"ГОСТ 8558.2-78. Государственный стандарт Союза ССР. Продукты мясные. Метод определения нитрата"
(утв. и введен в действие Постановлением Госстандарта СССР от 16.11.1978 N 3003)
(ред. от 01.06.1990)

1. Разработан и внесен Министерством мясной и молочной промышленности СССР.

Разработчики:

А.Г. Волкова, Н.Г. Тайх.

2. Утвержден и введен в действие Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 16.11.78 N 3003.

3. Стандарт полностью соответствует международному стандарту ИСО 3091-75.

4. Взамен ГОСТ 8558-68 в части определения нитрата.

5. Ссылочные нормативно-технические документы.

6. Срок действия продлен до 01.01.96 Постановлением Государственного комитета СССР по управлению качеством продукции и стандартам N 1825 от 25.06.90.

7. Переиздание (июнь 1993 г.) с Изменениями 1, 2, 3, утвержденными в июле 1982 г., сентябре 1985 г. (ИУС 10-82, 12-85, 10-90).

Настоящий стандарт распространяется на мясные продукты всех видов, а также рассолы и посолочные смеси и устанавливает метод определения нитрата.

Метод основан на восстановлении нитрата до нитрита с помощью кадмиевой колонки, фотометрическом измерении интенсивности окраски, образующейся при взаимодействии сульфаниламида и N-(1-нафтил) этилендиамин дигидрохлорида с нитритом, определении количества последнего и пересчете его на нитрат за вычетом нитрита, содержащегося в продукте.

Стандарт полностью соответствует международному стандарту ИСО 3091-75.

1.1. Пробы колбасных изделий, продуктов из свинины, говядины, баранины, мяса птицы отбирают по ГОСТ 9792-73.

1.2. Пробы консервов отбирают по ГОСТ 8756.0-70.

1.3. Рассол для анализа отбирают в количестве 500 см3.

1.4. Пробы посолочной смеси отбирают от 1% упаковочных единиц (но не менее чем от трех упаковочных единиц) общей массой не менее 500 г.

1.5. Пробы к анализу готовят следующим образом. С колбасных изделий снимают оболочку; с фаршированных колбас и языков в шпике - поверхностный слой шпика и оболочки; с окороков, лопаток, рулетов, корейки и грудинки - поверхностный слой шпика; затем пробы дважды пропускают через мясорубку с отверстиями решетки диаметром от 3 до 4 мм.

Продукты, состоящие из шпика с промежуточными слоями мышечной ткани (ветчина в форме, прессованный бекон и аналогичные им), измельчают полностью.

Полученный фарш тщательно перемешивают, помещают в стеклянную или пластмассовую банку вместимостью от 200 до 400 см3, заполнив ее, и закрывают крышкой.

1.6. Пробу хранят при (4 +/- 2) °C до окончания анализа. Анализ проводят не позднее чем через 24 ч после отбора проб. Пробу сырых продуктов анализируют сразу после измельчения.

Мясорубка бытовая по ГОСТ 4025-83 или электрическая бытовая по ГОСТ 20469-81 с диаметром отверстий в решетке от 3 до 4 мм.

Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104-88 с наибольшим пределом взвешивания 200 г, второго класса точности.

Гомогенизатор.

Баня водяная.

Колбы мерные по ГОСТ 1770-74, 1-100-2 или 2-100-2; 1-200-2 или 2-200-2; 1-250-2 или 2-250-2; 1-500-2 или 2-500-2; 1-1000-2 или 2-1000-2.

Воронки по ГОСТ 25336-82, В-36-80; В-100-150 ХС.

Пипетки по НТД.

Чашка по ГОСТ 25336-82, ЧКЦ-1-1000 или ЧКЦ-2-1000 или ЧКЦ-1-2500 или ЧКЦ-2-2500.

Колонка стеклянная редукционная.

Стакан по ГОСТ 25336-82, В-1-250 или Н-1-250 ТХС.

Фильтры бумажные.

Колориметр фотоэлектрический лабораторный, обеспечивающий измерения в интервалах длин волн 490 - 590 нм, или спектрофотометр для измерения в видимой области спектра.

Калий железистосинеродистый по ГОСТ 4207-75, ч.д.а.

Цинк металлический гранулированный по ТУ 6-09-5294-86.

Цинк уксуснокислый по ГОСТ 5823-78, ч.д.а.

Кислота уксусная ледяная по ГОСТ 61-75, х.ч.

Натрий тетраборнокислый (бура) по ГОСТ 4199-76, ч.д.а.

Кадмий сернокислый по ГОСТ 4456-75.

Кислота соляная по ГОСТ 3118-77, ч.д.а., концентрированная (плотность 1,19 г/см3), 0,1 моль/дм3 раствор.

Соль динатриевая этилендиамин-N, N, N', N'-тетрауксусной кислоты, 2-водная (трилон Б) по ГОСТ 10652-73.

Аммиак водный по ГОСТ 3760-79.

Натрий азотнокислый по ГОСТ 4197-74, ч.д.а.

Стрептоцид белый (сульфаниламид).

Калий азотнокислый по ГОСТ 4217-77.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72.

N-(1-нафтил) этилендиамин дигидрохлорид.

Вата стеклянная.

(Измененная редакция, Изм. N 1, 2, 3).

3.1. Растворы для осаждения белков

3.1.1. Реактив Карреза 1. 106 г железистосинеродистого калия растворяют в воде и доводят объем раствора до 1000 см3. Реактив хранят в склянке из темного стекла не более месяца.

3.1.2. Реактив Карреза 2. 220 г уксуснокислого цинка и 30 см3 ледяной уксусной кислоты растворяют в воде и доводят объем раствора до 1000 см3. Реактив хранят не более месяца.

3.1.3. Насыщенный раствор буры. 50 г тетраборнокислого натрия растворяют в 1000 см3 воды с температурой (50 +/- 2) °C и охлаждают до температуры (20 +/- 2) °C.

3.2. Раствор сернокислого кадмия. 37 г сернокислого кадмия растворяют в воде и разбавляют водой до 1000 см3.

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.3. Аммонийный буфер (pH 9,6 - 9,7). 20 см3 концентрированной соляной кислоты растворяют в 500 см3 воды, перемешивают, добавляют 10 г трилона Б и 55 см3 концентрированного аммиака, доливают водой до 1000 см3, перемешивают и проверяют pH.

3.4. Растворы для проведения цветной реакции

3.4.1. Раствор 1. 2 г сульфаниламида растворяют в 400 см3 раствора соляной кислоты (1:1) и доводят раствором соляной кислоты до объема 1000 см3.

(Измененная редакция, Изм. N 1).

3.4.2. (Исключен, Изм. N 1).

3.4.3. Раствор 2. 0,25 г N-(1-нафтил) этилендиамин дигидрохлорида растворяют в воде, доливают водой до 250 см3 и перемешивают. Реактив хранят в темной склянке в холодильнике не более месяца.

(Измененная редакция, Изм. N 1).

3.5. Стандартный раствор азотнокислого калия. 1,465 г азотнокислого калия растворяют в воде и доводят водой до 100 см3. 5 см3 полученного раствора пипеткой наливают в мерную колбу вместимостью 1000 см3 и доводят водой до метки.

Полученный раствор содержит в 1 см3 73,25 мкг азотнокислого калия. Раствор готовят в день проведения анализа.

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.6. Приготовление губчатого кадмия

Цинковые гранулы средней величины (100 - 120 шт.) распределяют по дну кристаллизатора диаметром от 25 до 30 см и заливают раствором сернокислого кадмия, через 3 - 4 ч осадок кадмия отделяют от цинка и помещают в стакан с водой, избегая соприкосновения с воздухом, и дважды промывают водой.

Осадок кадмия и 400 см3 раствора соляной кислоты помещают в гомогенизатор и измельчают 10 с. Измельченный кадмий переносят в стакан и отмывают водой от пылевидных частиц. После этого его оставляют на ночь в 0,1 моль/дм3 растворе соляной кислоты, перемешивают несколько раз для удаления всех пузырьков газа из кадмия. Кадмий необходимо хранить под слоем воды.

3.7. Подготовка редукционной колонки

Дно редукционной колонки (см. черт. 1 Приложения), имеющей поперечное сечение 7 мм, воронкообразное расширение (d = 20 мм), пришлифованный край внизу и капилляр (d = 3 мм) покрывают тонким слоем стеклянной ваты, предварительно смоченной водой. Колонку заполняют водой и промытым губчатым кадмием на высоту 170 мм. Слой кадмия во время заполнения периодически перемешивают стальной проволокой, чтобы в колонке не оставалось пузырьков воздуха.

Скорость потока жидкости из колонки не должна превышать 3 см3/мин.

Перед употреблением редукционную колонку промывают последовательно 25 см3 раствора соляной кислоты, 50 см3 воды и 25 см3 разбавленного 1:9 аммонийного буфера. Уровень жидкости всегда должен быть выше кадмия.

Проверяют восстановительную способность редукционной колонки согласно пп. 4.3 и 4.4, используя вместо испытуемого обезбелоченного фильтрата стандартный раствор азотнокислого калия.

Если концентрация нитрита в растворе по градуировочному графику будет ниже 0,9 мкг нитрита в 1 см3 (т.е. 90% теоретического значения), то редукционную колонку нельзя использовать для анализа. Необходимо кадмий перенести в химический стакан и залить на ночь 0,1 моль/дм3 раствором соляной кислоты, промыть его водой и подготовить колонку по п. 3.7.

3.8. Стандартные растворы азотистокислого натрия. Для приготовления основного раствора азотистокислого натрия отвешивают навеску реактива, содержащую точно 1 г азотистокислого натрия, растворяют в воде, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 500 см3, доводят водой до метки и перемешивают.

Пример расчета. При использовании азотисто-кислого натрия х.ч. массу навески (X) в граммах вычисляют по формуле

где 99 - масса основного вещества в 100 г реактива.

Для приготовления рабочего раствора 25 см3 основного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3, доводят водой до метки и перемешивают.

Из полученного рабочего раствора готовят серию стандартных растворов. 2; 5 и 10 см3 рабочего раствора пипеткой вносят в три мерные колбы вместимостью 100 см3, доводят водой до метки и перемешивают.

Полученные стандартные растворы содержат в 1 см3 соответственно 1; 2,5 и 5 мкг азотистокислого натрия.

Готовят три серии стандартных растворов, начиная каждый раз с приготовления основного раствора азотистокислого натрия из новой навески.

Стандартные растворы азотистокислого натрия не стойки и их готовят непосредственно перед построением градуировочного графика.

3.7. 3.8. (Измененная редакция, Изм. N 2).

3.9. Построение градуировочного графика

3.9.1. В четыре мерные колбы вместимостью 100 см3 пипеткой вносят: в первую колбу для приготовления раствора сравнения 10 см3 воды, а в остальные - по 10 см3 стандартных растворов, содержащих 1,0; 2,5 и 5,0 мкг азотистокислого натрия в 1 см3 раствора.

3.9.2. В каждую колбу добавляют по 50 см3 воды и 10 см3 раствора 1 для проведения цветной реакции. Растворы в колбах перемешивают и выдерживают в темноте при (20 +/- 2) °C 5 мин, добавляют 2 см3 раствора 2 для проведения цветной реакции, перемешивают и выдерживают в темноте при (20 +/- 2) °C 3 мин. Растворы в колбах доводят водой до метки и перемешивают. Измеряют интенсивность красной окраски раствора на фотоэлектроколориметре с зеленым светофильтром или спектрофотометре, при длине волны 538 нм в кювете с толщиной поглощающего свет слоя 1 см в отношении раствора сравнения.

(Измененная редакция, Изм. N 1, 2).

3.9.3. По полученным средним данным из трех стандартных растворов строят на миллиметровой бумаге размером 25 x 25 см градуировочный график.

На оси абсцисс откладывают концентрацию азотистокислого натрия (мкг в 1 см3 окрашенного раствора); на оси ординат - соответствующую оптическую плотность.

Градуировочный график должен проходить через начало координат. Пример градуировочного графика дан на черт. 2 обязательного Приложения.

4.1. 10 г подготовленной к анализу пробы, взвешенной с погрешностью не более 0,001 г, помещают в мерную колбу вместимостью 200 см3. В колбу с навеской добавляют последовательно 5 см3 насыщенного раствора буры и 100 см3 воды с температурой (75 +/- 2) °C.

Колбу с содержимым нагревают на кипящей водяной бане 15 мин, периодически встряхивая, затем охлаждают до (20 +/- 2) °C и, тщательно перемешивая, последовательно добавляют по 2 см3 реактива Карреза 1 и реактива Карреза 2, затем доводят до метки и выдерживают 30 мин при (20 +/- 2) °C. Затем содержимое колбы фильтруют через складчатый бумажный фильтр.

Параллельно проводят контрольный анализ на реактивы, помещая в мерную колбу вместимостью 200 см3 вместо испытуемой пробы 10 см3 воды.

4.2. В полученном фильтрате определяют массовую долю нитрита по ГОСТ 8558.1-78 и массовую долю нитрата .

4.3. Для определения содержания нитрата 20 см3 фильтрата пипеткой наливают в резервуар колонки и сразу же добавляют 5 см3 аммонийного буфера.

Вытекающий из колонки раствор собирают в мерную колбу вместимостью 100 см3, промывая колонку водой. Затем доводят уровень жидкости до метки и перемешивают.

4.4. В мерную колбу вместимостью 100 см3 вносят не более 20 см3 полученного из колонки раствора и доливают водой до объема не более 60 см3. Добавляют 10 см3 раствора 1 для проведения цветной реакции. Раствор перемешивают и выдерживают в темном месте при (20 +/- 2) °C 5 мин. Затем добавляют 2 см3 раствора 2 для проведения цветной реакции, перемешивают и ставят в темное место на 3 мин. Доводят раствор до метки, перемешивают и измеряют интенсивность красной окраски раствора на фотоэлектроколориметре с зеленым светофильтром или спектрофотометре при длине волны 538 нм в кювете с толщиной поглощающего свет слоя 1 см в отношении раствора сравнения.

Если оптическая плотность окрашенного раствора превышает максимальное значение оптической плотности по градуировочному графику, то цветную реакцию проводят с меньшей порцией раствора.

(Измененная редакция, Изм. N 1, 2).

Массовую долю нитрата в процентах вычисляют по формуле

где M - массовая концентрация нитрита в 1 см3 окрашенного раствора, найденная по градуировочному графику, мкг;

m - навеска продукта, г;

- количество раствора, взятое для цветной реакции, см3;

- массовая доля нитрита в образце, %;

- коэффициент перевода в граммы;

1,465 - коэффициент пересчета нитрита на нитрат калия или

1,23 - коэффициент пересчета нитрита на нитрат натрия.

За окончательный результат испытаний принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений и вычисляют с точностью до 0,0001%.

Предел возможных значений относительной погрешности измерений - 2% при вероятности 0,95.

(Измененная редакция, Изм. N 2).

Расхождение между двумя параллельными определениями (т.е. выполненными одним аналитиком одновременно или непосредственно одно за другим) не должно превышать 0,0005%.

Расхождение между результатами, полученными в двух разных лабораториях, не должно превышать 0,001%.

Раздел 6. (Введен дополнительно, Изм. N 2).