"ГОСТ 33777-2016. Межгосударственный стандарт. Вещества поверхностно-активные. Метод определения фитотоксичности на семенах высших растений"
(введен в действие Приказом Росстандарта от 30.06.2016 N 760-ст)

Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены"

1 РАЗРАБОТАН Обществом с ограниченной ответственностью "Научно-исследовательский институт бытовой химии "Росса" (ООО "Росса НИИБХ"), Техническим комитетом по стандартизации ТК 354 "Бытовая химия" и ООО "НПФ ВНИИПАВ и СП"

2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 354 "Бытовая химия"

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол N 87-П от 20 апреля 2016 г.)

За принятие проголосовали:

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 30 июня 2016 г. N 760-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 33777-2016 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2017 г.

5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

6 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Апрель 2019 г.

Настоящий стандарт распространяется на анионные, неионогенные, катионные и амфолитные поверхностно-активные вещества (далее - ПАВ) и их смеси и устанавливает метод определения класса фитотоксичности ПАВ.

Сущность метода заключается в графическом определении пороговой массовой концентрации (ПК) испытуемого ПАВ в растворе, при которой среднее значение длин главных корней семян тест-растений равно среднему значению длин корней семян тест-растений в питьевой воде.

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:

ГОСТ OIML R 76-1-2011 Государственная система обеспечения единства измерений. Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания

ГОСТ OIML R 111-1-2009 Государственная система обеспечения единства измерений. Гири классов E₁, E₂, F₁, F₂, M₁, M_1-2, M₂, M_2-3 и M₃. Часть 1. Метрологические и технические требования

ГОСТ 427-75 Линейки измерительные металлические. Технические условия

ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 12038-84 Семена сельскохозяйственных культур. Методы определения всхожести

ГОСТ 21241-89 Пинцеты медицинские. Общие технические требования и методы испытаний

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 27025-86 Реактивы. Общие указания по проведению испытаний

ГОСТ 28498-90 Термометры жидкостные стеклянные. Общие технические требования. Методы испытаний

ГОСТ 28950-91 Инструменты чертежные. Общие технические требования и методы испытаний

ГОСТ 29169-91 (ИСО 648-77) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной отметкой

ГОСТ 32509-2013 Вещества поверхностно-активные. Метод определения биоразлагаемости в водной среде

Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов и классификаторов на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации (www.easc.by) или по указателям национальных стандартов, издаваемым в государствах, указанных в предисловии, или на официальных сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации. Если на документ дана недатированная ссылка, то следует использовать документ, действующий на текущий момент, с учетом всех внесенных в него изменений. Если заменен ссылочный документ, на который дана датированная ссылка, то следует использовать указанную версию этого документа. Если после принятия настоящего стандарта в ссылочный документ, на который дана датированная ссылка, внесено изменение, затрагивающее положение, на которое дана ссылка, то это положение применяется без учета данного изменения. Если документ отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:

3.1 фитотоксичность: Способность химических веществ (в т.ч. ПАВ), растворенных в воде, угнетать (ингибировать) прорастание семян высших растений.

3.2 область угнетения прорастания семян: Область значений массовых концентраций водных растворов испытуемого ПАВ, в которой средние значения длин главных проросших корней меньше, чем в питьевой воде.

Примечание - Для углеводородных ПАВ область угнетения прорастания семян тест-растений наблюдается в области массовых концентраций ПАВ в водном растворе, обуславливающих появление мицелл (т.н. ККМ), а именно 10 - 300 мг/дм³.

3.3 область стимулирования прорастания семян: Область значений массовых концентраций водных растворов испытуемого ПАВ, в которой средние значения длин главных проросших корней больше, чем в питьевой воде.

Примечание - Для отдельных углеводородных ПАВ область стимулирования наблюдается в области массовых концентраций 2 - 50 мг/дм³ (в области достижения предельной адсорбции молекул ПАВ на границе вода-воздух).

3.4 тест-объект: Семена высших растений (рисунок 1).

Примечание - Для оценки фитотоксичности используют семена двух видов высший растений: одного однодольного и одного двудольного. В качестве однодольного растения используют овес (Avena sativa), в качестве двудольного - редьку масличную (Brassica rapa).

3.5 главный корень: Корень максимальной длины.

3.6 пороговая массовая концентрация ПК, мг/дм³: Минимальная массовая концентрация ПАВ в воде замачивания, при которой проявляется фитотоксический эффект.

Примечание - ПК рассчитывают по активному веществу ПАВ (индивидуальных или технических).

3.7 фитотоксический эффект: Угнетение роста корней семян растений в растворе испытуемого ПАВ по сравнению с проращиванием семян тех же растений в питьевой воде.

3.8 коэффициент разбавления К_R: Кратность разбавления раствора испытуемого ПАВ с массовой концентрацией 1000 мг/дм³ до значения ПК.

4.1 Общие указания по проведению испытаний - по ГОСТ 27025.

4.2 Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками и оборудования с техническими характеристиками не хуже, а также реактивов по качеству не ниже указанных в настоящем стандарте.

4.3 При выполнении испытаний в лаборатории должны быть соблюдены следующие условия:

- температура окружающего воздуха в помещении: (22 +/- 1) °C;

- температура в термостате: (22 +/- 1) °C;

- атмосферное давление: (84 - 106) кПа;

- относительная влажность: 60% - 80%.

Весы неавтоматического действия с неавтоматическим установлением показаний высокого (II) класса точности с действительной ценой деления 0,05 мг и максимальной нагрузкой 200 г по ГОСТ OIML R 76-1.

Набор гирь (1 г - 100 г) F₁ по ГОСТ OIML R 111-1.

Термостат, обеспечивающий поддержание температуры в пределах от 20 °C до 30 °C.

Термометр жидкостный стеклянный с диапазоном измерений температуры от 0 °C до 100 °C и ценой деления шкалы 1 °C по ГОСТ 28498.

Колба 2-100-2 по ГОСТ 1770.

Пипетки 2-2-2, 2-2-50 по ГОСТ 29169.

Чашка Петри ЧБН-1-100 по ГОСТ 25336.

Бумага листовая для офисной техники.

Пинцет по ГОСТ 21241.

Линейка по ГОСТ 427.

Часы.

Кронциркуль разметочный по ГОСТ 28950.

Вода питьевая.

Семена овса, используемые для сыроедения, по действующей технической документации.

Семена редьки масличной по действующей технической документации.

Необходимые для испытания растворы ПАВ с массовой концентрацией от 1000 мг/дм³ до 1 мг/дм³ (приблизительно) готовят следующим образом: из испытуемого ПАВ готовят раствор с массовой концентрацией 1000 мг/дм³.

Затем пипеткой 2-2-50 отмеряют 50 см³ приготовленный раствор, помещают в мерную колбу вместимостью 100 см³, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Получают раствор с массовой концентрацией ПАВ 500 мг/дм³.

Пипеткой 2-2-50 вновь отмеряют 50 см³ полученного раствора с массовой концентрацией ПАВ 500 мг/дм³, помещают в следующую колбу вместимостью 100 см³, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Получают раствор с массовой концентрацией 250 мг/дм³.

Аналогичным образом готовят остальные растворы с массовой концентрацией 125,0 мг/дм³; 62,5 мг/дм³; 31,2 мг/дм³; 15,6 мг/дм³; 7,8 мг/дм³; 3,9 мг/дм³; 2,0 мг/дм³; 1,0 мг/дм³.

При расчете массы навески для приготовления растворов учитывают массовую долю основного вещества ПАВ, определяемую в соответствии с нормативным или техническим документом.

Для приготовления растворов используют питьевую воду.

Для испытаний используют неповрежденные, недеформированные, непротравленные семена овса и редьки масличной, имеющие всхожесть не менее 95%.

Семена растений проверяют на всхожесть по ГОСТ 12038.

Отбирают по 120 - 180 семян каждого вида растений, однородных по форме и имеющих разброс по массе +/- 10%.

Для испытаний используют 12 чашек Петри: одна - контрольная (с питьевой водой) и одиннадцать - с растворами испытуемого ПАВ, приготовленными по 6.1.

Перед каждым испытанием чашки Петри обрабатывают раствором перманганата калия с массовой долей 1% (или хромовой смесью) и промывают питьевой водой.

Примечание - При испытаниях на фитотоксичность средств, содержащих перфтор ПАВ (или ПАВ других элементоорганических соединений), используют одноразовые чашки Петри.

В каждую чашку, покрытую одним слоем бумаги, с помощью пинцета помещают по 10 - 15 отобранных по 6.2 семян овса. Затем в каждую из одиннадцати чашек пипеткой 2-2-2 приливают 2 см³ раствора испытуемого ПАВ определенной концентрации, приготовленного по 6.1, в одну из чашек - питьевую воду (контрольный опыт). Раствор (или вода) должен покрывать только половину каждого семени.

Чашки Петри с увлажненными семенами помещают в термостат (или в помещение) с контролируемой температурой. Испытания проводят при температуре (22,0 +/- 0,5) °C. Длительность испытаний - 3 сут до появления главного корня семени.

По истечении срока экспозиции проросшие семена из чашек Петри помещают на бумагу и измеряют длины (l_i) главных корней с помощью разметочного кронциркуля и линейки.

Результаты измерений оформляют в виде таблицы 1.

Аналогично проводят испытание с семенами редьки масличной.

Изменения длин главных корней проросших семян тест-растений в контролируемых условиях в водных растворах ПАВ обусловлены адсорбцией молекул ПАВ на поверхностях смачиваемых семян и описываются зависимостями, аналогичными зависимостям адсорбции молекул ПАВ от концентрации ПАВ на границе вода-воздух

где l_i - длина проросшего корня в водном растворе ПАВ, мм;

- массовая концентрация водного раствора ПАВ, мг/дм³;

- поверхностное натяжение водного раствора ПАВ, мДж/м².

Угнетение прорастания семян наблюдается при концентрациях ПАВ от 0,1 до 0,5 критической концентрации мицеллообразования, т.е. в интервале 10 - 500 мг/дм³.

Пороговую массовую концентрацию (ПК, мг/дм³) определяют графически (рисунок 2). По результатам испытаний (таблица 1) строят зависимость .

Параллельно оси проводят прямую l₀ линию контроля.

От точки пересечения l_i и l₀ (по точкам) строят прямую до оси ординат .

Область пересечения прямых l_i и l₀ соответствует lg (ПК). По значению lg (ПК) вычисляют значение ПК.

По значению ПК и максимальной массовой концентрации (1000 мг/дм³) ПАВ рассчитывают коэффициент разбавления (K_R) мг/дм³

Результаты испытаний приводят в протоколе испытаний (приложение Б).

По величине K_R, с учетом класса биоразлагаемости ПАВ (определяется по ГОСТ 32509) устанавливают класс фитотоксичности ПАВ (приложение А).

По величине коэффициента разбавления (K_R) с учетом биоразлагаемости ПАВ устанавливают класс фитотоксичности ПАВ.

1. Производитель (и/или заказчик) и его адрес.

2. Характеристика образца:

- наименование продукции;

- обозначение нормативной или технической документации;

- состав (% масс.).

3. Нормативные или технические документы, на соответствие которым производятся испытания.

4. Номер партии (акт отбора образца).

5. Дата получения образца.

6. Дата проведения испытаний.

7. Условия проведения испытаний (в соответствии с настоящим стандартом).

8. Результаты испытаний

8.1 Показатели фитотоксичности испытуемого ПАВ представлены в таблице Б.1.

Таблица Б.1

8.2 Класс фитотоксичности определен на основании приложения А (обязательного) к настоящему ГОСТ.

Результаты определения представлены в таблице Б.2.

Таблица Б.2

9. Заключение.

Наименование ПАВ; изготовитель; ТУ или НД

- допускается (не допускается) для обращения на рынке без ограничений (с ограничениями).

Исполнители: