкл) - 0,025 мкг.

Нижний предел измерения в воздухе - 0,005 мг/куб. м (при отборе 500 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций вещества в воздухе от 0,005 до 0,12 мг/куб. м.

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 20%.

Время выполнения измерения, включая отбор проб, 1,5 час.

Микроколоночный жидкостной хроматограф Милихром или другой модели с УФ-детектором.

Хроматографическая колонка промышленного изготовления длиной 64 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная сорбентом Силасорб С600.

Весы аналитические ВЛР-200, ГОСТ 24104-80.

Аспирационное устройство, модель 822, ТУ 64-1-862-72.

Фильтродержатель, снабженный металлической сеткой.

Стаканы химические вместимостью 25 мл, ГОСТ 23932-79.

Вакуумная установка.

Колбы мерные вместимостью 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Пипетки вместимостью 1, 2, 5, 10 мл, ГОСТ 20292-74.

Колбы грушевидные вместимостью 25 мл, ГОСТ 23932-79Е.

Пробирки мерные вместимостью 10 мл, ГОСТ 1770-74Е.

Вакуумная установка.

Воронка фильтрующая.

Лупа измерительная ЛИ-3-10Х, ГОСТ 8309-75.

Преднизолон, ФС 42-2780-91.

Спирт этиловый абсолютный, ТУ 84-1203-89.

Спирт метиловый, ГОСТ 6995-77.

Элюент: спирт метиловый.

Стандартный раствор N 1 с концентрацией 500 мкг/мл преднизолона готовят растворением 0,050 г вещества в спирте этиловом абсолютном в мерной колбе вместимостью 100 мл.

Раствор устойчив в течение 2 недель при хранении в холодильнике.

Стандартный раствор N 2 с концентрацией 20,0 мкг/мл преднизолона готовят соответствующим разбавлением спиртом этиловым абсолютным стандартного раствора N 1.

Градуировочные растворы с концентрацией 0,5-1-2-4-8-12 мкг/мл преднизолона готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 2 спиртом этиловым абсолютным.

Растворы применяют свежеприготовленными.

Фильтры АФА-ВП-10, ТУ 85-743-80.

Воздух с объемным расходом 20 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ВП-10, укрепленный в фильтродержатель с металлической сеткой. Для измерения 0,5 ПДК следует отобрать 500 л воздуха. Срок хранения проб - месяц в холодильнике.

Хроматографическая колонка промышленного изготовления.

5 мл градуировочных растворов, что соответствует 2,5-5-10-20-40-60 мкг преднизолона, переносят в грушевидную колбу и упаривают досуха под вакуумом при температуре 50 - 60 °С. Сухой остаток растворяют в 1 мл подвижной фазы и хроматографируют.

При построении градуировочного графика инжектируют в хроматограф от 0,025 до 0,6 мкг преднизолона из градуировочных растворов при объеме вводимой пробы 10 мкл.

На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят градуировочную кривую, выражающую зависимость площади пиков (мм) от содержания вещества в хроматографируемом объеме пробы (мкг).

Построение градуировочного графика необходимо проводить не менее чем по 5 точкам, выполняя 6 параллельных измерений для каждого раствора. Проверку градуировочного графика следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

Фильтр с отобранной пробой помещают в химический стакан, добавляют 5 мл спирта этилового абсолютного и оставляют на 10 - 15 мин., периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр отжимают и удаляют. Степень десорбции фильтра - 96%. Полученный раствор сливают в грушевидную колбу и упаривают досуха под вакуумом при температуре 50 - 60 °С. Сухой остаток растворяют в 1 мл спирта метилового.

Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях, что и при построении градуировочного графика.

Количественное определение преднизолона проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Концентрацию преднизолона в воздухе "С" (мг/куб. м) вычисляют по формуле:

где:

а - содержание вещества в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

в - общий объем раствора пробы, мл;

б - объем раствора пробы, взятый для хроматографирования, мл;

V - объем пробы воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).

Приведение объема воздуха к условиям по ГОСТ 12.1.016-79 (температура 20 °С, давление 760 мм рт. ст.) проводят по следующей формуле: