"ГОСТ 26177-84. Государственный стандарт Союза ССР. Корма, комбикорма. Метод определения лигнина"
(утв. и введен в действие Постановлением Госстандарта СССР от 28.04.1984 N 1504)

Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 28 апреля 1984 г. N 1504 срок действия установлен

Разработан Министерством сельского хозяйства СССР.

Исполнители: Л.М. Державин, И.С. Шумилин, Д.И. Марнов, В.П. Максимова, М.А. Смурыгин, В.А. Чуйков, Х.К. Худякова, В.И. Георгиевский, З.М. Алиева, Т.П. Сорокина.

Внесен Министерством сельского хозяйства СССР.

Зам. министра Н.Ф. Татарчук.

Утвержден и введен в действие Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 28 апреля 1984 г. N 1504.

Настоящий стандарт распространяется на корма растительного происхождения, комбикорма и устанавливает метод определения лигнина, применяемый при определении питательности рационов.

Метод основан на выделении лигнина из продукта путем кислотного гидролиза в виде нерастворимого остатка.

1.1. Отбор проб - по ГОСТ 4808-75, ГОСТ 13496.0-80, ГОСТ 13586.4-83, ГОСТ 13979.0-68, ГОСТ 23637-79, ГОСТ 23638-79.

2.1. Для проведения испытаний применяют:

измельчитель проб растений марки МПР-2 или соломорезку марки ИСР-1 или аналогичных марок;

мельницу лабораторную марки МРП-2 или аналогичных марок;

ступку фарфоровую;

ножницы;

сито с отверстиями диаметром 1 мм;

весы лабораторные по ГОСТ 24104-80 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г или другие весы того же класса точности;

весы лабораторные по ГОСТ 24104-80 3-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 500 г или другие весы того же класса точности;

шкаф сушильный электрический СШ-3М или аналогичных марок;

насос водоструйный или электровакуумный с разрежением 13 Па;

печь муфельную электрическую;

щипцы для тиглей муфельные;

тигли фарфоровые N 3 - 4 по ГОСТ 9147-80;

плитку электрическую;

эксикатор по ГОСТ 25336-82;

стаканчики (бюксы стеклянные) диаметром 3,5, высотой 5 см с крышками по ГОСТ 25336-82;

колбы Бунзена для фильтрования под вакуумом вместимостью 500 см3 по ГОСТ 25336-82;

стаканы химические термостойкие вместимостью 400 см3 по ГОСТ 25336-82;

колбы мерные вместимостью 100, 1000 см3 по ГОСТ 1770-74;

палочки стеклянные длиной 18 - 20 см;

колбы конические вместимостью 300, 500 см3 по ГОСТ 1770-74;

цилиндры мерные вместимостью 10, 100, 1000 см3 по ГОСТ 1770-74;

воронки стеклянные диаметром 7 см по ГОСТ 25336-82;

промывалку лабораторную стеклянную или полиэтиленовую;

трубки стеклянные диаметром 9 - 10 мм и длиной 500 - 600 мм;

воронку Бюхнера диаметром 8 - 10 см по ГОСТ 25336-82;

карандаш восковой;

бумагу фильтровальную по ГОСТ 12026-76 марки ФНБ;

фильтры беззольные, "красная лента", диаметром 11 см;

кислоту серную по ГОСТ 4204-77, х.ч. или ч.д.а., 72%-ный и 75%-ный растворы;

кислоту ортофосфорную по ГОСТ 6552-80, х.ч. или ч.д.а., концентрированную;

кислоту соляную по ГОСТ 3118-77, х.ч. или ч.д.а., 2%-ный раствор;

кальций хлористый технический по ГОСТ 450-77 или кальций хлористый по ГОСТ 4460-77, предварительно прокаленный или аналогичной квалификации;

натрий хлористый по ГОСТ 4233-77, х.ч. или ч.д.а., 0,05%-ный раствор;

ацетон по ГОСТ 2603-79;

бумагу лакмусовую синюю или универсальную;

воду дистиллированную.

3.1. Подготовка проб

Объединенные пробы сена, силоса, сенажа, соломы или зеленых кормов измельчают на отрезки длиной 1 - 3 см. Корнеплоды и клубнеплоды измельчают на пластинки (ломтики) толщиной до 0,8 см.

Из объединенной пробы выделяют среднюю пробу, масса которой после высушивания должна быть не менее 100 г. Высушивание проб проводят в сушильном шкафу при температуре 60 - 65 °C до воздушно-сухого состояния. Воздушно-сухую пробу измельчают на мельнице и просеивают через сито. Трудноизмельчимый остаток на сите после измельчения ножницами или в ступке добавляют к просеянной части и тщательно перемешивают.

Средние пробы комбикормов, зерна, жмыхов, шротов, гранул травяной муки или витаминной муки из древесной зелени размалывают без предварительного подсушивания и просеивают через сито.

Подготовленные пробы хранят в стеклянной или пластмассовой банке с притертой пробкой (крышкой) в сухом месте и используют для проведения испытания.

3.2. Приготовление реактива Джайме - Кнолле

Смешивают 6 объемов 75%-ного раствора серной кислоты и 1 объем концентрированной фосфорной кислоты.

4.1. Навеску испытуемой пробы, взвешенную с погрешностью не более 0,001 г, массой 0,5 - 1 г в зависимости от содержания лигнина помещают в коническую колбу вместимостью 300 см3. В колбу приливают 100 см3 2%-ного раствора соляной кислоты и тщательно перемешивают. Колбу закрывают резиновой пробкой со вставленной в нее стеклянной трубкой и содержимое кипятят на плитке в течение 2 ч, поддерживая равномерное слабое кипение раствора. По истечении указанного времени колбу снимают с плитки, дают содержимому немного остыть и фильтруют через воронку с бумажным фильтром диаметром 10 см. Остаток на фильтре несколько раз промывают водой до исчезновения кислой реакции промывных вод (проба по лакмусу), а затем ацетоном до тех пор, пока фильтрат не станет бесцветным. Неокрашенный остаток промывают ацетоном три раза по 15 см3. Промытый остаток гидролизуют 72%-ным раствором серной кислоты или с помощью реактива Джайме - Кнолле.

4.2. Определение лигнина с использованием 72%-ного раствора серной кислоты

Остаток с фильтра смывают небольшим количеством ацетона в ту же коническую колбу, в которой проводили гидролиз 2%-ным раствором соляной кислоты. Ацетон испаряют на водяной бане при температуре 60 - 70 ° C. В колбу с сухим остатком приливают 7 см3 72%-ного раствора серной кислоты. Смесь тщательно перемешивают стеклянной палочкой до образования однородной пасты и выдерживают при температуре 20 - 23 °C в течение 2,5 ч при периодическом перемешивании. Затем в колбу приливают 93 см3 воды, закрывают ее резиновой пробкой со вставленной в нее стеклянной трубкой, ставят на плитку и поддерживают равномерное кипение в течение 1 ч. Раствор фильтруют под вакуумом через беззольный фильтр, помещенный на воронку Бюхнера. Фильтр предварительно высушивают в течение 1 ч при 130 °C и взвешивают вместе с бюксой.

Остаток на фильтре тщательно отмывают от кислоты горячей водой, к которой для улучшения промывки добавляют 5 г хлористого натрия на 1000 см3 воды. Качество отмывки контролируют по индикатору (лакмусу).

Фильтр с осадком переносят в бюксу, сушат при температуре 105 °C в течение 4 ч, охлаждают в эксикаторе и взвешивают вместе с бюксой. Затем фильтр с осадком помещают в фарфоровый тигель. Тигель необходимо предварительно прокалить в муфельной печи при температуре (525 +/- 25) °C до достижения постоянной массы. Тигель с помещенным в него фильтром с осадком озоляют в муфельной печи при температуре (525 +/- 25) °C до достижения постоянной массы. Тигель с золой охлаждают в эксикаторе и взвешивают.

4.3. Определение лигнина по Джайме - Кнолле

Остаток с фильтром, полученный, как указано в п. 4.1, переносят в стакан вместимостью 400 см3 и приливают 15 см3 реактива Джайме - Кнолле. Содержимое стакана перемешивают, чтобы фильтр с остатком весь пропитался реактивом. Затем стакан помещают в термостат при 40 °C и через 10 мин содержимое перемешивают до исчезновения кусочков фильтровальной бумаги, через 35 мин стакан вынимают и содержимое разбавляют дистиллированной водой до 200 см3, затем кипятят на плитке в течение 30 мин. После кипячения осадку дают осесть в течение 10 мин.

Фильтрование раствора и дальнейший ход анализа проводят, как указано в п. 4.2.

Массовую долю лигнина в испытуемой пробе (X) в процентах вычисляют по формуле

где - масса бюксы с фильтром и лигнином, г;

- масса бюксы с фильтром, г;

- масса тигля с золой, г;

- масса тигля, г;

- масса навески, г.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 0,5% при анализе с использованием для гидролиза 72%-ной серной кислоты и 0,8% - при анализе с использованием реактива Джайме - Кнолле. Результаты определения вычисляют с точностью до второго десятичного знака и округляют до первого десятичного знака.

Массовую долю лигнина в процентах в пересчете на сухое вещество вычисляют по формуле

где X - массовая доля лигнина в испытуемой пробе, %;

W - массовая доля влаги в испытуемой пробе, %.