"Изменение N 1 ГОСТ 34108-2017 "Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Определение содержания микотоксинов прямым твердофазным конкурентным иммуноферментным методом"
(принято Протоколом Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации от 30.06.2021 N 141-П)

--------------------------------

<*> Дата введения в действие на территории Российской Федерации - 2022-01-01.

Содержание. Наименование приложения А дополнить словами: "для тест-системы N 1 и тест-системы N 2".

Раздел 2. ГОСТ 6709 дополнить знаком сноски - <*>;

дополнить сноской <*>:

"--------------------------------

<*> В Российской Федерации действует ГОСТ Р 58144-2018";

ГОСТ 6995. Наименование перед словами "Метанол-яд" дополнить словом: "Реактивы.";

ГОСТ 29169. Дополнить обозначением: "(ИСО 648-77)";

заменить ссылки: "ГОСТ ИСО 5725-1 <**>" на "ГОСТ ИСО 5725-1-2003 <**>"; "ГОСТ ИСО 5725-6 <***>" на "ГОСТ ИСО 5725-6-2003 <***>".

Раздел 4 изложить в новой редакции:

"Сущность метода заключается в извлечении микотоксинов из проб экстрагентом, проведении в ячейках планшета реакции, в результате которой образуются окрашенные комплексы, добавлении останавливающего реактива, измерении значений оптической плотности и вычислении результатов.

Для определения микотоксинов используют один из двух вариантов тест-систем.

Метод с использованием тест-системы N 1 с двумя планшетами предусматривает смешивание конъюгата и экстрактов проб или градуировочных растворов в первом планшете и проведение реакции во втором планшете с нанесенными (иммобилизованными) на поверхность ячеек планшета специфичными антителами (далее - АТ), после инкубации и отмывки носителя от несвязавшихся компонентов вносят субстрат, в результате реакции с которым образуются окрашенные комплексы.

Метод с использованием тест-системы N 2 с одним планшетом предусматривает дозирование экстрактов проб или градуировочных растворов, конъюгата и специфичных АТ в лунки планшета с иммобилизованными неспецифичными АТ. После инкубации и отмывки носителя от несвязавшихся компонентов вносят субстрат, в результате реакции с которым образуются окрашенные комплексы".

Раздел 10. Пункт 10.3. Первый абзац. Исключить слова: ", в состав которой входят:";

дополнить словами (после первого абзаца): "Тест-система N 1 включает:";

примечание. Заменить слова: "с приложением А" на "с А.2 - А.7 (см. приложение А)";

дополнить абзацем и примечанием (после примечания):

"Тест-система N 2 включает:

- планшет разборный с микролунками с иммобилизованными неспецифичными АТ;

- флакон с раствором конъюгата;

- флакон с раствором специфичных АТ;

- флакон с останавливающим раствором;

- флакон с раствором субстрата;

- флакон с разбавителем проб;

- флакон с промывочным раствором;

- градуировочные растворы, содержащие микотоксины разной концентрации для градуировки тест-системы N 2.

Примечание - Допускается вместо градуировочных растворов, входящих в состав тест-системы, использовать градуировочные растворы микотоксинов, приготовленные в соответствии с А.9 - А.14 (см. приложение А) из стандартных образцов:

- раствор афлатоксина B₁ массовой концентрации 3 мкг/см³;

- раствор дезоксиниваленола массовой концентрации 200 мкг/см³;

- раствор зеараленона массовой концентрации 100 мкг/см³;

- раствор охратоксина A массовой концентрации 50 мкг/см³;

- раствор T-2 токсина массовой концентрации 100 мкг/см³;

- раствор фумонизина массовой концентрации 500 мкг/см³";

дополнить примечанием (после последнего абзаца):

"Примечание - Допускается использование тест-систем различных производителей, позволяющих обеспечить необходимую точность результатов определений согласно разделу 15. Применять рекомендованные ими способы подготовки проб и постановки иммуноферментного анализа следует в соответствии с инструкцией изготовителя".

Пункт 10.9 после слов "переменного объема 30 - 300 мм³" дополнить словами: "или шаговая пипетка (далее - степпер) с шагом дозирования 50, 100 мм³".

Пункт 10.23 изложить в новой редакции:

"10.23 Виалы вместимостью 5 - 10 см³ или пробирки типа Эппендорф для разбавления экстрактов".

Раздел 11. Подраздел 11.3. Восьмой абзац после слов "пипеточный дозатор" дополнить словами: "или степпер".

Пункт 11.4.2. Наименование. Исключить слова: "для определения содержания ДОН";

дополнить абзацем (после наименования): "Приготовление промывочного раствора для определения содержания ДОН для тест-системы N 1";

дополнить абзацами (после последнего):

"Приготовление промывочного раствора для определения содержания микотоксинов для тест-системы N 2

В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 100 см³ концентрированного промывочного раствора из комплекта реактивов к тест-системе. Объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают.

Раствор хранят при комнатной температуре не более одной недели или при температуре от 2 °C до 8 °C не более 1 мес".

Пункт 11.4.3. Первый абзац изложить в новой редакции:

"Для построения градуировочной характеристики каждого микотоксина используют входящие в соответствующий набор тест-системы градуировочные растворы различной концентрации: один раствор, не содержащий микотоксин (далее - нулевая точка), и четыре градуировочных раствора различной концентрации микотоксина для тест-системы N 1 или пять градуировочных растворов для тест-системы N 2. Содержание микотоксинов в градуировочных растворах тест-системы N 1 приведено в таблице А.1, тест-системы N 2 - в таблице А.2 (см. приложение А)";

третий абзац изложить в новой редакции:

"Допускается готовить градуировочные растворы из стандартных образцов микотоксинов для тест-системы N 1 в соответствии с А.2 - А.7, для тест-системы N 2 - в соответствии с А.9 - А.14 (см. приложение А)".

Раздел 12. Подраздел 12.1 дополнить абзацем (после наименования):

"Экстрагирование";

первый абзац после слов "(см. таблицу 1)" дополнить словами: "При использовании тест-системы N 2 для определения охратоксина A к пробе добавляют 50 см³ экстрагента";

после слова "Закрывают" дополнить словом: "колбу";

примечания. Примечание 1. Исключить соотношение: "1 : 5";

дополнить примечанием 4:

"4 Допускается вместо фильтрации через бумажный фильтр проводить центрифугирование при 3000 g в течение 5 мин";

таблицу 1 изложить в новой редакции:

дополнить абзацем (после таблицы 1):

"Разбавление экстрактов для тест-системы N 1";

дополнить абзацами (после последнего):

"Далее проводят градуировку и анализ экстрактов проб по 12.2.

Разбавление экстрактов для тест-системы N 2

Фильтраты для определения содержания разбавляют в соответствии с таблицей 1 и далее используют для дальнейшего проведения испытания по 12.2.

Разбавление экстракта для определения содержания афлатоксина B₁, суммы афлатоксинов, охратоксина A, зеараленона разбавителем проб проводят следующим образом: в пробирку типа Эппендорф дозатором помещают 500 мм³ разбавителя проб, вносят 500 мм³ фильтрата, перемешивают.

Фильтрат для определения содержания ДОН, суммы фумонизинов разбавляют экстрагентом в соответствии с таблицей 1 и далее используют для дальнейшего проведения испытания по 12.2.

Разбавление экстракта для определения содержания ДОН проводят следующим образом: в пробирку типа Эппендорф дозатором помещают 400 мм³ разбавителя проб, вносят 100 мм³ фильтрата, перемешивают.

Разбавление экстракта для определения содержания суммы фумонизинов проводят следующим образом: в пробирку типа Эппендорф дозатором помещают 700 мм³ разбавителя проб, вносят 50 мм³ фильтрата, перемешивают".

Подраздел 12.2 дополнить абзацем (после наименования):

"Проведение градуировки и анализа экстрактов проб для тест-системы N 1";

первый абзац после слов "для смешивания реактивов" дополнить словами: "(схема расположения лунок приведена в приложении Б)";

третий абзац. Заменить слова: "В остальные лунки первого планшета" на "Затем";

таблицу 2 изложить в новой редакции:

восьмой, девятый абзацы. После слов "восьмиканальный дозатор" дополнить словами: "или степпер";

дополнить абзацами (после последнего примечания):

"Далее проводят построение и оценку градуировочной характеристики по 12.3.

Проведение градуировки и анализа экстрактов проб для тест-системы N 2

Анализ градуировочных растворов и экстрактов проб проводят одновременно. В рамку планшета помещают необходимое количество бесцветных стрипов с неспецифичными антителами.

Отмеряют необходимое количество раствора конъюгата и специфичных АТ (примерно 70 мм³ на лунку или 560 мм³ на стрип) и помещают в отдельные емкости (или в специальные кюветы при использовании восьмиканального пипеточного дозатора). В лунки планшета вносят по 100 мм³ каждого градуировочного раствора или экстракта пробы (по 50 мм³ для охратоксина и суммы афлатоксинов), используя для каждого раствора новый наконечник, добавляют с помощью степпера 50 мм³ конъюгата, 50 мм³ специфичных АТ.

Примечание - Следует строго соблюдать последовательность внесения реактивов.

Удаляют содержимое микролунок, промывают лунки промывочным раствором (см. таблицу 2). Процедуру промывки планшета рекомендуется проводить с помощью устройства для отмывки планшетов, задавая следующие параметры программы: количество циклов промывки - от трех до четырех, объем заливаемого промывочного раствора - 300 мм³. Допускается ручная промывка с использованием многоканального дозатора. При этом в лунки планшета вносят 4 раза по 300 мм³ промывочного раствора с последующим резким переворачиванием и встряхиванием планшета.

Планшет переворачивают лунками вниз на фильтровальную бумагу и окончательно удаляют из лунок остатки промывочного раствора легким постукиванием.

Отмеряют необходимое количество раствора субстрата из комплекта реактивов к тест-системе (примерно 120 мм³ на лунку или 1 см³ на стрип) и помещают в отдельную емкость. Используя восьмиканальный дозатор или степпер, вносят по 100 мм³ раствора субстрата в каждую лунку. Инкубируют в течение времени, указанного в таблице 2.

Отмеряют необходимое количество останавливающего раствора из комплекта реактивов к тест-системе (примерно 120 мм³ на лунку или 1 см³ на стрип) и помещают в отдельную емкость. Используя восьмиканальный дозатор или степпер, вносят по 100 мм³ останавливающего раствора в каждую лунку. Цвет раствора изменяется с голубого на желтый.

Измеряют оптическую плотность D_i содержимого лунок при длине волны, указанной в таблице 2. Значения оптической плотности записывают с точностью до второго десятичного знака и заносят в форму для записи (см. приложение В).

Примечание - Перед фотометрией нужно избавиться от воздушных пузырьков в лунке, поскольку они могут повлиять на результат анализа".

Подраздел 12.3. Четвертый абзац. Заменить слово: "Вычисляют" на "Для тест-системы N 1 вычисляют";

рисунок 1. Наименование дополнить словами: "для тест-системы N 1";

формулы (3) и (4). Пояснения символов D_i и C_i. Заменить слова: "для i-го раствора" на "для i-го градуировочного раствора";

таблицу 3 изложить в новой редакции:

дополнить абзацами (после таблицы 3):

"Для тест-системы N 2 определяют процент связывания микотоксина для каждого градуировочного раствора относительно нулевой точки по формуле (1). Полученные значения являются координатами точек градуировочной характеристики по оси Y. Значения массовой концентрации (содержание) микотоксина C_i каждого градуировочного раствора являются координатами точек градуировочной характеристики по оси X.

По значениям X_i и Y_i методом наименьших квадратов строят градуировочную характеристику, которая описывается уравнением

где D_гр - измеренное значение оптической плотности для i-го градуировочного раствора;

D₀ - измеренное значение оптической плотности для нулевой точки;

C_i - массовая концентрация (содержание) микотоксина i-го градуировочного раствора, мг/дм³ (мг/кг);

a, b, h, q - коэффициенты градуировочного уравнения.

Примечание - Коэффициенты градуировочного уравнения (5а) вычисляют с применением метода наименьших квадратов. Для поиска решения нелинейной задачи может использоваться, например, метод обобщенного приведенного градиента или симплекс-метод. Для автоматизации расчетов коэффициентов градуировочного уравнения допускается использовать надстройку "Поиск решения" в программе Microsoft Excel.

Пример градуировочной характеристики, описываемой уравнением (5а), представлен на рисунке 2.

Для контроля стабильности градуировочной характеристики используют i-й градуировочный раствор. По градуировочной характеристике вычисляют массовую концентрацию (содержание) микотоксина C_{i, изм}, мг/дм³ (мг/кг), в i-м градуировочном растворе по формуле

где D_i - измеренное значение оптической плотности для раствора с массовой концентрацией (содержанием) микотоксина C_i.

Градуировочную характеристику признают стабильной, если выполняется условие (5)".

Раздел 13. Пункт 13.1. Заменить слова: "13.1 Если концентрация градуировочных растворов" на

Если концентрация градуировочных растворов";

формула (8). Пояснение символа C_пр. Заменить слова: "по формуле (6)" на "по формуле (7) или (8б)";

дополнить подразделом 13.3 и пунктом 13.4:

Если концентрация градуировочных растворов микотоксинов тест-системы пересчитана на массу навески с учетом всех разведений, то содержание микотоксина X₁, мг/кг (млн^-1), в пробе вычисляют по формуле

где D_пр - измеренное значение оптической плотности для экстракта пробы;

D₀ - измеренное значение оптической плотности для нулевой точки;

a, b, h, q - коэффициенты градуировочного уравнения.

13.4 Вычисляют массовую концентрацию микотоксина в экстракте пробы C_пр, мг/дм³, по формуле

где D_пр - измеренное значение оптической плотности для экстракта пробы;

D₀ - измеренное значение оптической плотности для нулевой точки;

a, b, h, q - коэффициенты градуировочного уравнения.

Если массовая концентрация микотоксина в экстракте превышает верхнюю границу диапазона массовых концентраций градуировочных растворов, то допускается дополнительное разбавление экстракта (f₂) таким образом, чтобы концентрация микотоксина соответствовала диапазону массовых концентраций градуировочных растворов.

Содержание микотоксина в пробе X₂, мг/кг (млн^-1), вычисляют по формуле (8).

Обработка результатов может проводиться автоматически с помощью программного обеспечения".

Раздел 14. Второй абзац. Заменить слова: "по формулам (7) или (8)" на "по формуле (6) или (8), или (8а)";

формула (9). Пояснение символа . Заменить слова: "по формуле "(6) или (8)" на "по формуле (6) или (8), или (8а)";

заменить единицу измерения: "%" на "мг/кг (млн^-1)";

таблица 4. Графа "Наименование микотоксина". Заменить наименование: "T-2" на "T-2 токсин".

Раздел 15. Подраздел 15.1. Второй абзац. Заменить ссылку: "ГОСТ ИСО 5725-1 (подраздел 3.14)" на "ГОСТ ИСО 5725-1-2003 (подраздел 3.14)";

формула (10). Пояснение символа . Заменить слова: "по формуле (6) или (8)" на "по формуле (6) или (8), или (8а)";

последний абзац. Заменить ссылку: "ГОСТ ИСО 5725-6 (раздел 5)" на "ГОСТ ИСО 5725-6-2003 (раздел 5)".

Приложение А. Наименование дополнить словами: "для тест-системы N 1 и тест-системы N 2";

пункт А.1. Первый абзац после слов "градуировочной характеристики" дополнить словами: "для тест-системы N 1";

заменить слова: "(см. таблицу 3)" на "(см. таблицу 2)";

дополнить подразделами А.8 - А.14:

"А.8 Для построения градуировочной характеристики для тест-системы N 2 используют разбавляющий раствор (см. таблицу 2) в качестве нулевой точки и пять градуировочных растворов, значения массовой концентрации микотоксинов в которых приведены в таблице А.2. Порядок приготовления градуировочных растворов приведен в А.9 - А.14.

Действительное значение массовой концентрации микотоксина C_iгр, мг/дм³, в i-м градуировочном растворе вычисляют по формуле

где C₀ - действительное значение массовой концентрации микотоксина в растворе, взятом для разбавления, мг/дм³;

V₀ - объем раствора микотоксина, взятый для разбавления, см³;

V_i - объем приготовленного градуировочного раствора, см³.

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 35 см³ метанола, объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем проб.

А.9.2 Приготовление градуировочного раствора афлатоксина B₁ N 5

В мерную колбу вместимостью 100 см³ наливают около 40 см³ разбавителя стандартов (см. А.9.1), вносят 80 мм³ раствора афлатоксина B₁ массовой концентрации 3 мкг/см³. Содержимое колбы перемешивают, объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов и перемешивают.

Значение массовой концентрации афлатоксина B₁ - 0,0024 мг/дм³.

А.9.3 Приготовление градуировочного раствора афлатоксина B₁ N 4

В мерную колбу вместимостью 25 см³ помещают 12,5 см³ градуировочного раствора афлатоксина B₁ N 5 (см. А.9.2), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов (см. А.9.1) и перемешивают.

Значение массовой концентрации афлатоксина B₁ - 0,0012 мг/дм³.

А.9.4 Приготовление градуировочного раствора афлатоксина B₁ N 3

В мерную колбу вместимостью 25 см³ помещают 12,5 см³ градуировочного раствора афлатоксина B₁ N 4 (см. А.9.3), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов (см. А.9.1) и перемешивают.

Значение массовой концентрации афлатоксина B₁ - 0,0006 мг/дм³.

А.9.5 Приготовление градуировочного раствора афлатоксина B₁ N 2

В мерную колбу вместимостью 25 см³ помещают 12,5 см³ градуировочного раствора афлатоксина B₁ N 3 (см. А.9.4), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов (см. А.9.1) и перемешивают.

Значение массовой концентрации афлатоксина B₁ - 0,0003 мг/дм³.

А.9.6 Приготовление градуировочного раствора афлатоксина B₁ N 1

В мерную колбу вместимостью 25 см³ помещают 12,5 см³ градуировочного раствора афлатоксина B₁ N 2 (см. А.9.5), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов (см. А.9.1) и перемешивают.

Значение массовой концентрации афлатоксина B₁ - 0,00015 мг/дм³.

В мерную колбу вместимостью 100 см³ наливают около 40 см³ разбавителя стандартов из набора реактивов для тест-системы N 2, вносят 1 см³ раствора ДОН массовой концентрации 200 мкг/см³. Содержимое колбы перемешивают, объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов и перемешивают.

В мерную колбу вместимостью 25 см³ наливают около 10 см³ разбавителя стандартов, вносят 2,5 см³ основного раствора ДОН (см. А.10.1). Содержимое колбы перемешивают, объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов и перемешивают.

Значение массовой концентрации ДОН - 0,2 мг/дм³.

В мерную колбу вместимостью 25 см³ помещают 10 см³ градуировочного раствора ДОН N 5 (см. А.10.2), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов и перемешивают.

Значение массовой концентрации ДОН - 0,08 мг/дм³.

В мерную колбу вместимостью 25 см³ помещают 12,5 см³ градуировочного раствора ДОН N 4 (см. А.10.3), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов и перемешивают.

Значение массовой концентрации ДОН - 0,04 мг/дм³.

В мерную колбу вместимостью 25 см³ помещают 12,5 см³ градуировочного раствора ДОН N 3 (см. А.10.4), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов и перемешивают.

Значение массовой концентрации ДОН - 0,02 мг/дм³.

В мерную колбу вместимостью 25 см³ помещают 10 см³ градуировочного раствора ДОН N 2 (см. А.10.5), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов и перемешивают.

Значение массовой концентрации ДОН - 0,008 мг/дм³.

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 35 см³ метанола, объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем проб.

В мерную колбу вместимостью 100 см³ наливают около 40 см³ разбавителя стандартов (см. А.11.1), вносят 1 см³ раствора зеараленона массовой концентрации 100 мг/см³. Содержимое колбы перемешивают, объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов и перемешивают.

В мерную колбу вместимостью 100 см³ наливают около 40 см³ разбавителя стандартов (см. А.11.1) вносят 5 см³ основного раствора зеараленона (см. А.11.2). Содержимое колбы перемешивают, объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов и перемешивают.

Значение массовой концентрации зеараленона - 0,05 мг/дм³.

В мерную колбу вместимостью 25 см³ помещают 10 см³ градуировочного раствора зеараленона N 5 (см. А.11.3), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов (см. А.11.1) и перемешивают.

Значение массовой концентрации зеараленона - 0,02 мг/дм³.

В мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 3,75 см³ градуировочного раствора зеараленона N 4 (см. А.11.4), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов (см. А.11.1) и перемешивают.

Значение массовой концентрации зеараленона - 0,0075 мг/дм³.

В мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 3,33 см³ градуировочного раствора зеараленона N 3 (см. А.11.5), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов (см. А.11.1) и перемешивают.

Значение массовой концентрации зеараленона - 0,0025 мг/дм³.

В мерную колбу вместимостью 25 см³ помещают 10 см³ градуировочного раствора зеараленона N 2 (см. А.11.6), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов (см. А.11.1) и перемешивают.

Значение массовой концентрации зеараленона - 0,001 мг/дм³.

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 35 см³ метанола, объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой.

В мерную колбу вместимостью 100 см³ наливают около 40 см³ разбавителя стандартов (см. А.12.1), вносят 1 см³ раствора охратоксина A массовой концентрации 50 мкг/см³. Содержимое колбы перемешивают, объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов и перемешивают.

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают около 40 см³ разбавителя стандартов (см. А.12.1), вносят 2 см³ основного раствора охратоксина A (см. А.12.2). Содержимое колбы перемешивают, объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов и перемешивают.

Значение массовой концентрации охратоксина A - 0,01 мг/дм³.

В мерную колбу вместимостью 25 см³ помещают 10 см³ градуировочного раствора охратоксина A N 5 (см. А.12.3), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов (см. А.12.1) и перемешивают.

Значение массовой концентрации охратоксина A - 0,004 мг/дм³.

В мерную колбу вместимостью 25 см³ помещают 12,5 см³ градуировочного раствора охратоксина A N 4 (см. А.12.4), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов (см. А.12.1) и перемешивают.

Значение массовой концентрации охратоксина A - 0,002 мг/дм³.

В мерную колбу вместимостью 25 см³ помещают 10 см³ градуировочного раствора охратоксина A N 3 (см. А.12.5), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов (см. А.12.1) и перемешивают.

Значение массовой концентрации охратоксина A - 0,001 мг/дм³.

В мерную колбу вместимостью 25 см³ помещают 10 см³ градуировочного раствора охратоксина A N 2 (см. А.12.6), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов (см. А.12.1) и перемешивают.

Значение массовой концентрации охратоксина A - 0,0004 мг/дм³.

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 5 см³ метанола, объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем проб.

А.13.2 Приготовление основного раствора фумонизина B₁ массовой концентрации 0,5 мг/дм³

В мерную колбу вместимостью 100 см³ наливают около 40 см³ разбавителя стандартов (см. А.13.1), вносят 1 см³ раствора фумонизина B₁ массовой концентрации 50 мкг/см³. Содержимое колбы перемешивают, объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов и перемешивают.

А.13.3 Приготовление градуировочного раствора фумонизина B₁ N 5

В мерную колбу вместимостью 100 см³ наливают около 40 см³ разбавителя стандартов (см. А.13.1), вносят 13,34 см³ основного раствора фумонизина B₁ (см. А.13.2). Содержимое колбы перемешивают, объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов и перемешивают.

Значение массовой концентрации фумонизина B₁ - 0,0667 мг/дм³.

А.13.4 Приготовление градуировочного раствора фумонизина B₁ N 4

В мерную колбу вместимостью 100 см³ вносят около 30 см³ градуировочного раствора фумонизина B₁ N 5 (см. А.13.3), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов (см. А.13.1) и перемешивают.

Значение массовой концентрации фумонизина B₁ - 0,02 мг/дм³.

А.13.5 Приготовление градуировочного раствора фумонизина B₁ N 3

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 33,3 см³ градуировочного раствора фумонизина B₁ N 4 (см. А.13.4), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов (см. А.13.1) и перемешивают.

Значение массовой концентрации фумонизина B₁ - 0,0067 мг/дм³.

А.13.6 Приготовление градуировочного раствора фумонизина B₁ N 2

В мерную колбу вместимостью 100 см³ вносят около 30 см³ градуировочного раствора фумонизина B₁ N 3 (см. А.13.5), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов (см. А.13.1) и перемешивают.

Значение массовой концентрации фумонизина B₁ - 0,002 мг/дм³.

А.13.7 Приготовление градуировочного раствора фумонизина B₁ N 1

В мерную колбу вместимостью 100 см³ вносят около 30 см³ градуировочного раствора фумонизина B₁ N 2 (см. А.13.6), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов (см. А.13.1) и перемешивают.

Значение массовой концентрации фумонизина B₁ - 0,00067 мг/дм³.

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 10 см³ метанола, объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем проб.

В мерную колбу вместимостью 100 см³ наливают около 40 см³ разбавителя стандартов (см. А.14.1), вносят 1 см³ раствора T-2 токсина массовой концентрации 100 мкг/см³. Содержимое колбы перемешивают, объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов и перемешивают.

В мерную колбу вместимостью 100 см³ наливают около 10 см³ разбавителя стандартов (см. А.14.1), вносят 5 см³ основного раствора T-2 токсина (см. А.14.2). Содержимое колбы перемешивают, объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов и перемешивают.

Значение массовой концентрации T-2 токсина - 0,05 мг/дм³.

В мерную колбу вместимостью 25 см³ вносят 12,5 см³ градуировочного раствора T-2 токсина N 5 (см. А.14.3), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов и перемешивают.

Значение массовой концентрации T-2 токсина - 0,025 мг/дм³.

В мерную колбу вместимостью 25 см³ вносят 10 см³ градуировочного раствора T-2 токсина N 4 (см. А.14.4), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов и перемешивают.

Значение массовой концентрации T-2 токсина - 0,01 мг/дм³.

В мерную колбу вместимостью 100 см³ вносят 25 см³ градуировочного раствора T-2 токсина N 3 (см. А.14.5), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов и перемешивают.

Значение массовой концентрации T-2 токсина - 0,0025 мг/дм³.

В мерную колбу вместимостью 100 см³ вносят 20 см³ градуировочного раствора T-2 токсина N 2 (см. А.14.6), объем раствора в колбе доводят до метки разбавителем стандартов и перемешивают.

Значение массовой концентрации T-2 токсина - 0,0005 мг/дм³".