"ГОСТ 32009-2013 (ISO 13730:1996). Межгосударственный стандарт. Мясо и мясные продукты. Спектрофотометрический метод определения массовой доли общего фосфора"
(введен в действие Приказом Росстандарта от 28.06.2013 N 308-ст)

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2-2009 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены".

1. Подготовлен Государственным научным учреждением Всероссийским научно-исследовательским институтом мясной промышленности имени В.М. Горбатова Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИМП им В.М. Горбатова Россельхозакадемии) на основе официальной версии международного стандарта на русском языке.

2. Внесен Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии (Росстандарт).

3. Принят Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (Протокол от 7 июня 2013 г. N 43).

За принятие проголосовали:

4. Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 28 июня 2013 г. N 308-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 32009-2013 (ISO 13730:1996) введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2014 г.

5. Настоящий стандарт модифицирован по отношению к международному стандарту ISO 13730:1996 "Meat and meat products - Determination of total phosphorous content - Spectrophotometric method" (Мясо и мясные продукты. Определение содержания общего фосфора. Спектрометрический метод) путем внесения дополнительных положений, что обусловлено необходимостью учета особенностей межгосударственной стандартизации.

Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанного международного стандарта для приведения в соответствие с ГОСТ 1.5 (подраздел 3.6).

Дополнительные положения, приведенные в отдельных структурных элементах, заключены в рамки из тонких линий.

Дополнительные фразы, слова, показатели и их значения, внесенные в текст стандарта, выделены курсивом.

Международный стандарт разработан подкомитетом SC 6 "Мясо, мясо птицы, рыба, яйца и сопутствующие продукты" Технического комитета по стандартизации ISO/TC 34 "Пищевые продукты".

Перевод с английского языка (en).

Официальный экземпляр международного стандарта, на основе которого подготовлен настоящий межгосударственный стандарт, имеется в Федеральном агентстве по техническому регулированию и метрологии Российской Федерации.

Сравнение структуры настоящего стандарта со структурой указанного международного стандарта приведено в дополнительном Приложении ДА.

При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных международных стандартов соответствующие им межгосударственные стандарты, сведения о которых приведены в дополнительном Приложении ДБ.

Степень соответствия - модифицированная (MOD).

6. Введен впервые.

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет.

Настоящий стандарт распространяется на все виды мяса, включая мясо птицы, мясные и мясосодержащие продукты (колбасные изделия, продукты из мяса, полуфабрикаты, кулинарные изделия, консервы), и устанавливает спектрофотометрический метод определения массовой доли фосфатов, выраженной как массовая доля пентоксида (пятиокиси) фосфора (P₂O₅).

Характеристики точности измерений, приведенные в настоящем стандарте, относятся только к колбасным изделиям.

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:

Примечание. При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты" за текущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

В настоящем стандарте применен следующий термин с соответствующим определением:

3.1. массовая доля фосфатов в мясе и мясных продуктах: Массовая доля фосфора, определенная в соответствии с методикой, изложенной в настоящем стандарте, и выраженная как массовая доля пентоксида (пятиокиси) фосфора (P₂O₅), в процентах.

Метод основан на высушивании навески, озолении остатка с последующим охлаждением и гидролизом золы азотной кислотой, фильтровании, разбавлении фильтрата смесью монованадата аммония и гептамолибдата аммония с образованием соединения желтого цвета и фотометрическом измерении оптической плотности при длине волны 430 нм.

Все реактивы должны быть аналитического качества (не ниже х.ч.). Используемая вода должна быть дистиллированной или деминерализованной, или эквивалентной частоты.

5.1. Кислота азотная по ГОСТ 4461, разбавленная 1:2 (по объему)

Смешивают один объем азотной кислоты (массовая доля 65%; ) с двумя объемами воды.

5.2. Монованадат аммония (NH₄VO₃) (аммоний ванадиевокислый мета) по ГОСТ 9336, раствор массовой концентрацией 2,5 г/дм³

Растворяют 2,5 г монованадата аммония в 500 см³ кипящей воды. Охлаждают и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см³. Добавляют 20 см³ разбавленной азотной кислоты, доводят объем до метки водой и перемешивают.

5.3. Гептамолибдат аммония [(NH₄)₆Mo₇O₂₄ x 4H₂O] (аммоний молибденовокислый) по ГОСТ 3765, раствор массовой концентрацией 50 г/дм³

Растворяют 50 г тетрагидрата гептамолибдата аммония примерно в 800 см³ теплой воды (температура приблизительно 50 °C), охлаждают и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см³. Доводят объем до метки водой и перемешивают.

5.4. Окрашивающий реактив

Смешивают один объем разбавленной азотной кислоты (5.1) с одним объемом раствора монованадата аммония (5.2). Затем добавляют один объем раствора гептамолибдата аммония (5.3) и перемешивают. При этом окрашивающий реактив должен быть прозрачным, светло-желтого цвета.

5.5. Фосфат, основной раствор с массовой концентрацией c (P) = 218 мг/дм³

Растворяют в воде 958,8 мг дигидроортофосфата калия (KH₂PO₄) (фосфорнокислого калия однозамещенного) по ГОСТ 4198, предварительно высушенного в течение 3 ч при температуре (103 +/- 2) °C и охлажденного в эксикаторе.

Количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см³ (6.7). Доводят водой до метки и перемешивают. Данный раствор содержит 500 мг/дм³ пятиокиси фосфора (P₂O₅).

5.6. Фосфат, стандартные растворы массовой концентрацией P₂O₅ от 0,05 до 0,30 мг/см³.

В мерные колбы вместимостью 100 см³ (6.7) вносят пипеткой или бюреткой 10, 20, 30, 40, 50 и 60 см³ основного раствора фосфата (5.5). Добавляют в каждую колбу по 10 см³ разбавленной азотной кислоты (5.1). Доводят объем до метки водой и перемешивают.

Полученные стандартные растворы содержат 0,05; 0,10; 0,15; 0,20; 0,25 и 0,30 мг/см³ P₂O₅ соответственно.

5.7. Контрольный раствор

В мерную колбу вместимостью 100 см³ (6.7) вносят пипеткой 2 см³ разбавленной азотной кислоты (5.1) и 30 см³ окрашивающего реактива (5.4). Доводят объем до метки водой и перемешивают.

5.8. Вода дистиллированная по ГОСТ 6709 или вода для лабораторного анализа.

Примечание. Всю стеклянную посуду необходимо тщательно вымыть моющим средством, не содержащим фосфатов, затем ополоснуть водой.

Применяют обычное лабораторное оборудование и, в частности, следующее.

6.1. Гомогенизатор или мясорубка механическая по ГОСТ 4025 или электрическая по ГОСТ 20469, с решеткой, диаметр отверстий которой не более 4,5 мм.

6.2. Баня водяная, обеспечивающая поддержание температуры на уровне 100 °C.

6.3. Фильтр бумажный складчатый диаметром 15 см, не содержащий фосфатов.

6.4. Спектрофотометр, обеспечивающий измерение при длине волны (430 +/- 2) нм, или фотоэлектроколориметр со светофильтром, имеющим максимум поглощения при длине волны (430 +/- 2) нм.

6.5. Кюветы стеклянные с длиной рабочей грани 10 мм.

6.6. Весы аналитические с допускаемой погрешностью взвешивания не более +/- 0,001 г по ГОСТ 24104.

6.7. Колбы мерные с одной отметкой по ГОСТ 1770, вместимостью 100 и 1000 см³.

6.8. Печь муфельная с электрическим обогревом, способная поддерживать температуру (550 +/- 25) °C, с программируемым устройством управления температурой в зависимости от времени или без него.

6.9. Чашка с плоским дном из фарфора, кварца или металла, например никеля, платины, нержавеющей стали, не подверженного воздействию условий испытания, диаметром 60 мм и наклонными стенками высотой 25 мм или тигли фарфоровые по ГОСТ 9147, или тигли кварцевые по ГОСТ 19908.

6.10. Пипетки мерные по ГОСТ 29169 вместимостью 10, 20 и 50 см³.

6.11. Эксикатор по ГОСТ 25336.

Примечание. Для уточнения приведенного перечня аппаратуры, используемой при озолении, см. ГОСТ 31727.

Проба должна быть представительной, а также без повреждений и изменений при транспортировании и хранении.

От представительной пробы отбирают пробу массой не менее 200 г.

Пробу хранят таким образом, чтобы предотвратить порчу и изменение химического состава.

Пробу измельчают на гомогенизаторе или дважды пропускают через мясорубку (6.1) и тщательно перемешивают. При этом температура пробы должна быть не более 25 °C. Подготовленную пробу помещают в воздухонепроницаемый сосуд, закрывают и хранят таким образом, чтобы предотвратить порчу и изменение состава продукта. Образец следует использовать для анализа по возможности быстро, но не позже чем через 24 ч после измельчения.

9.1. Около 5 г подготовленной пробы взвешивают с записью результата взвешивания до третьего десятичного знака.

9.2. Проведение испытания

9.2.1. Минерализацию навески (9.1) проводят в муфельной печи (6.8) в соответствии с ГОСТ 31727.

9.2.2. Полученную золу растворяют в 10 см³ разбавленной азотной кислоты (5.1), помешивая стеклянной палочкой.

9.2.3. Чашку (тигель) накрывают часовым стеклом и нагревают в течение 30 мин на кипящей водяной бане (6.2), охлаждают и количественно переносят жидкость в мерную колбу вместимостью 100 см³ (6.7). Доводят объем до метки водой, перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр (6.3), отбрасывая первые 5 - 10 см³ фильтрата.

9.2.4. В мерную колбу вместимостью 100 см³ (6.7) вносят 20 см³ прозрачного и бесцветного фильтрата и добавляют 30 см³ окрашивающего реактива (5.4). Содержимое колбы доводят до метки водой, перемешивают, выдерживают не менее 15 мин.

9.2.5. Измеряют оптическую плотность раствора при длине волны (430 +/- 2) нм в стеклянной кювете (6.5) относительно контрольного раствора (5.7), используя спектрофотометр или фотоэлектроколориметр со светофильтром (6.4).

9.2.6. По градуировочному графику, построенному в соответствии с 9.3, находят концентрацию фосфора в растворе образца.

9.3. Градуировочный график

9.3.1. В мерные колбы вместимостью 100 см³ (6.7) вносят по 20 см³ каждого стандартного раствора фосфата (5.6).

К этим растворам добавляют по 30 см³ окрашивающего реактива (5.4). Доводят объем до метки водой для получения концентраций 10, 20, 40, 50 и 60 мкг/см³ P₂O₅ соответственно. Содержимое колб перемешивают и выдерживают не менее 15 мин.

9.3.2. Измеряют оптическую плотность в соответствии с 9.2.5.

9.3.3. Строят градуировочный график, откладывая измеренные значения оптической плотности против соответствующих концентраций разбавленных стандартных растворов фосфата (9.3.1) и проводя прямую линию через отложенные точки и начало координат.

Контроль стабильности градуировочного графика проводят раз в квартал.

9.4. Для проверки выполнения условий повторяемости (сходимости) проводят два единичных определения в соответствии с 9.1 - 9.3.

Точность метода установлена межлабораторными испытаниями только для колбасных изделий [1], [2], выполненными в соответствии с требованиями ГОСТ ИСО 5725-2.

Метрологические характеристики метода при доверительной вероятности P = 0,95 приведены в таблице 1.

Расхождение между результатами двух параллельных определений, выполненных одним оператором при анализе одной и той же пробы с использованием одних и тех же средств измерений и реактивов, не должно превышать предела повторяемости (сходимости) r, значения которого приведены в таблице 1.

где x₁ и x₂ - результаты двух параллельных измерений, %;

r - предел повторяемости, %.

Расхождение между результатами двух определений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости R, значения которого приведены в таблице 1.

где X₁ и X₂ - результаты двух определений, выполненных в разных лабораториях, %;

R - предел воспроизводимости, %.

Границы относительной погрешности, результата измерений P = 0,95 при соблюдении условий настоящего стандарта не должны превышать значений, приведенных в таблице 1.

Протокол испытаний должен включать:

- ссылку на метод, в соответствии с которым проводился отбор проб;

- ссылку на используемый метод испытания;

- полученные результаты;

- если проверена повторяемость (сходимость), окончательно полученные результаты.

В протоколе испытаний должны быть отражены все подробности проведения испытания, не предусмотренные настоящим стандартом или рассматриваемые как необязательные, а также любые факторы, влияющие на результаты испытания.

Протокол испытаний должен содержать всю информацию, необходимую для полной идентификации образца.