"ФС.2.1.0438. Фармакопейная статья. Клоназепам"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание")

7-Нитро-5-(2-хлорфенил)-1,3-дигидро-2H-1,4-бензодиазепин-2-он.

Содержит не менее 99,0% и не более 101,0% клоназепама C₁₅H₁₀ClN₃O₃ в пересчете на сухое вещество.

Описание. Белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в спирте 96% и метаноле, практически нерастворим в воде.

ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца клоназепама.

Температура плавления. От 237 до 241 °C (с разложением, ОФС "Температура плавления", метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 0,3 г субстанции в 10 мл ацетона должен быть прозрачным. При возникновении голубого окрашивания раствор оставляют на 2 ч; раствор должен обесцветиться. Полученный раствор должен выдерживать сравнение с эталоном I (ОФС "Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей").

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании "Прозрачность раствора", должен выдерживать сравнение с эталоном BY₆ (ОФС "Степень окраски жидкостей", метод 2).

pH. От 4,5 до 7,0 (ОФС "Ионометрия", метод 3). К 0,5 г субстанции прибавляют 50 мл воды, встряхивают в течение 15 мин и фильтруют через бумажный фильтр с размером пор 12 - 15 мкм.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Буферный раствор. Растворяют 6,6 г аммония фосфата в 900 мл воды и доводят значение pH фосфорной кислотой разведенной 10% или натрия гидроксида раствором 1 М до 8,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Тетрагидрофуран - метанол - буферный раствор 100:420:480.

Растворитель. Тетрагидрофуран - метанол - вода 100:420:480.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объем раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси B. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси B клоназепама, растворяют в растворителе и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца клоназепама, 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси A и 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси B, растворяют в растворителе и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объем раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A: (2-амино-5-нитрофенил)(2-хлорфенил)метанон [2011-66-7].

Примесь B: 3-амино-6-нитро-4-(2-хлорфенил)хинолин-2(1H)-он [55198-89-5].

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси B, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Клоназепам - 1 (около 7 мин); примесь B - около 2,1; примесь A - около 2,4.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A и B используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R_S) между пиками примеси A и примеси B должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика клоназепама должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2%);

- примесь B - не более 0,1%.

Содержание примеси B в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика примеси B на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика примеси B на хроматограмме раствора стандартного образца примеси B;

a₁ - навеска субстанции, мг;

a₀ - навеска стандартного образца примеси B клоназепама, мг;

P - содержание примеси B в стандартном образце примеси B клоназепама, %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС "Потеря в массе при высушивании", способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,002%. Определение проводят в соответствии с ОФС "Тяжелые металлы" (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

Определение проводят методом титриметрии (ОФС "Титриметрия (титриметрические методы анализа)").

Растворяют 0,275 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС "Потенциометрическое титрование").

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 31,57 мг клоназепама C₁₅H₁₀ClN₃O₃.

В герметично укупоренной упаковке, в защищенном от света месте.