"ГОСТ 14260-89. Государственный стандарт Союза ССР. Плоды перца стручкового. Технические условия"
(утв. и введен в действие Постановлением Госстандарта СССР от 29.03.1989 N 832)

1. Разработан и внесен Министерством медицинской и микробиологической промышленности СССР.

Исполнители: В.П. Георгиевский; И.П. Ковалев, канд. хим. наук; Ю.В. Шостенко, канд. хим. наук; В.А. Данельянц, канд. хим. наук; Л.Я. Черныш; Е.Я. Ладыгина; Л.П. Сало, ст. науч. сотр. И.Д. Козловский; В.М. Некрашевич.

2. Утвержден и введен в действие Постановлением Госстандарта СССР от 29.03.89 N 832.

3. Срок первой проверки - 1993 г.

4. Взамен ГОСТ 14260-69.

5. Ссылочные нормативно-технические документы

Настоящий стандарт распространяется на зрелые высушенные плоды горьких сортов культивируемого однолетнего растения стручкового перца (Capsicum annuum L) семейства пасленовых (Solanaccae), предназначенные для использования в качестве лекарственного сырья.

1.1. Характеристики

По органолептическим и физико-химическим показателям плоды перца должны соответствовать требованиям и нормам, указанным в таблице.

1.2. Требования безопасности

При работе с плодами перца необходимо применять противопылевые респираторы Ф-62ш, так как плоды стручкового перца вызывают сильное раздражение слизистых оболочек и чихание.

1.3. Анатомическое строение плода перца (черт. 1, 2, 3)

При рассматривании с поверхности клетки наружного эпидермиса плода (экзокарпия) изодиаметрические, слегка извилистые или многоугольные с утолщенными пористыми стенками. Клетки внутреннего эпидермиса (эндокарпия) довольно узкие, вытянутые, с извилистым контуром и желтыми четководноутолщенными стенками. Мякоть плода состоит из тонкостенных клеток с обильным содержимым в виде оранжево-желтых или коричнево-оранжевых комочков (хромопласты) и капель жирного масла оранжевого, желто- или красно-оранжевого цвета (черт. 1).

В обрывках семени наибольшее диагностическое значение имеют каменистые клетки (эпидермис) семенной кожуры - очень крупные, причудливо-извилистые с толстой серовато- или зеленовато-желтой слоистой оболочкой, пронизанной многочисленными порами (черт. 2).

Элементы чашечки плода: обрывки эпидермиса с головчатыми волосками, состоящими из одноклеточной ножки и многоклеточной головки с коричневым содержимым; в мезофилле чашечки встречаются клетки с кристаллическим песком оксалата кальция. В обрывках плодоножки характерны тяжи крупных механических волокон с волнистым контуром; клетки основной паренхимы крупные, пористые (черт. 3).

1.4. Маркировка

1.4.1. Транспортная маркировка - по ГОСТ 14192. Маркировка сырья - по ГОСТ 6077.

1.5. Упаковка

1.5.1. Плоды стручкового перца упаковывают по ГОСТ 6077 с дополнением: целые плоды упаковывают в мешки по ГОСТ 19317 нетто 20 кг, в тюки из ткани по ГОСТ 5530 или ГОСТ 19298 нетто 50 кг; измельченные упаковывают в двойные мешки по ГОСТ 19317 нетто 30 - 35 кг.

Правила приемки - по ГОСТ 24027.0.

3.1. Отбор проб плодов перца и определение их качества - по ГОСТ 24027.0 - ГОСТ 24027.2 со следующим дополнением.

3.2. Определение массовой доли суммы капсаициноидов

3.2.1. Аппаратура, материалы и реактивы

Мельница электрическая лабораторная ЭМ-3А.

Сито с отверстиями диаметром 0,1 см по ГОСТ 214.

Весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ 24104.

Весы аналитические по ГОСТ 24104.

Баня водяная лабораторная с электрическим подогревом.

Аппарат для встряхивания жидкости в сосудах.

Центрифуга ЦЛН-2.

Спектрофотометр СФ-16 или СФ-26, или СФ-46.

Фен по ГОСТ 22314.

Ультрахемископ Брумберга УБ-1 или "Хроматоскоп", имеющий максимум пропускания в области 254 ммк.

Пластинки "Силуфол" УФ-254.

Хроматографическая камера.

Пульверизатор гигиенический.

Игла.

Колбы конические с пришлифованными пробками вместимостью 50, 100 и 250 см³ по ГОСТ 23932.

Колбы круглодонные вместимостью 50 см³ по ГОСТ 23932.

Колбы мерные вместимостью 10 и 100 см³ по ГОСТ 1770.

Пипетки вместимостью 0,1; 5 и 50 см³ по ГОСТ 20292.

Холодильник стеклянный лабораторный по ГОСТ 23932.

Эксикатор диаметром 25 см по ГОСТ 23932.

Цилиндры вместимостью 25, 50 и 100 см³ по ГОСТ 1770.

Воронки конусообразные для фильтрования диаметром 5 - 8 см по ГОСТ 23932.

Воронка делительная вместимостью 250 см² по ГОСТ 25336.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Аммиак водный, ч.д.а. по ГОСТ 3760.

Этиловый спирт по ГОСТ 18300.

Эфир диэтиловый.

Хлороформ.

2,6-дихлорхинон-4-хлоримид.

Капсаицин - стандартный образец.

Кальций хлористый, ч., по ГОСТ 4161.

Вата медицинская по ГОСТ 5556.

3.2.2. Подготовка к анализу

3.2.2.1. Приготовление стандартного образца капсаицина

(0,0200 +/- 0,0002) г капсаицина-стандарта растворяют в этиловом спирте с объемной долей 95% в мерной колбе вместимостью 10 см³ и доводят объем раствора тем же спиртом до метки.

Раствор хранят в защищенном от света месте при комнатной температуре не более 3 дней.

3.2.2.2. Приготовление раствора 2,6-дихлорхинон-4-хлоримида с массовой долей 0,2%

(0,20 +/- 0,01) г 2,6-дихлорхинон-4-хлоримида растворяют в этиловом спирте с объемной долей 95% в мерной колбе вместимостью 100 см³ и доводят объем раствора тем же спиртом до метки.

Раствор хранят в защищенном от света месте при температуре 4 - 8 °C не более 3 мес.

3.2.2.3. Приготовление раствора этилового спирта с объемной долей 70%

Смешивают 675 см³ этилового спирта с объемной долей 95% и 325 см³ воды.

3.2.2.4. Приготовление смеси этилового спирта с хлороформом (1:2)

К 1 объему этилового спирта приливают 2 объема хлороформа и хорошо перемешивают.

3.2.3. Проведение анализа

Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих через сито с отверстиями диаметром 0,1 см по ГОСТ 214.

(10,00 +/- 0,01) г сырья помещают в коническую колбу с пришлифованной пробкой вместимостью 250 см³ и приливают 100 см³ раствора этилового спирта с объемной долей 70%, закрывают пробкой и встряхивают на аппарате для встряхивания с числом качаний 120 - 150 в минуту в течение 30 мин. Спиртоводное извлечение фильтруют через ватный тампон. Первую порцию фильтрата (1 - 2 см³) отбрасывают. Отбирают пипеткой 50 см³ фильтрата, что соответствует 5 г исходного сырья, помещают в делительную воронку вместимостью 250 см³, приливают 15 см³ дистиллированной воды и дважды извлекают сумму капсаициноидов хлороформом по 40 см³ в течение 3 мин каждый раз. После каждого извлечения жидкости дают в воронке расслоиться в течение 10 мин. Хлороформные извлечения сливают порциями (25 - 30 см³) в круглодонную колбу вместимостью 50 см³ и отгоняют хлороформ на кипящей водяной бане под вакуумом при остаточном давлении 2,6 · 10⁴ - 4,0 · 10⁴ Па (200 - 300 мм рт. ст.) до объема 1 - 2 см³. Колбу с остатком охлаждают и остаток количественно переносят в мерную колбу вместимостью 10 см³ смесью этилового спирта с хлороформом по 1 - 2 см³ и доводят объем раствора этой же смесью до метки (раствор А).

Две пластинки "Силуфол" УФ-254 размером 15 x 15 см тонкой иглой разделяют каждую на шесть равных полос шириной 2,5 см и на расстоянии 1,5 см от нижнего края пластинки отмечают стартовую линию. На каждую пластинку наносят пипеткой на пять точек 0,025 см³ раствора А, шестую оставляют контрольной. Пластинки высушивают на воздухе в течение 20 мин и хроматографируют восходящим способом в камере с диэтиловым эфиром. Когда фронт растворителя дойдет до конца пластинки, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 5 мин и в УФ-свете (при длине волны 254 нм) предварительно отмечают верхнюю и приблизительно нижнюю границы полосы с темно-фиолетовыми зонами суммы капсаициноидов. Затем вдоль хроматограммы отрезают полоску с зоной суммы капсаициноидов, обрабатывают ее последовательно раствором 2,6-дихлорхинон-4-хлоримида с массовой долей 0,2% и парами аммиака. На полоске проявляется одно голубое пятно. Проявленную полоску прикладывают к пластинке и по положению голубого пятна уточняют нижнюю границу полосы с зонами суммы капсаициноидов. Вырезают полосу с зонами, содержащими сумму капсаициноидов, разрезают ее на четыре участка, не нарушая целостности границ отдельных зон. Участки с зонами помещают в круглодонную колбу вместимостью 50 см³, туда же приливают 5 см³ этилового спирта с объемной долей 95%, осторожно смывая края колбы, закрывают колбу притертой пробкой и встряхивают в течение 15 мин на аппарате для встряхивания с числом качаний 120 - 150 в минуту. Элюаты помещают в пробирки для центрифугирования и центрифугируют со скоростью 8000 мин^-1 в течение 5 мин и измеряют оптическую плотность надосадочной жидкости на спектрофотометре при длине волны 280 нм в кювете с толщиной слоя 1,0 см. В качестве раствора сравнения используют элюат с контрольной полосы хроматограммы, равной по площади полосе с зонами капсаициноидов.

3.2.4. Обработка результатов

3.2.4.1. Построение градуировочного графика

На пластинку "Силуфол" УФ-254 на пять точек наносят по 0,01 см³ (0,020 г/мг) раствора стандартного образца капсаицина. На последующие пластинки наносят по 0,02 см³ (0,040 г/мг); 0,03 см³ (0,060 г/мг); 0,04 см³ (0,080 г/мг) раствора стандартного образца капсаицина на пять точек. Шестую точку на всех пластинках оставляют чистой для приготовления раствора сравнения. Хроматографирование и элюирование проводят по п. 3.2.3, используя для элюирования все пять зон. При построении калибровочного графика на оси абсцисс откладывают количество капсаициноидов, нанесенное на хроматограмму в пяти точках (0,100; 0,200; 0,300; 0,400) в граммах на миллиграмм, на оси ординат - значения соответствующих оптических плотностей.

Для построения калибровочного графика используют среднее значение оптической плотности, которое определяют по трем навескам капсаицина-стандарта при хроматографировании на трех пластинках для каждой навески.

3.2.4.2. Значение оптической плотности анализируемых элюатов вычисляют как среднее арифметическое величин оптической плотности с двух пластинок. По калибровочному графику, построенному по капсаицину-стандарту, находят сумму капсаициноидов в элюате с хроматограммы. Сумму капсаициноидов вычисляют как среднее арифметическое результатов анализа трех навесок сырья.

3.2.4.3. Массовую долю суммы капсаициноидов в процентах (X) в пересчете на капсаицин-стандарт и абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле

где y - сумма капсаициноидов, найденная по калибровочному графику, г;

5 - масса сырья, соответствующая объему спиртового извлечения из сырья, взятого для анализа, г;

10 - объем раствора А, см³;

V - суммарный объем раствора А, значение которого нанесено на хроматографическую пластинку в четырех точках, см³;

W - потеря массы при высушивании сырья, %.

Транспортирование и хранение - по ГОСТ 6077.

5.1. Поставщик гарантирует соответствие качества высушенных плодов перца требованиям настоящего стандарта при соблюдении условий хранения и транспортирования.

5.2. Гарантийный срок хранения плодов перца - 3 года с момента заготовки.