"МУК 4.1.859-99. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по измерению концентрации тестостерона пропионата в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"
(утв. Минздравом России 31.12.1999)

Методические указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии "Научные основы гигиены труда и профпатологии". Утверждены Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко в декабре 1999 г.

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 35) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Методические указания разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования".

Методики выполнены с использованием современных методов исследования, метрологически аттестованы и дают возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны" и ГН 2.2.5.687-98 "Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны".

(Структурная формула не приводится)

Тестостерона пропионат (андростен-4-ол-17-бета-она-3-пропионат) - химико-фармацевтический препарат. Белый кристаллический порошок с температурой плавления 118 - 123 °С. Практически не растворим в воде, легко растворяется в хлороформе, спирте, эфире и в растительных маслах.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Тестостерона пропионат проявляет выраженное кожно-резорбтивное действие. Относится к 1 классу "вещества чрезвычайно опасные".

ПДК в воздухе - 0,005 мг/куб. м.

Метод основан на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.

Отбор проб проводится на фильтры АФА-ХА или АФА-ХП.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 0,004 мкг.

Предел измерения в воздухе - 0,0025 мг/куб. м (при отборе 80 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций от 0,0025 до 0,05 мг/куб. м.

Измерению не мешает этилацетат.

Суммарная погрешность не превышает +/- 16,0%.

Время выполнения измерения, включая отбор проб, 1 час 40 мин.

Хроматограф с УФ-детектором для жидкостной хроматографии.

Колонка из нержавеющей стали длиной 0,25 м, диаметром 8,2 мм.

Аспирационное устройство.

Стеклянная мерная посуда, ГОСТ 1770-74Е, 23932-79Е.

Весы лабораторные аналитические, ГОСТ 2401-80.

Разновесы Г-22210, 1 класс, ГОСТ 7328-75.

Тестостерона пропионат.

Спирт метиловый, х.ч., ГОСТ 6295-75.

Силикагель для хроматографии (4,0 - 5,0 мкм), диаметр пор 6 - 60 нм.

Насадка: силикагель для хроматографии с размером частиц 4,0 - 5,0 мкм, диаметром пор 6 - 60 нм.

Стандартный раствор N 1, содержащий 100 мкг/мл тестостерона пропионата, готовят растворением навески вещества 0,0100 г в 100 мл метанола.

Градуировочные растворы, содержащие 0,2-0,4-1,0-3,0-5,0 мкг/мл, готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 метиловым спиртом. Растворы устойчивы в течение 25 дней.

Воздух с объемным расходом 5 л/мин. аспирируют через фильтры АФА-ХА или АФА-ХП. Для измерения 1/2 ПДК вещества следует отобрать 80 л воздуха. Пробы устойчивы в течение недели.

Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки по площадям пиков, обсчитываемых с помощью ЭВМ "SP-4100".

Для построения калибровочного графика в хроматограф вводят последовательно по 20 мкл (дозирующая петля) градуировочных растворов, что соответственно равно 0,004-0,008-0,010-0,06-0,10 мкг тестостерона пропионата. Строят градуировочный график, выражающий зависимость площади пика на хроматограмме(кв. мм) от количества определяемого компонента (мкг). Построение градуировочного графика необходимо проводить по шести точкам, проводя 5 параллельных определений для каждой концентрации.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

Колонка длиной 0,25 м, диаметром 8,2 мм.

Насадка для колонки - силикагель "для хроматографирования" с размером частиц 4,0 - 5,0 мкм, диаметром пор 6 - 60 нм.

Температура колонки - 50 °С.

Элюент - метанол - подается со скоростью 0,7 мл/мин.

Детектор - ультрафиолетовый, длина волны 280 нм.

Скорость диаграммной ленты - 6 см/час.

Объем вводимой пробы - 20 мкл.

Время удерживания вещества - 15 мин. 44 с.

Фильтр с отобранной пробой помещают в аппарат Сокслетта, заливают 10 мл метанола и экстрагируют в течение 7 мин. Экстракцию повторяют еще дважды. Степень извлечения составляет 98,9%. Объединенные экстракты упаривают на ротационном испарителе при 70 °С. Сухой остаток растворяют в 1,0 мл метанола. Отбирают с помощью шприца 0,5 мл пробы и вводят в хроматограф через инжекторное устройство, снабженное дозирующей петлей объемом 20 мкл. На полученной хроматограмме измеряют площадь пика и по градуировочному графику находят количество вещества в анализируемом объеме пробы (в мкг).

Концентрацию тестостерона пропионата "С" в воздухе в мг/куб. м вычисляют по формуле:

где:

а - содержание вещества, найденное в анализируемом объеме раствора по калибровочному графику, мкг;

в - общий объем пробы, мл;

б - объем пробы, взятый для анализа, мл;

V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и давление 760 мм рт. ст.) проводят по формуле: