"Методические указания по определению фенапанила в воде, почве, растениях методом хроматографии в тонком слое"
(утв. Минздравом СССР 29.07.1991 N 6257-91)

Редакционная коллегия:

Калинин В.А. - к.с.н., профессор, зав. кафедры ТСХА; Пушкина Г.П. - к.б.н.

Российский институт лекарственных культур: Борисов Г.С. - зав. КТЛ РРСТАЗР: Федорова Н.Е. - к.х.н., МНИИГ им. Эрисмана.

Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

Фенапанил является действующим веществом препарата "Систан", ф. Ром Хаас, США. Название по номенклатуре ИЮПАК: альфа-n-бутил-альфа фенил-1Н-имидазол-1-пропан-нитрил.

Структурная формула:

Эмпирическая формула: .

Молекулярная масса: 252,3.

Т. кип. 200 °C (75 мм рт. ст.). Растворимость: вода - 1%; ксилол, ацетон > 50%; этиленгликоль > 25%. Давление паров при 25 °C технического продукта для крыс - 1590 мг/кг. Фунгицид и протравитель семян с широким спектром действия.

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на хроматографическом определении фенапанила в слое силикагеля после извлечения органическим растворителем.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

2.1.3. Избирательность метода

Определению могут мешать фунгициды и протравители из группы замещенных триазолов.

Ацетон, х.ч., ГОСТ 2603-79.

н-Гексан, х.ч., ТУ 6-09-3375-78.

Фенапанил, аналитический стандарт, фирма Ром Хаас.

Хлороформ, н., ГОСТ 20015-77.

Сульфат натрия безводный, ч., ГОСТ 4166-81.

Хлористоводородная кислота, ч.д.а., ГОСТ 3118-77; 0,1 N раствор.

Пластинки "Силуфол".

Проявляющий реактив - раствор бромфенолового синего (БФС) и нитрата серебра.

Раствор А: 100 мг бромфенолового синего растворяют в 10 мл ацетона.

Раствор Б: 1 г нитрата серебра растворяют в 40 мл воды и прибавляют 120 мл ацетона.

Растворы А и Б сливают в мерную колбу на 200 мл и доводят ацетоном до метки. После обработки БФС пластинку обесцвечивают 2%-м раствором лимонной кислоты.

Стандартный раствор фенапанила с концентрацией 200 мкг/мл в ацетоне. Хранят в холодильнике не более 2-х месяцев.

Посуда мерная по ГОСТ 1770-74.

Делительные воронки емкостью 500 мл, ГОСТ 10054-75.

Колбы конические емкостью 250 мл, ГОСТ 9737-75.

Ротационный испаритель с набором колб, ИР-1М, ТУ 25-11-917-76 (или аналогичного типа).

Камера хроматографическая, ГОСТ 10565-75.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74.

Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды", утвержденными МЗ СССР N 2051-79 от 21.08.79 г.

2.5.1. Экстракция

Вода. 500 мл анализируемой пробы воды помещают в делительную воронку, подкисляют хлористоводородной кислотой до pH 5 - 5,5; образец хорошо перемешивают и препарат экстрагируют хлороформом трижды по 30 мл. Хлороформенные экстракты объединяют, сушат безводным сульфатом натрия и растворитель упаривают до объема 0,2 - 0,3 мл. Далее проводят определение методом ТСХ.

Почва, растения. Пробу (10 г почвы и 20 г растений) помещают в коническую колбу, заливают до полного покрытия пробы смесью ацетон:вода (7:3). Встряхивают периодически 30 мин. Сливают раствор, экстракцию повторяют дважды. Объединяют водно-ацетоновый раствор, переносят в делительную воронку, прибавляют 100 мл дистиллированной воды, перемешивают. Фенапанил экстрагируют хлороформом трижды по 30 мл, хлороформный экстракт объединяют, сушат безводным сульфатом натрия, упаривают до объема 0,2 - 0,3 мл. Далее проводят определение методом ТСХ.

2.5.2. Хроматографирование

Подготовленную пробу количественно наносят при помощи капиллярной пипетки на хроматографическую пластинку так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Центр пятна должен быть на расстоянии 2 см от нижнего края пластинки. Колбу с экстрактом 2 - 3 раза смывают небольшими порциями хлороформа, который также наносят в центр пятна. Справа и слева от пробы наносят серию стандартных растворов, содержащих 3, 5, 10 мкг пестицида. Пластинку с нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, содержащую смесь растворителей хлороформ: ацетон (5:1). После поднятия фронта растворителя на 10 см пластинку вынимают и оставляют на несколько минут на воздухе для испарения растворителя. Затем пластинку обрабатывают раствором БФС. Фон пластинки обесцвечивают 2%-м раствором лимонной (уксусной кислоты). Фенапанил проявляется в виде пятна голубого цвета. Величина .

Количественное определение пестицида проводят путем сравнения интенсивности окраски и площади пятна пробы и стандартного раствора. Прямолинейная зависимость между площадью, интенсивностью окраски пятна и концентрацией препарата в пятне соблюдается в интервале 3 - 10 мкг.

Содержание фенапанила в пробе вычисляется по формуле:

где X - содержание фенапанила в пробе, мг/кг, мг/л;

A - содержание фенапанила, найденное в хроматографируемом объеме, мкг;

P - навеска, г, мл.

Необходимо соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с органическими растворителями и токсическими веществами.

Разработчики: И.П. Литвин, Д.Б. Гиренко (УкрНИИГИНТОКС, г. Киев).