"Изменение N 2 ГОСТ Р 51600-2000 "Молоко. Методы определения наличия антибиотиков"
(утв. и введено в действие Приказом Ростехрегулирования от 23.01.2008 N 1-ст)

Утверждено и введено в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 23.01.2008 N 1-ст.

Раздел 1. Заменить слова: "иммуноферментный" на "рецепторные".

Раздел 2 дополнить ссылкой: "ГОСТ 29169-91 (ИСО 648-77) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной отметкой".

Подпункт 4.2.1 после слова "Термостат" дополнить словами: "или блок термостатируемых ячеек".

Пункт 4.2 дополнить подпунктами - 4.2.10, 4.2.11:

"4.2.10. Тестовый набор - комплект, включающий герметично укупоренные пробирки, собранные в блоки, и содержащие споры Bac. stearothermophilus var. calidolactis, помещенные в агар с питательными веществами и индикатором бромкрезолпурпуром; пипетки мерные вместимостью 0,1 см3 одноразового использования и цветовую шкалу [3].

4.2.11. Пипетки вместимостью 0,1 см3 для отбора образцов молока для исследования по ГОСТ 29169".

Подпункты 4.4.2, 4.4.4 изложить в новой редакции:

"4.4.2. Осторожно, не повреждая упаковки, отрезают от блока необходимое число ампул или пробирок (с учетом контрольной пробы) и маркируют. Оставшиеся ампулы или пробирки хранят в холодильнике при температуре (6 +/- 2) °C.

4.4.4. Подготовка к анализу ампул или пробирок - по 4.2.9 или 4.2.10.

Осторожно, не повреждая упаковки, отрезают от блока необходимое число ампул или пробирок (с учетом контрольной пробы) и маркируют. Оставшиеся ампулы или пробирки хранят в холодильнике при температуре (6 +/- 2) °C".

Пункт 4.5 изложить в новой редакции:

"4.5. Проведение анализа

4.5.1. Проведение анализа с использованием ампул , или 

4.5.1.1. Соединительной частью шприца прокалывают укупорку ампул по 4.2.3 или 4.2.9.

4.5.1.2. В каждую открытую ампулу по 4.2.3 пинцетом помещают по одной таблетке питательной среды , взятой из колпачка бутылочки по 4.4.3. Затем бутылочку плотно закрывают колпачком и хранят при температуре (20 +/- 2) °C.

4.5.1.3. Шприцем-дозатором отбирают 0,1 см3 анализируемого молока и вносят в каждую ампулу по 4.5.1.2 или 4.2.9. Для каждой пробы анализируемого молока используют новый наконечник. Оставшееся молоко сохраняют до конца анализа в холодильнике при температуре (6 +/- 2) °C.

4.5.1.4. Ампулы помещают в термостат и выдерживают при температуре (64,0 +/- 0,5) °C в течение 3 ч.

4.5.2. Проведение анализа с использованием тестового набора 

4.5.2.1. Одноразовой мерной пипеткой отбирают 0,1 см3 анализируемого молока и вносят в пробирку с приоткрытой фольгой по 4.2.10. Оставшееся молоко сохраняют до конца анализа в холодильнике при температуре (6 +/- 2) °C.

4.5.2.2. Пробирки с анализируемым молоком закрывают фольгой и помещают в блок термостатируемых ячеек и выдерживают при температуре (64,5 +/- 0,5) °C в течение 3 ч.

4.5.2.3. Контрольное определение проводят в соответствии с 4.5.1, 4.5.2. В ампулу или пробирку вносят 0,1 см3 предварительно восстановленного по ГОСТ 23454 препарата СКИВ".

Подпункт 4.6.1 изложить в новой редакции:

"4.6.1. Ампулы или пробирки извлекают из термостата или блока термостатируемых ячеек и определяют цвет содержимого".

Подпункты 4.6.2, 4.6.3 после слова "ампул" дополнить словами: "или пробирок".

Подпункт 4.7.1 и таблицу 2 изложить в новой редакции:

"4.7.1. Наименьшие пределы определения антибиотиков представлены в таблице 2.

Стандарт после таблицы 2 дополнить наименованием раздела 5: "5. Рецепторные методы".

Раздел 5. Заменить номера пунктов и подпунктов: 5 на 5.1; 5.1 на 5.1.1; 5.2 на 5.1.2; 5.2.1 на 5.1.2.1; 5.2.2 на 5.1.2.2; 5.2.3 на 5.1.2.3; 5.2.4 на 5.1.2.4; 5.3 на 5.1.3; 5.3.1 на 5.1.3.1; 5.4 на 5.1.4; 5.4.1 на 5.1.4.1; 5.4.2 на 5.1.4.2; 5.5 на 5.1.5; 5.5.1 на 5.1.5.1; 5.5.2 на 5.1.5.2; 5.5.3 на 5.1.5.3; 5.5.4 на 5.1.5.4; 5.5.5 на 5.1.5.5; 5.5.6 на 5.1.5.6; 5.6 на 5.1.6; 5.6.1 на 5.1.6.1; 5.6.2 на 5.1.6.2; 5.6.3 на 5.1.6.3.

Пункт 5.1 Заменить слово: "Метод" на "Рецепторный метод".

Подпункт 5.1.1. Заменить слова: "иммобилизованными специфическими антителами" на "специфическими белковыми рецепторами".

Подпункт 5.1.4.2. Заменить слова: "в пробирке по 5.2.4" на "в пробирке по 5.1.2.4".

Подпункт 5.1.5.1. Заменить слова: "пипетку по 5.2.4" на "пипетку по 5.1.2.4".

Раздел 5 дополнить пунктом - 5.2:

"5.2. Рецепторный метод с коллоидным золотом

5.2.1. Сущность метода

5.2.1.1. Метод основан на проведении реакции комплексообразования антибиотиков бета-лактамного типа со специфическими белковыми рецепторами, меченными коллоидным золотом, и последующем визуальном выявлении оставшихся свободными меченых рецепторов путем хроматографии на полосках хроматографической бумаги, содержащих в виде соответствующих линий реакционную и контрольную зоны.

5.2.2. Аппаратура, материалы и реактивы

5.2.2.1. Термостат или блок термостатируемых ячеек, позволяющий поддерживать температуру (47,5 +/- 0,5) °C.

5.2.2.2. Холодильник бытовой по ГОСТ 16317.

5.2.2.3. Часы механические с сигнальным устройством по ГОСТ 3145.

5.2.2.4. Тест-набор [4], включающий флаконы со специфическими рецепторами, меченными коллоидным золотом; полоски хроматографической бумаги с зоной исследуемого молока и контрольной зоной; шприц-дозатор вместимостью 0,2 см3 с наконечниками.

5.2.3. Отбор проб

Отбор проб - по ГОСТ 9225. Пробы хранят в холодильнике в течение 24 ч при температуре (6 +/- 2) °C.

5.2.4. Подготовка к анализу

5.2.4.1. Термостат или блок термостатируемых ячеек нагревают до температуры (47,5 +/- 0,5) °C и выдерживают при этой температуре не менее 5 мин.

5.2.4.2. Флакон встряхивают для осаждения содержимого в нем на дно.

5.2.5. Проведение анализа

5.2.5.1. Шприцем-дозатором с наконечником отбирают 0,2 см3 анализируемого молока и переливают во флакон по 5.2.4.2. Флакон закрывают крышкой и встряхивают до полного растворения сухих веществ без образования пены.

5.2.5.2. Помещают флакон в термостат или блок термостатируемых ячеек по 5.2.2.1.

5.2.5.3. Не менее чем через 3 мин термостатирования во флакон, находящийся в термостате или в блоке термостатируемых ячеек, помещают входящую в комплект полоску хроматографической бумаги.

5.2.5.4. Хроматографирование проводят в течение 2 мин. Затем полоску хроматографической бумаги извлекают из флакона.

5.2.6. Обработка результатов

5.2.6.1. Сравнивают интенсивность цвета окрашенных в красный цвет зон, появляющихся после проведения процедуры по 5.2.5.4 в виде линий на полосках хроматографической бумаги.

5.2.6.2. Зона на верхней части полоски является контрольной. Если ее окрашивания не произошло после выполнения требований по 5.2.5.3, 5.2.5.4, то повторяют все процедуры в соответствии с 5.2.

5.2.6.3. Зона исследуемого молока расположена под контрольной зоной. Большая или равная интенсивность цвета контрольной зоны, а также отсутствие окраски зоны образца является признаком наличия антибиотиков бета-лактамного типа в молоке.

5.2.6.4. Меньшая интенсивность цвета контрольной зоны, по сравнению с интенсивностью цвета зоны под ней, является признаком отсутствия антибиотиков.

5.2.6.5. Контрольное определение проводят в соответствии с 5.1 и 5.2. В ампулу или пробирку вносят 0,1 см3 предварительно восстановленного по ГОСТ 23454 препарата СКИВ".

Пункт 5.7. Заменить номер пункта: 5.7 на 5.3.

Пункт 5.3 изложить в новой редакции:

"5.3. Метрологические характеристики

Наименьшие пределы определения антибиотиков бета-лактамного типа представлены в таблице 3.

Приложение А. Библиографию дополнить позициями - [3], [4]:

"[3] Тестовый набор Дания, CHR HANSEN. Российское представительство: Россия, 105318 Москва, ул. Щербаковская, 53, корп. 17, 3 этаж, ООО "Хр. Хансен".

[4] Тест-набор Дания, CHR HANSEN. Российское представительство: Россия, 105318 Москва, ул. Щербаковская, 53, корп. 17, 3 этаж, ООО "Хр. Хансен".

Библиографические данные. Ключевые слова после слов "антибиотики бета-лактамного типа" дополнить словами: "сульфаниламидные препараты".