Основные ссылки
|
МУК 4.1.268-96 Хроматографическое измерение концентраций В-экзотоксина (турингина-1) в воздухе рабочей зоны.
Государственное
санитарно-эпидемиологическое нормирование
Российской Федерации
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ.
ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Хроматографическое
измерение концентраций В-экзотоксина (турингина-1) в воздухе рабочей зоны
МУК 4.1.268-96
Минздрав
России
Москва
2000
1. Методические указания по
измерению концентрации вредных веществ в воздухе рабочей зоны (выпуск 30)
разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций
вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочно
безопасным уровням воздействия (ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и
являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.
2. Методические указания по
измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны утверждены и. о.
Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместителем Главного
государственного санитарного врача Российской Федерации 8 июня 1996 г.
3. Введены впервые.
4. Включенные в данный
выпуск 74 методики контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработаны
и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТа
12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические
требования", ГОСТа
12.1.016-79 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Требования к методикам
измерения концентраций вредных веществ" и ГОСТа Р
1.5-92 п. 7.3.
Методические указания
одобрены на совместном заседании группы Главного эксперта Федеральной комиссии
по санитарно-гигиеническому нормированию "Лабораторно-инструментальное
дело и метрологическое обеспечение" и методбюро п/секции
"Промышленно-санитарная химия" Проблемной комиссии "Научные
основы гигиены труда и профпатологии".
Ответственные исполнители: Г. А. Дьякова, C.
И. Муравьева
Исполнители: Г. А. Дьякова,
Н. С. Горячев. Л. Г. Макеева, Г. В. Муравьева, Е. М. Малинина, Е. В. Грыжина,
Е. Н. Грицун.
УТВЕРЖДЕНО
И. о. Председателя
Госкомсанэпиднадзора
России - заместителем
Главного
государственного санитарного
врача
Российской Федерации
Г.Г. Онищенко
8 июня 1996 г.
МУК 4.1.268-96
Дата введения: с момента утверждения
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ.
ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Хроматографическое измерение концентраций
В-экзотоксина (турингина-1) в воздухе рабочей зоны
C22H35О19N5P
В-экзотоксин - (турингин-1)
- биологический препарат применяется в сельском и лесном хозяйстве против
колорадского жука, паутинного клеща, хлопковых совок и др. вредителей растений.
Представляет собой порошок
от коричневого до светло-бежевого цвета, растворим в воде и не растворим в
органических растворителях. Действующим началом турингина является
В-экзотоксин, содержание которого в препарате в среднем - ± 1 %. В воздухе находится в
виде аэрозоля.
ПДК в воздухе - 1 мг/м3.
Характеристика
метода
Определение основано на
хроматографическом разделении препарата, в тонком слое силикагеля (силуфол-UV
254) с последующим спектрометрическим измерением концентраций.
Отбор проб производится с
концентрированием на фильтр АФА-ВП-20.
Нижний предел измерения в
анализируемой пробе - 3 мкг.
Нижний предел измерения в
воздухе - 0,06 мг/м3 (при отборе 45 л воздуха).
Диапазон измеряемых
концентраций в воздухе - от 0,06 до 2 мг/м3.
Граница суммарной
погрешности измерения ± 20 %.
Определению не мешает
присутствие полупродуктов производства экзотоксина.
Реактивы,
растворы, материалы
Экзотоксин, х.ч.
|
|
Пропанол, х. ч.
|
ГОСТ ТУ 6-09-783-76
|
Ацетон, ч.
|
ГОСТ 2603-79
|
Дистиллированная вода
|
|
Основной стандартный раствор
№ 1 готовят
растворением 100 мг экзотоксина в 100 мл дистиллированной воды, получают
раствор, содержащий 1 мг/мл экзотоксина.
Стандартный раствор № 2 готовят путем разбавления основного стандартного
раствора № 1 или растворением 10 мг экзотоксина в 10 мл дистиллированной воды
получают раствор, содержащий 0,1 мг/мл или 100 мг/мл экзотоксина.
Срок хранения растворов - 5
суток.
Приготовление рабочих
растворов с содержанием экзотоксина 15,05; 50, 100, 300, 500 мкг/мл - (см.
табл.).
Приборы,
аппаратура, посуда
Аспирационное устройство с реометром
|
ТУ 64-1-862-77
|
Фильтры АФА-ВП-20
|
|
Фильтродержатели
|
|
Фарфоровые чашки диаметром 4-5 см
|
|
Баня водяная
|
|
Колбы мерные, вместимостью 50 и 100 мл
|
ГОСТ
1770-74
|
Микропипетки, вместимостью 0,1-0,2 мл
|
ГОСТ
20292-74
|
Микрошприц вместимостью 1 мл
|
|
Пластинка для тонкослойной хроматографии размером
150 ´ 150 мм (ЧСФР)
"Силуфол"-254
|
|
Хроматографическая пластинка "Силуфол"
|
|
Химические стаканы, вместимостью 50 мл
|
|
Хроматографическая камера размером 150 ´ 200 или 105 ´ 165 мм
|
ГОСТ 1056-63
|
Хроматоскоп
|
|
Лампа УФ-света (l
= 254 мм)
|
|
Центрифужные пробирки
|
|
Центрифуга на 3000 об/мин, МЛР-1
|
|
Пипетки, вместимостью 1, 5, 10 мл
|
ГОСТ 20-292-74
|
Спектрофотометр СФ-26 М
|
|
Отбор пробы
воздуха
Воздух со скоростью 15 л/мин
аспирируют через фильтр АФА-ВП-20, закрепленный в фильтродержателе.
Для определения 1/2 ПДК
достаточно отобрать 6 л воздуха. После отбора пробы фильтры складывают
загрязненной стороной внутрь, помещают в пакеты и доставляют в лабораторию.
Срок хранения отобранных
проб - 5 суток.
Условия
анализа
Фильтры с отобранной пробой
помещают в химический стакан, затем промывают дважды 2-3 мл дистиллированной
воды тщательно отжимают фильтр стеклянной палочкой и сливают в фарфоровую
чашку, которую устанавливают на водяную баню. Выпаривают содержимое до сухого
остатка и растворяют в 0,2-0,3 мл воды и всю пробу количественно с помощью
микропипетки наносят на стартовую линию хроматографической пластинки в одну
точку с помощью микропипетки или микрошприца так, чтобы диаметр пятна не
превышал 0,5 см. Остаток в чашке еще 2 раза тщательно смывают по 0,1 мл
дистиллированной водой и наносят в центр того же пятна. На стартовую линию той
же пластинки в различные точки, расположенные друг от друга на расстоянии 2 см,
наносят по 0,2 мл рабочих растворов, содержащих 15, 50, 100, 300 и 500 мкг/мл
экзотоксина, что соответствует 3; 10; 20; 60; 100 мкг препарата. Пластинку с
нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, которую за 30 мин
до хроматографирования заливают смесью: пропанол, ацетон, вода в соотношении
15:5:1. После поднятия фронта подвижного растворителя на 10 см, пластинку
вынимают и оставляют на несколько мин до его испарения. Затем под хроматоскопом
обнаруживают зоны локализации препаратов, проявляющиеся в виде сине-фиолетовых
пятен на голубом фоне с величиной Rf = 0,78 при использовании пластинок "Силуфол"-UV 254.
Под УФ-светом (l = 254 нм) зоны локализации препарата
проявляется в виде желтоватых пятен на светлом фоне с величиной Rf
= 0,68.
Расчет
концентраций
Количественное определение
проводят путем сравнения площадей пятен стандартных растворов и проб. Между
количеством препарата и площадью его пятен на пластинке существует прямая
пропорциональная зависимость.
При большом содержании
препарата в пробе следует использовать для анализа меньшую часть анализируемого
экстракта.
Содержание экзотоксина (С) в воздухе (мг/м3)
вычисляют по формуле:
, где
а -
количество экзотоксина, найденное в анализируемом объеме пробы, мкг;
в -
общий объем пробы, мл;
б -
объем пробы, взятой для анализа, мл;
V -
объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л
(см. приложение 1).
Количественная
оценка результатов анализа методом УФ-спектрофотометрирования
Полученные на хроматограмме
пятна пробы и стандарта снимают осторожно скальпелем и высыпают слой сорбента в
центрифужные пробирки. Затем в пробирки добавляют по 4 мл дистиллированной воды
и центрифугируют при 3000 об/мин в течение 5-10 мин.
Недостаточный прозрачный
раствор осторожно пипеткой отсасывают в прямоугольные кварцевые кюветы с L = 10
мм и измеряют оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине волны
240 нм.
Количественное определение
экзотоксина в пробе проводят по калибровочному графику.
Для построения
калибровочного графика готовят шкалу стандартов в соответствии с таблицей.
Таблица
Шкала стандартов
№ стандарта
|
Стандартный р-р № 1, 1 мл - 100 мкг
|
Стандартный р-р № 2, 1 мл - 1000 мкг
|
Дистиллированная вода, мл
|
Рабочие р-ры, мкг/мл
|
Содержание экзотоксина в анализируемой пробе (0,2 мл), мкг
|
1
|
0
|
-
|
0
|
0
|
0
|
2
|
1,5
|
-
|
8,5
|
15
|
3
|
3
|
5,0
|
-
|
5,0
|
50
|
10
|
4
|
-
|
1
|
9,0
|
100
|
20
|
5
|
-
|
3
|
7,0
|
300
|
60
|
6
|
-
|
5
|
5,0
|
500
|
100
|
Стандартные растворы наносят на чистую хроматографическую пластинку и
обрабатывают аналогично пробам.
Измеряют величину оптической
плотности стандартных растворов на спектрофотометре при длине волны 240 мм и по
полученным средним данным из пяти определений строят калибровочный график
"количество препарата (мкг) - оптическая плотность".
Концентрацию экзотоксина
(мг/м3) воздуха (X)
вычисляют по формуле:
, где
А -
количество экзотоксина, найденное в анализируемом объеме пробы по
калибровочному графику, мкг;
V -
анализируемый объем воздуха, приведенного к нормальным условиям, л.
Методические указания разработаны
НИИ гигиены труда и профзаболеваний, г. Ташкент.
Приложение 1
Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температуре 20 °С и давление 760 мм рт. ст.)
Приведение объема воздуха к
стандартным условиям проводят по формуле:
, где
Vt - объем воздуха, отобранного
для анализа, л;
Р -
барометрическое давление, мм рт. ст. (760 мм рт. ст. = 101,33 кПа);
t° - температура воздуха в месте отбора пробы, °С.
Для удобства расчета Vст следует пользоваться таблицей коэффициентов (приложение 2). Для приведения
объема воздуха к температуре 20 °С и давлению 760 мм рт. ст. (101,33 кПа) надо
умножить Vt на
соответствующий коэффициент.
Приложение 2
Коэффициент К для приведения объема воздуха к стандартным
условиям
Давление Р, кПа/мм рт. ст.
|
°С
|
730
|
734
|
738
|
742
|
746
|
750
|
754
|
758
|
760
|
764
|
-30
|
1,1582
|
1,1646
|
1,1709
|
1,1772
|
1,1836
|
1,1899
|
1,1963
|
1,2026
|
1,2058
|
1,2122
|
-26
|
1,1393
|
1,1456
|
1,1519
|
1,1581
|
1,1644
|
1,1705
|
1,1768
|
1,1831
|
1,1862
|
1,1925
|
-22
|
1,1212
|
1,1274
|
1,1336
|
1,1396
|
1,1458
|
1,1519
|
1,1581
|
1,1643
|
1,1673
|
1,1735
|
-18
|
1,1036
|
1,1097
|
1,1158
|
1,1218
|
1,1278
|
1,1338
|
1,1399
|
1,1400
|
1,1490
|
1,1551
|
-14
|
1,0866
|
1,0926
|
1,0986
|
1,1045
|
1,1105
|
1,1164
|
1,1224
|
1,1284
|
1,1313
|
1,1373
|
-10
|
1,0701
|
1,0760
|
1,0819
|
1,0877
|
1,0986
|
1,0994
|
1,1053
|
1,1112
|
1,1141
|
1,1200
|
-6
|
1,0540
|
1,0599
|
1,0657
|
1,0714
|
1,0772
|
1,0829
|
1,0887
|
1,0945
|
1,0974
|
1,1032
|
-2
|
1,0385
|
1,0442
|
1,0499
|
1,0556
|
1,0613
|
1,0669
|
1,0726
|
1,0784
|
1,0812
|
1,0869
|
0
|
1,0309
|
1,0366
|
1,0423
|
1,0477
|
1,0535
|
1,0591
|
1,0648
|
1,0705
|
1,0733
|
1,0789
|
+2
|
1,0234
|
1,0291
|
1,0347
|
1,0402
|
1,0459
|
1,0514
|
1,0571
|
1,0627
|
1,0655
|
1,0712
|
+6
|
1,0087
|
1,0143
|
1,0198
|
1,0253
|
1,0309
|
1,0363
|
1,0419
|
1,0475
|
1,0502
|
1,0557
|
+10
|
0,9944
|
0,9999
|
1,0054
|
1,0108
|
1,0162
|
1,0216
|
1,0272
|
1,0326
|
1,0353
|
1,0407
|
+14
|
0,9806
|
0,9860
|
0,9914
|
0,9967
|
1,0027
|
1,0074
|
1,0128
|
1,0183
|
1,0209
|
1,0263
|
+18
|
0,9671
|
0,9725
|
0,9778
|
0,9880
|
0,9884
|
0,9936
|
0,9989
|
1,0043
|
1,0069
|
1,0122
|
+20
|
0,9605
|
0,9658
|
0,9711
|
0,9783
|
0,9816
|
0,9868
|
0,9921
|
0,9974
|
1,0000
|
1,0053
|
+22
|
0,9539
|
0,9592
|
0,9645
|
0,9696
|
0,9749
|
0,9800
|
0,9853
|
0,9906
|
0,9932
|
0,9985
|
+24
|
0,9475
|
0,9527
|
0,9579
|
0,9631
|
0,9683
|
0,9735
|
0,9787
|
0,9839
|
0,9865
|
0,9917
|
+26
|
0,9412
|
0,9464
|
0,9516
|
0,9566
|
0,9618
|
0,9669
|
0,9721
|
0,9773
|
0,9799
|
0,9851
|
+28
|
0,9349
|
0,9401
|
0,9453
|
0,9503
|
0,9655
|
0,9605
|
0,9657
|
0,9708
|
0,9734
|
0,9785
|
+30
|
0,9288
|
0,9339
|
0,9891
|
0,9440
|
0,9432
|
0,9542
|
0,9594
|
0,9645
|
0,9670
|
0,9723
|
+34
|
0,9167
|
0,9218
|
0,9268
|
0,9318
|
0,9368
|
0,9418
|
0,9468
|
0,9519
|
0,9544
|
0,9595
|
+38
|
0,9049
|
0,9099
|
0,9149
|
0,9198
|
0,9248
|
0,9297
|
0,9347
|
0,9397
|
0,9421
|
0,9471
|
Источник информации: https://internet-law.ru/stroyka/text/42299
На эту страницу сайта можно сделать ссылку:
На правах рекламы:
|