"ГОСТ 27996-88. Государственный стандарт Союза ССР. Корма растительные. Методы определения цинка"
(утв. и введен в действие Постановлением Госстандарта СССР от 23.12.1988 N 4538)
(ред. от 11.05.2001)

1. Разработан и внесен Государственным агропромышленным комитетом СССР.

Исполнители:

С.Г. Самохвалов, канд. с.-х. наук (руководитель темы); Н.А. Чеботарева, канд. биол. наук; Г.И. Горшкова; Чуйков, канд. биол. наук; Х.К. Худякова, канд. биол. наук.

2. Утвержден и введен в действие Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 23.12.88 N 4538.

3. Срок первой проверки - 1993 г.

4. Введен впервые.

5. Ссылочные нормативно-технические документы:

Настоящий стандарт распространяется на корма растительного происхождения и устанавливает атомно-абсорбционный и фотометрический методы определения в них массовой доли цинка.

Отбор проб - по ГОСТ 1721, ГОСТ 1722, ГОСТ 7194, ГОСТ 13586.3, ГОСТ 13979.0, ГОСТ 27262.

Раздел 2 утратил силу с 1 января 2002 года. - ГОСТ 30692-2000, введенный Постановлением Госстандарта России от 11.05.2001 N 203-ст.

Метод основан на сравнении оптической плотности комплексного соединения цинка с дитизоном, экстрагированного четыреххлористым углеродом из раствора золы и растворов сравнения с известной концентрацией цинка.

3.1. Аппаратура, материалы и реактивы

3.1.1. Для подготовки проб к испытанию и их минерализации - по п. 2.1.1.

3.1.2. Для определения цинка в растворе золы применяют:

фотоэлектроколориметр или спектрофотометр, позволяющий работать в интервале длин волн 520 - 540 нм;

весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г и 4-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 500 г по ГОСТ 24104;

воронки делительные вместимостью 50 - 100, 250 и 1000 см3 по ГОСТ 25336;

колбы мерные с пришлифованными пробками 2-го класса точности вместимостью 50, 100, 500 и 1000 см3 по ГОСТ 1770;

пипетку 2-го класса точности вместимостью 5 см3 по ГОСТ 20292 или дозатор той же вместимости с погрешностью дозирования не более 1%, изготовленный из материала, не загрязняющего раствор цинком;

бюретки с краном 2-го класса точности вместимостью 100 см3 по ГОСТ 20292 или дозатор вместимостью 10 см3 с погрешностью дозирования не более 1%, изготовленный из материала, не загрязняющего раствор цинком;

бюретку с краном 2-го класса точности вместимостью 10 см3 и пипетки 2-го класса точности вместимостью 5, 10 см3 по ГОСТ 20292;

цилиндры мерные вместимостью 10, 25, 100, 250, 500 и 1000 см3 по ГОСТ 1770;

воронки лабораторные диаметром 150 мм по ГОСТ 25336;

фильтры обезволенные, "синяя" и "белая лента" диаметром 15 см или бумагу фильтровальную лабораторную марки ФНС по ГОСТ 12026; очищают от загрязнения цинком следующим образом: фильтры, вложенные в воронки, дважды заполняют соляной кислотой, разбавленной 1 + 100, промывают небольшими порциями дистиллированной воды до нейтральной реакции по универсальной индикаторной бумаге и высушивают на воздухе или в сушильном шкафу при температуре не более 95 °C;

бумагу индикаторную универсальную для определения pH 1 - 10;

натрий уксуснокислый 3-водный по ГОСТ 199, ч.д.а.;

натрий серноватистокислый (тиосульфат натрия) по ГОСТ 27068, ч.д.а.;

кислоту серную по ГОСТ 4204, х.ч., разбавленную дистиллированной водой 1 + 5 по объему;

аммиак водный по ГОСТ 3760, х.ч. или ч.д.а., разбавленный дистиллированной водой 1 + 200 по объему;

углерод четыреххлористый по ГОСТ 20288, х.ч. или ч.д.а.; пригодность реактива для анализа проверяют следующим образом: примерно 0,001 г дитизона растворяют в 100 см3 четыреххлористого углерода и оставляют в закрытой склянке на сутки в темноте при температуре 5 - 10 °C. Если окраска раствора дитизона остается изумрудно-зеленой, четыреххлористый углерод пригоден для анализа. Бледно-зеленая или желтая окраска раствора указывает на присутствие в четыреххлористом углероде примесей, разлагающих дитизон. В этом случае четыреххлористый углерод необходимо очистить следующим образом: 500 см3 четыреххлористого углерода помещают в склянку с пришлифованной пробкой вместимостью 1 дм3, добавляют 10 г активированного угля, встряхивают в течение 5 мин и фильтруют через бумажный фильтр. Обработку повторяют с новой порцией активированного угля. Затем четыреххлористый углерод перегоняют в стеклянном перегонном аппарате, собранном на шлифах;

дитизон (дифенилтиокарбазон) по ГОСТ 10165, ч.д.а.;

цинк гранулированный по ГОСТ 989, х.ч.;

воду дистиллированную или деионизированную, проверенную по п. 2.1.1;

кислоту соляную по ГОСТ 3118, х.ч., разбавленную дистиллированной водой 1 + 1, 1 + 40 и 1 + 100 по объему;

кислоту уксусную ледяную по ГОСТ 61, х.ч.;

уголь активированный по ГОСТ 4453.

Примечание. Допускается использовать аппаратуру, мерную посуду и другие средства измерения, имеющие такие же или лучшие метрологические характеристики.

3.2. Подготовка к испытанию

3.2.1. Подготовка проб к испытанию - по п. 2.2.1.

3.2.2. Приготовление и очистка запасного раствора дитизона

0,100 г дитизона помещают в делительную воронку вместимостью 250 см3, приливают 150 см3 четыреххлористого углерода и энергично встряхивают в течение 10 мин. Раствор фильтруют через бумажный фильтр с синей лентой в делительную воронку вместимостью 1000 см3, приливают 250 см3 аммиака, разбавленного 1 + 200, и энергично встряхивают в течение 1 мин. После разделения фаз нижний органический слой, содержащий продукты разложения дитизона, сливают и отбрасывают, а верхний водный слой, содержащий дитизон, промывают 2 раза 3 - 5 см3 четыреххлористого углерода. Затем приливают 10 см3 серной кислоты, разбавленной 1 + 5, 500 см3 четыреххлористого углерода и энергично встряхивают в течение 1 мин. После разделения фаз нижний слой четыреххлористого углерода с растворенным в нем дитизоном переносят в другую делительную воронку или колбу, а водную фазу отбрасывают. Раствор дитизона в четыреххлористом углероде промывают в делительной воронке 2 раза дистиллированной водой порциями по 250 см3 и фильтруют через сухой бумажный фильтр, очищенный от загрязнения цинком, в склянку из темного стекла с притертой пробкой. Раствор хранят при температуре 5 - 10 °C не более 1 мес.

3.2.3. Приготовление рабочего раствора дитизона

25 см3 запасного раствора дитизона помещают в сухую мерную колбу вместимостью 500 см3, доводят до метки четыреххлористым углеродом и перемешивают. Раствор готовят перед употреблением.

3.2.4. Приготовление раствора с массовой долей тиосульфата натрия 50%

500,0 г тиосульфата натрия растворяют в 500 см3 дистиллированной воды.

3.2.5. Приготовление ацетатного буферного раствора с pH 5

272,0 г уксуснокислого натрия растворяют примерно в 500 см3 дистиллированной воды, прибавляют 58 см3 ледяной уксусной кислоты и доводят объем полученного раствора до 1 дм3 дистиллированной водой.

3.2.6. Приготовление маскирующего раствора

1 дм3 ацетатного буферного раствора с pH 5 смешивают с 25 см3 раствора тиосульфата натрия. Полученный раствор очищают от примесей цинка экстракцией раствором дитизона в четыреххлористом углероде. Для этого его помещают в делительную воронку вместимостью 1000 см3, приливают 5 - 7 см3 раствора дитизона, приготовленного по п. 3.2.2 (допускается использование раствора дитизона, не очищенного от продуктов его разложения), энергично встряхивают в течение 3 мин и после разделения фаз отбрасывают нижний слой. Операцию повторяют до тех пор, пока дитизон перестанет менять свою первоначальную окраску. Затем очищаемый раствор отмывают от дитизона, энергично встряхивая его с 5 - 7 см3 четыреххлористого углерода в течение 3 мин и отбрасывая органическую фазу. Промывку повторяют до тех пор, пока четыреххлористый углерод не перестанет окрашиваться. Раствор фильтруют через бумажный фильтр с белой лентой, очищенный от загрязнения цинком, и хранят при температуре 5 - 10 °C не более 2 недель.

3.2.7. Приготовление раствора цинка массовой концентрации 1 мг/см3 (раствор А) - по п. 2.2.2.

3.2.8. Приготовление раствора цинка массовой концентрации 100 мкг/см3 (раствор В)

В мерную колбу вместимостью 100 см3 пипеткой помещают 10 см3 раствора А, доводят до метки соляной кислотой, разбавленной 1 + 40, и перемешивают. Раствор хранят не более 3 мес.

3.2.9. Приготовление раствора цинка массовой концентрации 5 мкг/см3 (раствор Г)

В мерную колбу вместимостью 100 см3 пипеткой помещают 5 см3 раствора В, доводят до метки соляной кислотой, разбавленной 1 + 40, и перемешивают. Раствор готовят в день проведения испытания.

3.2.10. Приготовление раствора сравнения

В мерные колбы вместимостью 50 см3 из бюретки вместимостью 10 см3 наливают указанные в табл. 2 объемы раствора Г, доводят до меток соляной кислотой, разбавленной 1 + 40, и тщательно перемешивают. Растворы готовят в день проведения испытания.

3.3. Проведение испытания

3.3.1. Озоление растительного материала и растворение золы - по п. 2.3.1.

3.3.2. Определение цинка в растворе золы

Из растворов золы и растворов сравнения дозатором или пипеткой берут пробы по 5 см3, помещают в делительные воронки вместимостью 50 - 100 см3, дозатором или из бюретки приливают по 10 см3 маскирующего раствора, перемешивают и дозатором или из бюретки приливают по 10 см3 рабочего раствора дитизона. Встряхивают воронки в течение 1 мин. После разделения фаз нижний слой четыреххлористого углерода сливают в кювету фотоэлектроколориметра с толщиной просвечиваемого слоя 10 мм.

Допускается проведение экстракции в других герметично закрывающихся технологических емкостях вместимостью 50 - 100 см3. Разделение фаз в этом случае проводят в делительных воронках либо отбирают одну из фаз шприцем или пипеткой с грушей.

Экстракты фотометрируют относительно первого раствора сравнения, не содержащего цинк, при длине волны 538 нм, или используя светофильтр с максимумом светопропускания в области 520 - 540 нм. Одновременно проводят контрольный опыт.

Если значение оптической плотности экстракта из раствора золы превышает значение оптической плотности экстракта из шестого раствора сравнения, раствор золы разбавляют соляной кислотой, разбавленной 1 + 40, и повторяют описанные выше операции в том же порядке. При таком же разбавлении повторяют и контрольный опыт.

Допускается пропорциональное изменение объемов проб растворов золы, растворов сравнения и растворов реагентов при погрешности дозирования не более 1%.

Все работы с четыреххлористым углеродом следует проводить в вытяжном шкафу.

3.4. Обработка результатов

3.4.1. По результатам фотометрирования экстрактов из растворов сравнения строят градуировочный график, откладывая по оси абсцисс массовые концентрации цинка в растворах сравнения в пересчете на массовые доли в растительном материале в , указанные в табл. 2, а по оси ординат - соответствующие им значения оптической плотности. По градуировочному графику находят массовые концентрации цинка в анализируемых растворах в пересчете на массовые доли в растительном материале в .

3.4.2. Массовую долю цинка в воздушно-сухом растительном материале вычисляют по п. 2.4.3.

3.4.3. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений и между результатами, полученными в разных условиях , при доверительной вероятности P = 0,95 не должны превышать следующих значений:

где - среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, ;

- среднее арифметическое результатов двух испытаний, выполненных в разных условиях, .

Предельную погрешность результата анализа , при односторонней доверительной вероятности P = 0,95 вычисляют по формуле

где - массовая доля цинка, (результат единичного определения или среднее арифметическое результатов двух параллельных определений).