УТВЕРЖДЕНО

                                                                         Председатель Госкомсанэпиднадзора России

                                                                    Главный государственный санитарный врач

                                                             Российской Федерации

Е.Н. Беляев

                                                                    8 июня 1996 г.

                                                             МУК 4.1.0.409-96

                                                                         Дата введения: с момента утверждения

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций аскорбиновой кислоты методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны

                                                                                     М. м. 176,13

Аскорбиновая кислота (g-лактон-2,3-дигидро-L-гулоновой кислоты) - бесцветное кристаллическое вещество. Хорошо растворима в воде, спирте. Не растворима в эфире, бензоле. Т_пл. - 193 °С (с разл.).

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Обладает общетоксическим действием.

ПДК в воздухе - 2 мг/м³.

Характеристика метода

Метод основан на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.

Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения аскорбиновой кислоты в хроматографируемом объеме пробы (25 мкл) - 0,1 мкг.

Нижний предел измерения аскорбиновой кислоты в воздухе - 1 мг/м³ (при отборе 20 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций аскорбиновой кислоты в воздухе - от 1 до 10 мг/м³.

Суммарная погрешность измерения не превышает ± 20 %.

Время выполнения анализа, включая отбор пробы, - около 30 мин.

Приборы, аппаратура, посуда

Микроколоночный жидкостной хроматограф

«Милихром» или другие модели

с УФ-детектором

Хроматографическая колонка длиной 120 мм,

внутренним диаметром 2 мм, заполненная

сорбентом «Силасорб SPH С₁₈» с размером

зерен 6 мкм (ЧСФР)

Аспирационное устройство

Фильтродержатель

Колбы мерные, вместимостью 100 мл                                                ГОСТ 1770-74

Пипетки, вместимостью 1 и 10 мл                                                      ГОСТ 20292-74

Пробирки с пришлифованными пробками,

вместимостью 10 мл                                                                             ГОСТ 10515-75

Реактивы, растворы, материалы

Аскорбиновая кислота, фармакопейная

Ортофосфорная кислота, х. ч. 0,1 %-ный раствор                             ГОСТ 6552-58

Элюент: 0,1 %-ная ортофосфорная кислота

Основной стандартный раствор № 1 с концентрацией аскорбиновой кислоты 100 мкг/мл готовят растворением 0,01 г аскорбиновой кислоты в воде в мерной колбе, вместимостью 100 мл.

Раствор устойчив при хранении в холодильнике в течение суток.

Фильтры АФА-ВП-10                                                                           ТУ 85-743-80

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 5 л/мин аспирируют через фильтр типа АФА-ВП-10. Для измерения 1/2 ПДК достаточно отобрать 20 л воздуха. Пробы можно хранить в закрытых сосудах в холодильнике в течение суток.

Подготовка к измерению

Хроматографическая колонка промышленного изготовления.

Инжектируют в хроматограф от 0,1 до 1 мкг аскорбиновой кислоты из основного стандартного раствора.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

температура термостата колонки                                                   20 °С;

скорость подачи элюента (0,1 %-ная ортофосфорная кислота)  200 мкл/мин;

длина волны УФ-детектора                                                             268 нм;

скорость движения диаграммной ленты                                        6 мм/мин;

чувствительность детектора                                                            0,2 - 0,8;

диапазон измерения самописца                                                      100 мВ;

максимальный объем вводимой пробы                                          25 мкл;

время удерживания аскорбиновой кислоты                                  2 мин 48 с;

элюирующий объем                                                                          565 мкл;

эффективность колонки по аскорбиновой кислоте                      1400 тт.

На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят градуировочную кривую, выражающую зависимость площади пиков (мм²) от содержания аскорбиновой кислоты в хроматографируемом объеме пробы (мкг).

Построение градуировочного графика необходимо проводить не менее чем по 6 точкам, выполняя по 5 параллельных измерений для каждого инжектируемого объема. Проверку градуировочного графика следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой помещают в пробирку с пришлифованной крышкой, добавляют 5 мл воды и оставляют на 15 мин при комнатной температуре и периодическом перемешивании. Степень десорбции с фильтра составляет 97 %.

Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях по отношению к тому же элюенту, что и при построении градуировочного графика.

Количественное определение содержания аскорбиновой кислоты в хроматографируемом объеме проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Расчет концентрации

Концентрацию аскорбиновой кислоты (С) в воздухе (мг/м³) вычисляют по формуле:

а - содержание аскорбиновой кислоты в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

б - объем пробы, взятой на хроматографирование, мл;

в - общий объем анализируемого раствора, мл;

V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (см. приложение 1).

Методические указания разработаны НИО «Экотокс», г. Москва.

Приложение 1

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и давление 760 мм рт. ст.)

проводят по формуле

V_t - объем воздуха, отобранный для анализа, л;

Р - барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);

t - температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

Для удобства расчета V₂₀ следует пользоваться таблицей коэффициентов (приложение 2). Для приведения воздуха к стандартным условиям надо умножить V_t на соответствующий коэффициент.

Приложение 2

Коэффициенты для приведения объема воздуха к стандартным условиям

Приложение 3

Рис. 1

Ловушка-концентратор.

Общий вид.

Рис. 2

Ловушка-концентратор.

Приложение 4

Вещества, определяемые по ранее утвержденным методическим указаниям