"ГОСТ Р 53751-2009. Национальный стандарт Российской Федерации. Молоко, молочные продукты и продукты детского питания на молочной основе. Методы определения содержания йода"
(утв. и введен в действие Приказом Ростехрегулирования от 15.12.2009 N 1238-ст)

Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. N 184-ФЗ "О техническом регулировании", а правила применения национальных стандартов Российской Федерации - ГОСТ Р 1.0-2004 "Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения".

1. Разработан Государственным научным учреждением "Всероссийский научно-исследовательский институт молочной промышленности" Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ "ВНИМИ" Россельхозакадемии).

2. Внесен Техническим комитетом по стандартизации ТК 470 "Молоко и продукты переработки молока".

3. Утвержден и введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 15 декабря 2009 г. N 1238-ст.

4. Введен впервые.

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячно издаваемых информационных указателях "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет.

Настоящий стандарт распространяется на молоко, молочные продукты и продукты детского питания на молочной основе (далее - продукт) и устанавливает титриметрический метод и метод инверсионной вольтамперометрии определения содержания йода.

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике

ГОСТ Р 51652-2000 Спирт этиловый ректификованный из пищевого сырья. Технические условия

ГОСТ Р 53228-2008 Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания

ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.1.005-88 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны

ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 12.1.019-79 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты

ГОСТ 12.4.009-83 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание

ГОСТ 12.4.021-75 Система стандартов безопасности труда. Системы вентиляционные. Общие требования

ГОСТ 83-79 Реактивы. Натрий углекислый. Технические условия

ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 3622-68 Молоко и молочные продукты. Отбор проб и подготовка их к испытаниям

ГОСТ 4109-79 Реактивы. Бром. Технические условия

ГОСТ 4204-77 Реактивы. Кислота серная. Технические условия

ГОСТ 4217-77 Реактивы. Калий азотнокислый. Технические условия

ГОСТ 4221-76 Реактивы. Калий углекислый. Технические условия

ГОСТ 4232-74 Реактивы. Калий йодистый. Технические условия

ГОСТ 4234-77 Реактивы. Калий хлористый. Технические условия

ГОСТ 4520-78 Реактивы. Ртуть (II) азотнокислая 1-водная. Технические условия

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 9147-80 Посуда и оборудование лабораторные фарфоровые. Технические условия

ГОСТ 10163-76 Реактивы. Крахмал растворимый. Технические условия

ГОСТ 11125-84 Кислота азотная особой чистоты. Технические условия

ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия

ГОСТ 13928-84 Молоко и сливки заготовляемые. Правила приемки, методы отбора проб и подготовка их к анализу

ГОСТ 14919-83 Электроплиты, электроплитки и жарочные электрошкафы бытовые. Общие технические условия

ГОСТ 19908-90 Тигли, чаши, стаканы, колбы, воронки, пробирки и наконечник из прозрачного кварцевого стекла. Общие технические условия

ГОСТ 20490-75 Реактивы. Калий марганцовокислый. Технические условия

ГОСТ 24363-80 Реактивы. Калия гидроокись. Технические условия

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 25593-83 Пасты алмазные. Технические условия

ГОСТ 25794.2-83 Реактивы. Методы приготовления титрованных растворов для окислительно-восстановительного титрования

ГОСТ 26809-86 Молоко и молочные продукты. Правила приемки, методы отбора и подготовка проб к анализу

ГОСТ 27068-86 Реактивы. Натрий серноватистокислый (натрия тиосульфат) 5-водный. Технические условия

ГОСТ 27752-88 Часы электронно-механические кварцевые настольные, настенные и часы-будильники. Общие технические условия

ГОСТ 28498-90 Термометры жидкостные стеклянные. Общие технические требования. Методы испытаний

ГОСТ 29169-91 (ИСО 648-77) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной отметкой

ГОСТ 29227-91 (ИСО 385-1-84) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 2. Пипетки градуированные без установленного времени ожидания

ГОСТ 29251-91 (ИСО 385-1-84) Посуда лабораторная стеклянная. Бюретки. Часть 1. Общие требования

Примечание. При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии сети Интернет или по ежегодно издаваемому информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

В настоящем стандарте применены термины, установленные нормативным правовым актом Российской Федерации [1], а также следующие термины с соответствующими определениями:

3.1. Титриметрический метод: метод, основанный на измерении объема реактива точно известной концентрации, затраченного на реакцию взаимодействия с определяемым веществом.

3.2. Метод инверсионной вольтамперометрии: метод, основанный на предварительном концентрировании определяемого компонента раствора на поверхности электрода с последующей регистрацией вольтамперограммы.

Отбор проб - по ГОСТ 3622, ГОСТ 13928 и ГОСТ 26809.

При выполнении измерений в лаборатории должны соблюдаться следующие условия:

Для проведения измерений применяют бидистиллированную воду, которую приготавливают следующим образом: дистиллированную воду фильтруют через мембранный фильтр (диаметр пор 0,45 мкм), затем кипятят для удаления растворенного воздуха и охлаждают до комнатной температуры.

6.1. Сущность метода

Метод основан на окислении йодида в йодат и выделении свободного йода, оттитровываемого серноватистокислым натрием, по расходу которого расчетным путем определяют содержание йода в пробе.

6.2. Средства измерений, вспомогательное оборудование, посуда и реактивы

Весы по ГОСТ Р 53228 с пределами абсолютной погрешности однократного взвешивания +/- 0,2 мг.

Термометр жидкостный (нертутный) с диапазоном измерений от 0 °C до 100 °C с ценой деления шкалы 1 °C по ГОСТ 28498.

Часы электронно-механические по ГОСТ 27752.

Бюретки 1-1-2-2-0,01, 1-3-2-2-0,01 по ГОСТ 29251.

Колбы 1-100 ХС, 2-100 ХС, 1-1000 ТС, 2-1000 ТС по ГОСТ 1770.

Пипетки 1-2-10, 2-2-10 по ГОСТ 29169.

Пипетки 2-1-2-1 по ГОСТ 29227.

Цилиндры 1-10-2, 1-100-2, 1-1000-2 по ГОСТ 1770.

Шкаф сушильный лабораторный, обеспечивающий поддержание температуры (105 +/- 2) °C.

Шкаф сушильный лабораторный, обеспечивающий поддержание температур от 150 °C до 200 °C с отклонением +/- 2 °C.

Печь муфельная, обеспечивающая поддержание температуры в интервале от 250 °C до 500 °C с отклонением +/- 25 °C.

Баня водяная термостатируемая.

Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919.

Устройство перемешивающее лабораторное по технической документации.

Колбы Кн-2-50-24/29, Кн-2-250-29/32 ТС по ГОСТ 25336.

Стаканы В-1-50, В-1-600 ТС по ГОСТ 25336.

Эксикатор 2-250 по ГОСТ 25336.

Посуда фарфоровая по ГОСТ 9147.

Тигли низкие N 5, N 6 по ГОСТ 9147.

Воронка В-75-110 ХС по ГОСТ 25336.

Воронки ВД-1-100 ХС, ВД-3-100 ХС, ВД-1-2000 ХС, ВД-3-2000 ХС по ГОСТ 25336.

Палочки стеклянные оплавленные.

Фильтры беззольные "синяя лента", диаметром 5 - 7 см.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

Бром, х.ч., по ГОСТ 4109.

Изобутанол, х.ч., с содержанием основного вещества не менее 90,0%.

Калий йодистый, х.ч., по ГОСТ 4232.

Калий углекислый, х.ч., по ГОСТ 4221.

Кислота серная, х.ч., по ГОСТ 4204.

Крахмал растворимый, х.ч., по ГОСТ 10163.

Натрий серноватистокислый, х.ч., по ГОСТ 27068.

Натрий углекислый, х.ч., по ГОСТ 83.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ Р 51652.

Фенол, х.ч., с содержанием основного вещества не менее 90,0%.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Допускается применение других средств измерений и оборудования с метрологическими и техническими характеристиками, а также реактивов и материалов, по качеству не ниже указанных.

6.3. Подготовка к проведению измерений

6.3.1. Приготовление растворов

6.3.1.1. Раствор серноватистокислого натрия молярной концентрацией 0,1 моль/дм3.

В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают (25,000 +/- 0,001) г серноватистокислого натрия и растворяют в 400 см3 свежепрокипяченной и охлажденной до температуры (20 +/- 2) °C бидистиллированной воды. Для повышения стойкости раствора рекомендуется добавлять на 1000 см3 0,2 г углекислого натрия или 10 см3 изобутанола. Объем раствора доводят бидистиллированной водой до метки и оставляют на 10 - 15 дней.

Раствор хранят в темном месте в склянке из темного стекла с притертой пробкой.

Коэффициент поправки к титру полученного раствора определяют в соответствии с требованиями ГОСТ 25794.2 (2.11.3).

6.3.1.2. Раствор серноватистокислого натрия молярной концентрацией 0,001 моль/дм3

В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 1 см3 раствора серноватистокислого натрия, приготовленного по 6.3.1.1. Объем раствора доводят бидистиллированной водой до метки. Для измерений используют только свежеприготовленный раствор.

6.3.1.3. Раствор крахмала 0,5%-ный свежеприготовленный

(0,50 +/- 0,01) г крахмала размешивают в 10 см3 бидистиллированной воды температурой (20 +/- 2) °C. Полученную смесь приливают тонкой струйкой при непрерывном помешивании к 90 см3 кипящей бидистиллированной воды и кипятят 2 мин. Горячий готовый крахмал отфильтровывают в бутылку, охлаждают и закрывают пробкой.

6.3.1.4. Углекислый калий

а) Очистка углекислого калия от йода

В делительную воронку вместимостью 2000 см3 помещают 1 кг углекислого калия, добавляют 810 см3 бидистиллированной воды и 100 см3 этилового спирта, встряхивают 30 мин на лабораторном перемешивающем устройстве. Экстракцию спиртом проводят до тех пор, пока слой растворителя не станет бесцветным.

Верхнюю водную фракцию переносят в фарфоровую чашку и высушивают в сушильном шкафу при температуре 150 °C - 200 °C. Высушенную массу помещают в муфельную печь и выдерживают 15 - 20 мин при температуре 400 °C - 450 °C, охлаждают ее в эксикаторе и растирают фарфоровым пестиком. Полученный углекислый калий хранят в склянке с притертой пробкой.

б) Насыщенный раствор углекислого калия

(138,00 +/- 0,01) г углекислого калия, подготовленного по 6.3.1.4 а), помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3, растворяют в небольшом количестве бидистиллированной воды температурой (55 +/- 5) °C. Объем раствора доводят бидистиллированной водой до метки. Раствор тщательно перемешивают, фильтруют и охлаждают до температуры (20 +/- 2) °C.

6.3.1.5. Бромная вода

При работе с бромом необходимо соблюдать особую осторожность, всю работу проводят в вытяжном шкафу. Небольшое количество химически чистого жидкого брома несколько раз промывают бидистиллированной водой в делительной воронке и переносят в склянку с притертой пробкой, заполненную до половины бидистиллированной водой. На дне склянки должен оставаться нерастворенный жидкий бром. Верхний слой - это раствор воды, насыщенный бромом (или бромная вода).

Используют свежеприготовленный раствор.

6.3.1.6. Раствор фенола 3%-ный

В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают (3,00 +/- 0,01) г фенола, добавляют небольшое количество бидистиллированной воды и перемешивают. Объем раствора доводят бидистиллированной водой до метки.

6.3.1.7. Йодистый калий перекристаллизованный

Йодистый калий перекристаллизовывают из насыщенного раствора йодистого калия. Выход соли увеличивается, если к охлажденному раствору с кристаллами йодистого калия добавить этиловый спирт. Выпавшую соль отфильтровывают из раствора, промывают небольшим количеством этилового спирта, просушивают между листами фильтровальной бумаги, а затем - на воздухе в затемненном месте.

Срок хранения в склянке из темного стекла - 1 мес.

6.3.2. Подготовка пробы исследуемого продукта

Молоко и жидкие молочные продукты отбирают по ГОСТ 26809, продукт освобождают от упаковки, тщательно перемешивают, нагревают до температуры (40 +/- 2) °C и охлаждают до температуры (20 +/- 2) °C.

Творог и творожные продукты отбирают по ГОСТ 3622, ГОСТ 26809 из нескольких упаковок или емкостей, помещают в фарфоровую ступку, тщательно перемешивают.

Сухие молочные продукты отбирают по ГОСТ 26809, пробу массой около 500 г помещают в фарфоровую ступку, тщательно перемешивают.

6.3.3. Минерализация проб

В фарфоровую чашку отбирают (25,000 +/- 0,001) г продукта, приготовленного по 6.3.2, добавляют (4,00 +/- 0,01) углекислого калия, приготовленного по 6.3.1.4 а), и оставляют на 24 часа. Смесь осторожно выпаривают на плитке или в сушильном шкафу при температуре (102 +/- 2) °C. Необходимо следить, чтобы нагревание было постепенным, не допуская выплескиваний из чашки. Затем прибавляют 10 - 12 см3 насыщенного свободного от йода раствора углекислого калия, приготовленного по 6.3.1.4 б), и продолжают выпаривать на плитке до прекращения выделения дыма.

Смесь выщелачивают свободной от йода бидистиллированной водой и фильтруют в колбу через сухой обеззоленный фильтр. Фильтрат имеет желтоватый цвет. Озоление или минерализацию проводят в муфельной печи, нагретой до температуры 250 °C, постепенно повышая температуру на 50 °C каждые 30 мин. Температуру доводят до 500 °C. Зола должна быть серо-белого цвета, что указывает на полное удаление органических веществ.

6.4. Проведение измерений

6.4.1. Экстракция и выделение свободного йода

Золу, полученную по 6.3.3, смешивают с небольшим количеством бидистиллированной воды до получения клееобразной массы, затем обрабатывают ее пять раз по 30 см3 этиловым спиртом, сливая вытяжки в фарфоровую чашку.

Если после первого или второго приливания спирта масса становится твердой, то прибавляют еще углекислого калия, приготовленного по 6.3.1.4 б), доводя массу до состояния клея, и продолжают обработку ее спиртом. Спирт отгоняют на слабокипящей водяной бане, не допуская кипения, а остаток растворяют в бидистиллированной воде, фильтруют в фарфоровый тигель и высушивают. Сухой остаток смачивают раствором углекислого калия, приготовленного по 6.3.1.4 б), еще раз высушивают и осторожно прокаливают.

Остаток смывают 10 см3 бидистиллированной воды, используя стеклянную палочку, в коническую колбу вместимостью 50 см3 и смешивают с 0,3 см3 бромной воды, приготовленной по 6.3.1.5 а). При этом йод переходит в свободное состояние и окисляется в йодноватистую кислоту. Жидкость кипятят для удаления избытка брома.

6.4.2. Титрование

После охлаждения жидкости до температуры (20 +/- 2) °C для удаления следов брома к раствору прибавляют 10 капель 3%-ного раствора фенола, приготовленного по 6.3.1.6. Добавляют кристаллик химически чистого йодистого калия, полученного по 6.3.1.7, и подкисляют двумя каплями серной кислоты. Прибавляют три капли 0,5%-ного раствора крахмала, приготовленного по 6.3.1.3, и титруют 0,001 моль/дм3 раствором серноватистокислого натрия, приготовленного по 6.3.1.2, до изменения окраски раствора, не исчезающей в течение 1 мин.

6.4.3. Контрольная проба

Готовят пробу, как указано в 6.3.3, используя вместо 25 г пробы продукта 25 см3 бидистиллированной воды. Далее проводят титрование, как описано в 6.4.2.

6.5. Обработка результатов измерений

6.5.1. Содержание йода X, мкг/кг, вычисляют по формуле

где - объем раствора серноватистокислого натрия молярной концентрацией 0,001 моль/дм3, израсходованного на титрование в анализируемой пробе, см3;

- объем раствора серноватистокислого натрия молярной концентрацией 0,001 моль/дм3, израсходованного на титрование в контрольной пробе, см3;

21,15 - масса йода, соответствующая 1 см3 раствора серноватистокислого натрия молярной концентрацией 0,001 моль/дм3, мкг;

K - коэффициент поправки к титру 0,001 моль/дм3 раствора серноватистокислого натрия;

m - проба продукта по 6.3.2, г;

1000 - коэффициент пересчета результатов на 1000 г продукта.

За окончательный результат принимают среднеарифметическое значение результатов двух параллельных измерений, округленное до первого десятичного знака, если выполняется условие приемлемости по разделу 8.

6.5.2. Метрологические характеристики метода

Приписанные характеристики погрешности и ее составляющих метода определения содержания йода при P = 0,95 приведены в таблице 1.

7.1. Сущность метода

Метод основан на реакции образования галогенида ртути на торце рабочего электрода и его последующего растворения с регистрацией величины тока восстановления иона (1+) до металлической ртути.

7.2. Средства измерений, вспомогательное оборудование, посуда и реактивы

Анализатор вольтамперометрический или установка вольтамперометрическая в комплектации, соответствующей технической документации, с программным обеспечением для обработки полученных результатов измерений.

Весы по ГОСТ Р 53228 с пределами допускаемой абсолютной погрешности однократного взвешивания +/- 0,0001 г.

Электроплитка по ГОСТ 14919.

Печь муфельная, обеспечивающая поддержание температуры в интервале от 250 °C до 500 °C с отклонением +/- 25 °C.

Шкаф сушильный, обеспечивающий поддержание заданного температурного режима в диапазоне от 50 °C до 150 °C с отклонением +/- 2,5 °C.

Центрифуга лабораторная с частотой вращения не менее 1500 мин-1.

Пипетки мерные, пипетки градуированные вместимостью 0,5 см3, 5 см3, 10 см3 2-го класса точности по ГОСТ 29169, ГОСТ 29227.

Микропипетки переменного объема от 0,02 до 0,20 см3.

Колбы мерные 2-50-2, 2-100-2, 2-500-2, 2-1000-2 по ГОСТ 1770.

Цилиндры мерные 1-25, 1-50 по ГОСТ 1770.

Колбы конические Кн-2-25-14/23, Кн-2-100-29/32, Кн-2-250-29/32, Кн-2-500-29/32 по ГОСТ 25336.

Воронка В-75-110 по ГОСТ 25336.

Стаканы В-1-50, В-1-100 по ГОСТ 25336.

Чашки выпарительные кварцевые по ГОСТ 19908.

Чашки выпарительные фарфоровые по ГОСТ 25336.

Груши резиновые объемом 30 см3.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

Фильтры бумажные обеззоленные по ГОСТ 12026.

Бумага шлифовальная 5/0.

ГСО состава водного раствора ионов йода массовой концентрацией 1 г/дм3 +/- 1,0%.

Паста алмазная по ГОСТ 25593.

Калий йодистый по ГОСТ 4232.

Калий азотнокислый, ос.ч., по ГОСТ 4217.

Калия гидроокись, ч.д.а., по ГОСТ 24363.

Калий марганцовокислый по ГОСТ 20490.

Калий тетраоксалат, содержание основного вещества не менее 99,5%. Калий хлористый по ГОСТ 4234.

Кислота азотная, ос.ч., по ГОСТ 11125.

Кислота аскорбиновая, содержание основного вещества не менее 99,99%.

Ртуть азотнокислая, х.ч., по ГОСТ 4520.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ Р 51652.

Стандартный буферный раствор тетраоксалата калия (молярной концентрацией 0,05 моль/дм3).

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Допускается применение других средств измерений и оборудования с метрологическими и техническими характеристиками, а также реактивов, не ниже указанных.

7.3. Подготовка к проведению измерений

7.3.1. Подготовка стеклянной посуды

Новую стеклянную химическую посуду первоначально промывают смесью концентрированной серной кислоты и перекиси водорода в соотношении примерно 10:1 (по объему), затем - раствором концентрированной азотной кислоты, разбавленной бидистиллированной водой в соотношении примерно 1:10 (по объему).

После обработки растворами кислот посуду промывают бидистиллированной водой несколько раз.

При последующем использовании стеклянную посуду промывают раствором концентрированной азотной кислоты, разбавленной бидистиллированной водой в соотношении примерно 1:10 (по объему), затем бидистиллированной водой.

7.3.2. Подготовка кварцевых стаканчиков и фарфоровых чашек

Новые стаканчики или чашки обрабатывают раствором концентрированной азотной кислоты, разбавленной бидистиллированной водой в соотношении примерно 1:10 (по объему), затем прокаливают в муфельной печи при температуре (550 +/- 50) °C в течение (30 +/- 1) мин. При последующем использовании посуду обрабатывают по 7.3.1.

7.3.3. Приготовление раствора гидроксида натрия молярной концентрацией 1 моль/дм3

В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают (40,000 +/- 0,001) г гидроксида натрия, растворяют в небольшом количестве бидистиллированной воды, объем раствора доводят бидистиллированной водой до метки и перемешивают.

7.3.4. Приготовление раствора марганцовокислого калия

В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают (10,000 +/- 0,001) г марганцовокислого калия, добавляют небольшое количество раствора гидроксида натрия с молярной концентрацией 1 моль/дм3 (7.3.3) и перемешивают. Объем раствора доводят раствором гидроксида натрия до метки.

7.3.5. Приготовление раствора азотнокислого калия молярной концентрацией 1 моль/дм3

В мерную колбу вместимостью 250 см3 помещают (25,300 +/- 0,001) г азотнокислого калия, растворяют в небольшом количестве бидистиллированной воды, объем раствора доводят бидистиллированной водой до метки и перемешивают.

7.3.6. Приготовление раствора азотной кислоты

В мерную колбу вместимостью 500 см3, с небольшим количеством бидистиллированной воды вносят 200 см3 концентрированной азотной кислоты и аккуратно перемешивают. Объем раствора доводят бидистиллированной водой до метки.

7.3.7. Приготовление рабочего раствора для нанесения пленки ртути

В мерную колбу вместимостью 500 см3 вносят 100 см3 раствора азотнокислого калия молярной концентрацией 1 моль/дм3 (7.3.5) и 1,7 см3 раствора азотной кислоты (7.3.6). Объем раствора доводят бидистиллированной водой до метки.

7.3.8. Приготовление раствора ртути массовой концентрацией ионов ртути 1 г/дм3 (молярной концентрацией 0,005 моль/дм3)

В мерную колбу вместимостью 500 см3 помещают 10 см3 раствора азотной кислоты (7.3.6) и (0,840 +/- 0,001) г азотнокислой ртути, добавляют небольшое количество бидистиллированной воды и перемешивают. Объем раствора доводят бидистиллированной водой до метки и перемешивают.

7.3.9. Приготовление раствора гидроксида калия молярной концентрацией 2 моль/дм3

В мерную колбу вместимостью 500 см3 помещают (56,100 +/- 0,001) г гидроксида калия, добавляют небольшое количество бидистиллированной воды и тщательно перемешивают. Объем раствора доводят бидистиллированной водой до метки.

7.3.10. Приготовление раствора хлористого калия молярной концентрацией 1 моль/дм3

В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают (7,450 +/- 0,001) г хлористого калия, добавляют небольшое количество бидистиллированной воды и тщательно перемешивают. Объем раствора доводят бидистиллированной водой до метки.

7.3.11. Приготовление фонового раствора

В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают (12,700 +/- 0,001) г тетраоксалата калия, добавляют небольшое количество бидистиллированной воды и тщательно перемешивают. Объем раствора доводят бидистиллированной водой до метки.

7.3.12. Приготовление градуировочных растворов йодистого калия

Градуировочные растворы йодистого калия приготавливают, используя государственный стандартный образец (ГСО) массовой концентрацией ионов йода 1 г/дм3, в соответствии с таблицей 2.

В мерную колбу вместимостью 50 см3 помещают соответствующее количество раствора государственного стандартного образца в объеме, указанном в таблице 2, добавляют небольшое количество бидистиллированной воды и тщательно перемешивают. Объем раствора доводят бидистиллированной водой до метки.

При приготовлении раствора йодистого калия массовой концентрацией 1 г/дм3 из реактива в мерную колбу вместимостью 500 см3 помещают (0,650 +/- 0,001) г йодистого калия, добавляют небольшое количество бидистиллированной воды и тщательно перемешивают. Объем раствора доводят бидистиллированной водой до метки.

Из приготовленного раствора путем последовательного разбавления согласно таблице 2 готовят градуировочные растворы.

7.3.13. Минерализация проб

В два кварцевых стаканчика или фарфоровые чашки помещают по (0,500 +/- 0,001) г анализируемой пробы, добавляют по 1 см3 гидроокиси калия молярной концентрацией 2 моль/дм3 (7.3.9) и по 1 см3 раствора азотнокислого калия молярной концентрацией 1 моль/дм3 (7.3.5). Накрывают стаканчики и оставляют на (60 +/- 5) мин.

Открытые стаканчики с пробами помещают в сушильный шкаф, выдерживают при температуре (150,0 +/- 2,5) °C до полного высыхания, помещают на электроплитку и проводят обугливание до прекращения выделения паров.

По окончании обугливания пробы проводят ее минерализацию в муфельной печи, постепенно повышая температуру через каждые 30 мин с 50 °C до 450 °C. По достижении температуры 450 °C минерализацию продолжают в течение (60 +/- 5) мин. Пробы охлаждают до температуры (20 +/- 2) °C, добавляют 10 см3 фонового раствора (7.3.11) и выдерживают в течение (30 +/- 1)мин.

В случае если полученная зола окажется не белого цвета, добавляют по 1 см3 азотнокислого калия молярной концентрацией 1 моль/дм3 (7.3.5) и высушивают в сушильном шкафу при температуре (150 +/- 2,5) °C до прекращения выделения паров. Далее пробы снова помещают в муфельную печь, нагретую до температуры 450 °C, и выдерживают в течение (60 +/- 5) мин. Минерализацию проводят до тех пор, пока зола не станет белой.

Пробы центрифугируют в течение 20 мин при скорости вращения . Центрифугат помещают в мерные колбы вместимостью 25 см3. Объем раствора доводят фоновым раствором до метки. К каждой пробе добавляют по 0,2 г аскорбиновой кислоты.

7.3.14. Контрольная проба

Готовят контрольную пробу по 7.3.13, используя вместо анализируемой пробы продукта бидистиллированную воду.

7.3.15. Подготовка хлорсеребряного электрода сравнения

7.3.15.1. Для подготовки электрода проводят следующие действия:

- резиновое кольцо сдвигают вниз;

- полость электрода промывают бидистиллированной водой и заполняют насыщенным раствором хлористого калия;

- электрод выдерживают в насыщенном растворе хлористого калия в течение 48 ч для установления равновесного значения потенциала.

Следят за тем, чтобы полость электрода была на 2/3 объема заполнена насыщенным раствором хлористого калия.

7.3.15.2. Совместно с электродом сравнения используют втулку с мембраной, подготовленную следующим образом. Во внутреннюю полость втулки помещают 0,2 см3 раствора хлористого калия молярной концентрацией 1 моль/дм3 (7.3.10). Втулку на 10 - 12 ч погружают в бидистиллированную воду таким образом, чтобы ее нижний конец был опущен на глубину 15 - 20 мм. При этом с обеих сторон мембраны не должно быть пузырьков воздуха. После этого втулка с мембраной готова к работе.

Электрод сравнения помещают во втулку с мембраной, хранят погруженным в бидистиллированную воду, не допуская высыхания мембраны.

7.3.16. Подготовка ртутно-пленочного рабочего электрода

7.3.16.1. Подготовку ртутно-пленочного рабочего электрода проводят в следующей последовательности:

- подготавливают поверхность рабочего электрода: полируют торцевую часть рабочего электрода алмазной пастой, обезжиривают этиловым спиртом, промывают бидистиллированной водой и протирают фильтровальной бумагой, торец электрода должен быть без царапин, зеркально-гладким;

- в электрохимическую ячейку помещают 10 см3 рабочего раствора, подготовленного по 7.3.7, добавляют 0,3 см3 раствора ртути (7.3.8) и 0,1 см3 раствора йодистого калия массовой концентрацией 10 мг/дм3 (7.3.12).

Устанавливают следующие режимы измерений:

Электрохимическую ячейку устанавливают в держатель, закрепляют электроды и погружают их в раствор, проводят электрохимическое накопление ртути на торце рабочего электрода при заданных режимах (три измерительных цикла).

7.3.16.2. Проверка работоспособности электрода

После подготовки электрода проверяют его работоспособность на контрольных пробах.

а) В стаканчик электрохимической ячейки помещают 10 см3 фонового раствора. Электроды (вспомогательный, сравнения и рабочий) погружают в раствор, устанавливают режимы измерений и проводят регистрацию равновесного (бестокового) потенциала между электродом сравнения и рабочим электродом. Проводят три цикла измерений фонового раствора.

б) В фоновый раствор ячейки вводят добавку объемом 0,2 см3 из градуировочного раствора йодистого калия массовой концентрацией 1 мг/дм3. Таким образом, массовая концентрация йода в электрохимической ячейке составляет 20 мкг/дм3. Проводят три цикла измерений контрольной пробы с добавкой.

в) В раствор с контрольной пробой вводят добавку из градуировочного раствора йодистого калия так, чтобы удвоить массовую концентрацию йода в контрольной пробе, т.е. добавляют вновь 0,2 см3 из градуировочного раствора йодистого калия массовой концентрацией 1 мг/дм3. Проводят три цикла измерений контрольной пробы с добавкой.

г) Проводят обработку зарегистрированных вольтамперных кривых и расчет массовой концентрации йода в контрольной пробе.

д) Относительную погрешность измерения массовой концентрации йода в контрольной пробе P, %, вычисляют по формуле

где - измеренная массовая концентрация йода в контрольной пробе, мкг/дм3;

C - заданная массовая концентрация йода в контрольной пробе, мкг/дм3 (20 мкг/дм3).

Если P <= 20%, то электрохимическая аппаратура работает нормально и приступают к анализу проб. Если P > 20%, то измерения проводят заново по 7.3.16.2. Измерения проводят с новой порцией фонового раствора. В случае повторного превышения P > 20% заново подготавливают рабочий электрод по 7.3.16.1 и повторяют измерения с новой порцией раствора.

7.3.16.3. Между измерениями проб торец рабочего электрода промывают бидистиллированной водой, не протирая, и хранят погруженным в бидистиллированную воду.

7.3.17. Подготовка вспомогательного электрода

Перед эксплуатацией индикаторную часть электрода обрабатывают спиртом, тщательно промывают бидистиллированной водой. При последующем использовании электрод обрабатывают в соответствии с 7.3.1.2 и осушают фильтровальной бумагой.

Вспомогательный электрод хранят на воздухе.

7.3.18. Подготовка электрохимической ячейки

Электрохимическую ячейку промывают бидистиллированной водой, обрабатывают в соответствии с 7.3.1.2. Электроды устанавливают в держатели и подсоединяют контакты.

7.3.19. Подготовка вольтамперометрического анализатора

Подготовку и проверку работы анализатора проводят в соответствии с руководством по эксплуатации.

7.3.20. Проверка фонового раствора и электрохимической ячейки на чистоту

7.3.20.1. В электрохимическую ячейку помещают 5 - 10 см3 фонового раствора, добавляют 0,05 г аскорбиновой кислоты. Ячейку устанавливают в держатель, закрепляют электроды и погружают их в раствор.

7.3.20.2. Устанавливают следующие режимы измерений:

7.3.20.3. Измеряют равновесный (бестоковый) потенциал между электродом сравнения и рабочим электродом. Значение потенциала должно установиться в пределах от 100 до 650 мВ.

Если значение бестокового потенциала не устанавливается в требуемых пределах, необходимо проверить, заполнен ли электрод сравнения насыщенным раствором хлористого калия, а также подсоединение электрода сравнения.

7.3.20.4. Проводят два цикла измерений фонового раствора, регистрируя две вольтамперные кривые.

7.3.20.5. Зарегистрированные вольтамперные кривые могут иметь пики тока в области потенциалов (-100... -350) мВ, вызванные наличием следов йода в используемых реагентах, воде и посуде. Если зарегистрированные вольтамперные кривые не имеют пиков йода, то стаканчик электрохимической ячейки, электроды, используемые растворы и посуду считают чистыми, рабочий электрод - готовым к работе.

В противном случае заново подготавливают ртутно-пленочный рабочий электрод в соответствии с 7.3.16, промывают стаканчик электрохимической ячейки и электроды раствором азотной кислоты по 7.3.1.2 и выполняют проверку на чистоту по 7.3.20.

7.4. Проведение измерений

7.4.1. В стаканчик электрохимической ячейки вносят 5,0 см3 фонового раствора (7.3.11). Стаканчик устанавливают в держателе, закрепляют электроды и погружают их в раствор.

7.4.2. Устанавливают режимы измерений:

Время накопления выбирают таким образом, чтобы пик йода на вольтамперной кривой был заметен.

7.4.3. Проводят измерение равновесного (бестокового) потенциала между электродом сравнения и рабочим электродом в соответствии с 7.3.20.3.

7.4.4. Регистрируют усредненную вольтамперную кривую фонового раствора в соответствии с руководством по эксплуатации прибора.

7.4.5. Фоновый раствор удаляют. В стаканчик электрохимической ячейки помещают 5,0 см3 пробы, подготовленной по 7.3.13. Электроды погружают в раствор и регистрируют усредненную вольтамперную кривую пробы в соответствии с руководством по эксплуатации прибора.

7.4.6. Идентификацию пика проводят на усредненной вольтамперной кривой, проведя к ней касательную от точки начала пика до его конца. Область потенциалов, в которой должен находиться пик (-100... -350) мВ. Определяют высоту пика путем измерения перпендикуляра, опущенного из вершины пика на касательную.

7.4.7. В раствор с пробой вводят добавку градуировочного раствора, приготовленного по 7.3.12, значение массовой концентрации которой должно составлять от 50% до 150% от предварительного значения массовой концентрации йодид-ионов в растворе пробы.

Объем добавки градуировочного раствора, вводимого в пробу, , см3, вычисляют по формуле

где - предварительная массовая концентрация йодид-ионов в пробе, мкг/дм3;

- общий объем раствора в стаканчике электрохимической ячейки, см3;

- массовая концентрация йодид-ионов в градуировочном растворе, используемом для добавки, мкг/дм3.

7.4.8. Проводят анализ пробы с добавкой и регистрируют усредненную вольтамперную кривую в соответствии с руководством по эксплуатации прибора.

На усредненной вольтамперной кривой пробы с добавкой проводят идентификацию пика йодид-ионов, как описано в 7.4.7.

7.4.9. Массовую концентрацию йодид-ионов в первой части пробы С1, мкг/дм3, вычисляют по формуле

где - массовая концентрация йодид-ионов в градуировочном растворе, используемом для введения добавки, мкг/дм3;

- объем добавки, введенной в пробу из градуировочного раствора, см3;

- общий объем раствора в электрохимической ячейке, см3;

- среднеарифметическое значение высоты пика йодид-ионов в растворе пробы, мм или мкА;

- среднеарифметическое значение высоты пика йодид-ионов в растворе пробы с добавкой, мм или мкА;

- среднеарифметическое значение высоты пика йодид-ионов в фоновом растворе, мм или мкА.

7.4.10. Повторяют операции по 7.4.1 - 7.4.9 со второй частью пробы и вычисляют массовую концентрацию йодид-ионов во второй части пробы , мкг/дм3, по формуле (4).

7.4.11. Вычисляют среднеарифметическое значение результатов двух измерений массовой концентрации йодид-ионов, полученных для одной из параллельных проб, , мкг/дм3, по формуле

7.4.12. Измерения по 7.4.1 - 7.4.11 проводят со второй параллельной пробой и с холостой пробой. По формулам (4), (5) вычисляют среднеарифметическое значение результатов двух измерений массовой концентрации йодид-ионов, полученных для второй параллельной пробы , а также значение массовой концентрации йодид-ионов в контрольной пробе .

7.4.13. Окончательную массовую концентрацию йодид-ионов в параллельных пробах ( и , мкг/дм3) определяют по формулам:

7.5. Обработка результатов измерений

7.5.1. Содержание йодид-ионов в исследуемом продукте первой пробы , мкг/кг, вычисляют по формуле

где - массовая концентрация йодид-ионов в растворе первой параллельной пробы, мкг/дм3;

- объем раствора в стаканчике электрохимической ячейки до ввода добавки, см3;

- объем подготовленного раствора пробы после минерализации, см3 (7.3.12);

- объем раствора пробы, введенный в стаканчик электрохимической ячейки, см3;

m - масса пробы, отобранная для минерализации (7.3.13), г.

Аналогично рассчитывают массовую концентрацию йодид-ионов для второй параллельной пробы .

За окончательный результат принимают среднеарифметическое значение результатов двух параллельных измерений, округленное до первого десятичного знака, если выполняется условие приемлемости по 8.

7.5.2. Контроль точности результатов измерений

Приписанные характеристики погрешности и ее составляющих метода определения содержания йода при P = 0,95 приведены в таблице 3.

8.1. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях повторяемости (титриметрическим методом)

Проверку приемлемости результатов измерений содержания йода в исследуемых продуктах, полученных в условиях повторяемости (два параллельных определения, n = 2), проводят с учетом требований ГОСТ Р ИСО 5725-6 (пункт 5.2.2).

Результаты измерений считаются приемлемыми при условии:

где , - значения двух параллельных определений содержания йода в исследуемых продуктах, полученные в условиях повторяемости;

r - предел повторяемости (сходимости), значение которого приведено в таблице 1.

Если данное условие не выполняется, то проводят повторные измерения и проверку приемлемости результатов измерений в условиях повторяемости в соответствии с требованиями ГОСТ Р ИСО 5725-6 (пункт 5.2.2).

При повторном превышении указанного норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам анализа.

8.2. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости (титриметрическим методом)

Проверку приемлемости результатов измерений содержания йода в исследуемых продуктах, полученных в условиях воспроизводимости (в двух лабораториях, m = 2), проводят с учетом требований ГОСТ Р ИСО 5725-6 (пункт 5.3.2.1).

Результаты измерений, выполненных в условиях воспроизводимости, считаются приемлемыми при условии:

где , - значения двух параллельных измерений содержания йода в исследуемых продуктах, полученные в двух лабораториях в условиях воспроизводимости;

R - предел воспроизводимости, значение которого приведено в таблице 1.

Если данное условие не выполняется, то выполняют процедуры в соответствии с требованиями ГОСТ Р ИСО 5725-6 (пункт 5.3.3).

8.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях повторяемости (методом инверсионной вольтамперометрии)

Проверку приемлемости результатов измерений содержания йода в исследуемых продуктах, полученных в условиях повторяемости (два параллельных определения, n = 2), проводят с учетом требований ГОСТ Р ИСО 5725-6 (пункт 5.2.2).

Результаты измерений считаются приемлемыми при условии:

где , - значения двух параллельных измерений содержания йода в исследуемых продуктах, полученные в условиях повторяемости;

- среднеарифметическое значение результатов двух параллельных измерений;

- предел повторяемости (сходимости), значение которого приведено в таблице 3.

Если данное условие не выполняется, то проводят повторные измерения и проверку приемлемости результатов измерений в условиях повторяемости в соответствии с требованиями ГОСТ Р ИСО 5725-6 (пункт 5.2.2).

При повторном превышении указанного норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам анализа.

8.4. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости (методом инверсионной вольтамперометрии)

Проверку приемлемости результатов измерений содержания йода в исследуемых продуктах, полученных в условиях воспроизводимости (в двух лабораториях, m = 2), проводят с учетом требований ГОСТ Р ИСО 5725-6 (пункт 5.3.2.1).

Результаты измерений, выполненных в условиях воспроизводимости, считаются приемлемыми при условии:

где , - значения двух параллельных измерений содержания йода в исследуемых продуктах, полученные в двух лабораториях в условиях воспроизводимости;

- среднеарифметическое значение результатов двух параллельных измерений;

- предел воспроизводимости, значение которого приведено в таблице 3.

Если данное условие не выполняется, то выполняют процедуры в соответствии с требованиями ГОСТ Р ИСО 5725-6 (пункт 5.3.3).

9.1. Оформление результатов (титриметрический метод)

Результат определения содержания йода в исследуемых продуктах представляют в документах, предусматривающих его использование, в виде:

где - среднеарифметическое значение результатов двух параллельных измерений, мкг/кг;

- границы абсолютной погрешности измерений, мкг/кг (таблица 1).

9.2. Оформление результатов (метод инверсионной вольтамперометрии)

Результат определения содержания йода в исследуемых продуктах представляют в документах, предусматривающих его использование, в виде:

где - среднеарифметическое значение результатов двух параллельных измерений, мкг/кг;

- границы относительной погрешности измерений, % (таблица 3).

При выполнении работ необходимо соблюдать следующие требования:

- помещение лаборатории должно быть оборудовано общей приточно-вытяжной вентиляцией в соответствии с требованиями ГОСТ 12.4.021. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать норм, установленных требованиями ГОСТ 12.1.005;

- требования техники безопасности при работе с химическими реактивами в соответствии с ГОСТ 12.1.007;

- требования техники безопасности при работе с электроустановками в соответствии с ГОСТ 12.1.019.

Помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожарной безопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.004 и быть оснащено средствами пожаротушения в соответствии с требованиями ГОСТ 12.4.009.

[1] Федеральный закон N 88-ФЗ от 12 июня 2008 г. "Технический регламент на молоко и молочную продукцию"