"Р 50.2.064-2009. Рекомендации по метрологии. Государственная система обеспечения единства измерений. Спектрофотометры для медицинских лабораторий. Методика поверки"
(утв. и введены в действие Приказом Ростехрегулирования от 15.12.2009 N 1048-ст)

Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. N 184-ФЗ "О техническом регулировании", а правила применения национальных стандартов Российской Федерации - ГОСТ Р 1.0-2004 "Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения"

1 РАЗРАБОТАНЫ Федеральным государственным унитарным предприятием "Всероссийский научно-исследовательский институт оптико-физических измерений" (ФГУП "ВНИИОФИ") Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

2 ВНЕСЕНЫ Управлением метрологии Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

3 УТВЕРЖДЕНЫ И ВВЕДЕНЫ в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 15 декабря 2009 г. N 1048-ст

4 Настоящие рекомендации по метрологии разработаны с учетом основных нормативных положений международных рекомендаций МОЗМ Р 135 "Спектрофотометры для медицинских лабораторий"

5 ВВЕДЕНЫ ВПЕРВЫЕ

Настоящие рекомендации распространяются на спектрофотометры для измерений оптической плотности, используемые в клинических лабораториях для определения концентрации составляющих в образцах крови, сыворотки, плазмы, мочи фотометрическим методом и устанавливают методику их первичной и периодической поверок.

Примечание - При невозможности поверки какого-либо спектрофотометра в соответствии с настоящими рекомендациями его поверку проводят по методике поверки, приведенной в руководстве по эксплуатации на конкретный спектрофотометр.

Рекомендуемый межповерочный интервал - 1 год.

В настоящих рекомендациях использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ Р 50267.0-92 (МЭК 601-1-88) Изделия медицинские электрические. Часть 1. Общие требования безопасности

ГОСТ 8.395-80 Государственная система обеспечения единства измерений. Нормальные условия измерений при поверке. Общие требования

ГОСТ 8.557-2007 Государственная система обеспечения единства измерений. Государственная поверочная схема для средств измерений спектральных, интегральных и редуцированных коэффициентов направленного пропускания в диапазоне длин волн 0,2 - 50,0 мкм, диффузного и зеркального отражений в диапазоне длин волн 0,2 - 20,0 мкм

ГОСТ 8.588-2006 Государственная система обеспечения единства измерений. Государственная поверочная схема для средств измерений оптической плотности материалов

Примечание - При пользовании настоящими рекомендациями целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте национального органа Российской Федерации по стандартизации в сети Интернет или по ежегодно издаваемому информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный документ заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) документом. Если ссылочный документ отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяют в части, не затрагивающей эту ссылку.

В настоящих рекомендациях применены следующие термины с соответствующими определениями:

3.1 поверка средств измерений: Установление органом государственной метрологической службы (или другим официально уполномоченным органом, организацией) пригодности средства измерений к применению на основании экспериментально определяемых метрологических характеристик и подтверждение их соответствия установленным обязательным требованиям по [1].

3.2 диапазон измерений: Область значений измеряемой величины, в пределах которой нормированы пределы допускаемых погрешностей измерений этой величины спектрофотометром по [1].

3.3 погрешность результата измерений: Отклонение результата измерения от истинного (действительного) значения измеряемой величины по [1].

3.4 абсолютная погрешность измерений: Погрешность измерения, выраженная в единицах измеряемой величины по [1].

3.5 случайная погрешность измерений: Составляющая погрешности результата измерения, изменяющаяся случайным образом (по значению и знаку) при повторных измерениях, проведенных с одинаковой тщательностью, одной и той же физической величины по [1].

UV - ультрафиолетовый диапазон;

VIS - видимый диапазон.

При проведении поверки выполняют следующие операции:

5.1 При проведении поверки должны быть использованы средства измерений, указанные в таблице 1.

5.2 Средства измерений должны иметь свидетельство о поверке.

5.3 Допускается применение средств измерений других типов, обеспечивающих заданные метрологические характеристики.

К проведению поверки допускают лиц, прошедших специальную подготовку по техническому и метрологическому обслуживанию спектрофотометров и аттестованных в соответствии с [2].

При поверке необходимо соблюдать требования безопасности по ГОСТ Р 50267.0.

При поверке соблюдают следующие условия по ГОСТ 8.395:

температура окружающего воздуха (20 +/- 5) °C;

относительная влажность не более 80%;

атмосферное давление от 84 до 106 кПа.

Перед проведением поверки спектрофотометр и средства поверки подготавливают к работе в соответствии с руководством по эксплуатации их.

10.1.1 При внешнем осмотре спектрофотометра устанавливают:

- отсутствие видимых повреждений, влияющих на его работоспособность;

- наличие маркировки с указанием типа и серийного номера спектрофотометра, а также знака утверждения типа;

- наличие комплектности спектрофотометра в соответствии с требованиями технической документации производителя (изготовителя).

10.1.2 Спектрофотометр, не удовлетворяющий требованиям 10.1.1, к поверке не допускают.

10.2.1 Опробование спектрофотометра проводят в соответствии с руководством по эксплуатации на него.

10.2.2 Спектрофотометр, не удовлетворяющий требованиям 10.2.1, к поверке не допускают.

Спектральный диапазон спектрофотометра создают интерференционные фильтры, входящие в его состав, или дифракционные решетки, которые обеспечивают воспроизведение минимального спектрального диапазона спектрофотометра от 340 до 800 нм.

Проверку спектрального диапазона измерений спектрофотометра совмещают с определениями погрешности измерений спектрального коэффициента направленного пропускания (оптическую плотность) (10.5).

Проверку диапазона измерений коэффициента пропускания (оптической плотности) совмещают с определениями погрешности измерений спектрального коэффициента направленного пропускания (10.5). Минимальный диапазон измерений оптической плотности должен быть от 0 до 2 Б.

10.5.1 Погрешность измерений спектрального коэффициента направленного пропускания (оптической плотности) определяют с помощью поверочного комплекта светофильтров в соответствии с требованиями ГОСТ 8.557 и ГОСТ 8.588 на рабочих длинах волн спектрофотометра, значения которых указаны в руководстве по эксплуатации его.

10.5.2 Устанавливают каждый светофильтр в измерительную ячейку спектрофотометра и измеряют коэффициент направленного пропускания (оптической плотности) светофильтра на рабочих длинах волн, начиная с наименьшей длины волны.

Измерения проводят не менее чем на трех рабочих длинах волн, в начале, середине и конце диапазона значений оптической плотности светофильтров.

10.5.3 Среднее значение коэффициента направленного пропускания, % (оптической плотности, Б) для каждого светофильтра рассчитывают по формуле

где A_i - измеренное значение коэффициента направленного пропускания, % (оптической плотности, Б);

n - число измерений, равное 15.

10.5.4 Значение абсолютной случайной составляющей погрешности S (СКО) измерения коэффициента направленного пропускания, % (оптической плотности, Б) рассчитывают по формуле

10.5.5 Спектрофотометр признают прошедшим поверку, если выполняются неравенства

где k = 2,95 при доверительной вероятности p = 0,95 и n = 15;

A_ref - значение коэффициента направленного пропускания (оптической плотности) светофильтра, приведенное в свидетельстве о поверке;

e - погрешность определения коэффициента направленного пропускания (оптической плотности) светофильтра, значение которой приведено в свидетельстве на него.

При этом верхний предел для измеренного значения оптической плотности каждого светофильтра должен быть, Б - 0,03 A_ref + 0,01, а нижний - 0,03 A_ref - 0,01.

10.6.1 Погрешность при установке длины волны определяют с использованием ртутной лампы (ламп), эмиссионный пик (пики) которой является референтным. Если в спектрофотометре невозможна установка лампы, то используют референтные фильтры с известными линиями поглощения, например гольмиевый. Спектр поглощения должен быть измерен с шагом <= 0,1 нм. Выбирают три различных пика для тестирования во всем диапазоне длин волн. Длину волны каждого из выбранных пиков измеряют на спектрофотометре n раз.

10.6.2 Среднее значение по результатам измерений длины волны для каждого пика рассчитывают по формуле

где - измеренное значение длины волны, нм;

n - число измерений, равное 15.

10.6.3 Значение абсолютной случайной составляющей погрешности S (СКО) измерения длины волны рассчитывают по формуле

10.6.4 Спектрофотометр признают прошедшим поверку, если выполняются неравенства

где k = 2,95 при доверительной вероятности p = 0,95 и n = 15;

- значение длины волны светофильтра, приведенное в свидетельстве о поверке или эмиссионного пика ртутной лампы.

Значение абсолютной погрешности установки длины волны не должно превышать 1 нм.

Этот способ определения погрешности установки длины волны не может быть точным для спектрофотометров, источником излучения в которых являются лампы с линейным спектром.

В случае использования интерференционных фильтров в спектрофотометре определяют спектральную ширину используемого интерференционного фильтра на половине высоты пика пропускания с помощью спектрометра с высоким разрешением, для чего интерференционный фильтр извлекают из спектрофотометра.

10.7.1 Разрешающую способность определяют с использованием ртутной лампы, эмиссионные пики которой являются референтными. Длину волны выбранной линии измеряют 15 раз и рассчитывают среднее значение , определяют разность между средним и референтным значениями. Разрешающую способность (R) спектрофотометра определяют по формуле

где - значение длины волны референтного пика.

Разрешающая способность спектрофотометра должна быть не менее 200.

Если в спектрофотометре невозможна установка лампы, то используют референтные фильтры с известными линиями поглощения, например в UV и VIS диапазонах жидкий фильтр толуол C₆H₅CH₃ в n-гексане в комбинации с n-гексановым референтным фильтром, имеющим линии поглощения на длинах волн 269 нм и 266 нм. Длину волны каждой линии измеряют 15 раз и рассчитывают среднее значение .

Спектрофотометр признают прошедшим поверку, если разница между средним и референтным значениями .

Разрешающую способность спектрофотометра с интерференционными фильтрами определяют как спектральную ширину на полувысоте максимального уровня пропускания светофильтра.

10.8.1 Уровень рассеянного излучения определяют с помощью двух референтных светофильтров, при использовании которых поглощение светового потока максимально. Спектрофотометр признают прошедшим поверку, если уровень рассеянного излучения 2%.

10.9.1 Стабильность работы спектрофотометра проверяют по 10.5 и 10.6 после 24 часов и 48 часов работы спектрофотометра, используя один референтный фильтр 1 Б, измерения проводят в середине спектрального диапазона. Погрешность при измерении коэффициента направленного пропускания не превышает (0,03A_ref + 0,01) Б (10.5). Погрешность установки длины волны не должна превышать 1 нм (10.6).

11.1 Результаты измерений заносят в протокол, форма которого приведена в приложении А.

11.2 При положительных результатах поверки оформляют свидетельство о поверке установленной формы в соответствии с [3].

11.3 Спектрофотометры, не удовлетворяющие требованиям настоящих рекомендаций к выпуску и эксплуатации не допускают, на них выдают извещение о непригодности с указанием причин в соответствии с [3].

1. Общие данные о поверяемом средстве измерений

Наименование СИ, предприятие-изготовитель, заводской номер;

владелец средства измерений (наименование предприятия, ИНН/КПП)

2. Условия проведения поверки:

температура окружающего воздуха ________ °C

относительная влажность воздуха _________%

атмосферное давление ________ кПа

3. Средства поверки (тип и номер эталонного средства поверки, погрешность), наименование методики поверки, согласованной _________________ в установленном порядке

4. Внешний осмотр _________________________________________________

5. Опробование ____________________________________________________

6. Метрологические характеристики:

- спектральный диапазон ________________ нм

- диапазон измерений коэффициента пропускания (оптической плотности) ________________% (Б)

- погрешность измерений коэффициента пропускания (оптической плотности) ________________%, (Б)

- погрешность при установке длин волн ________________ нм

- разрешающая способность _________________________________________

- уровень рассеянного излучения _____________________________________

7. Результаты поверки:

Метрологические характеристики спектрофотометра соответствуют (не соответствуют) требованиям __________

_____________________________________________________________________

По результатам поверки спектрофотометр признан пригодным (непригодным) к применению в качестве рабочего средства измерений.

Выдано свидетельство о поверке _______________________

Срок очередной поверки "__" _____________ 200____ года.