"ФС.2.1.0444. Фармакопейная статья. Леналидомид"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание")

(3RS)-3-(4-Амино-1-оксо-1,3-дигидро-2H-изоиндол-2-ил)пиперидин-2,6-дион.

Содержит не менее 99,0% и не более 101,0% леналидомида C₁₃H₁₃N₃O₃ в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Описание. Кристаллический порошок от белого до светло-желтого цвета.

Растворимость. Легко растворим или растворим в диметилсульфоксиде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

1. ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца леналидомида.

2. Спектрофотометрия (ОФС "Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях").

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 мг субстанции, растворяют в 80 мл диметилсульфоксида и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 до 400 нм должен иметь максимумы при 259 нм и 315 нм и минимум при 280 нм.

Угол вращения. От -0,1° до +0,1° (1% раствор субстанции в диметилсульфоксиде при длине кюветы 2 дм, ОФС "Оптическое вращение").

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 1,08 г натрия октансульфоната и 1,36 г калия дигидрофосфата в 800 мл воды, доводят значение pH до 2,5 фосфорной кислотой концентрированной, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил - метанол 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 40 мг субстанции, прибавляют 40 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М, обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин, охлаждают до комнатной температуры, доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки и фильтруют. Срок годности раствора - 2 ч при комнатной температуре или 10 ч при температуре 5 +/- 3 °C.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки. Срок годности раствора - 6 ч.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Выдерживают 5,0 мл испытуемого раствора при температуре 80 °C в течение 5 часов. Срок годности раствора - 2 сут.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки. Срок годности раствора - 6 ч.

Примечание

Примесь 1: (2RS)-5-амино-2-(4-амино-1-оксо-1,3-дигидро-2H-изоиндол-2-ил)-5-оксопентановая кислота [2197420-75-8].

Примесь 2: (4RS)-5-амино-4-(4-амино-1-оксо-1,3-дигидро-2H-изоиндол-2-ил)-5-оксопентановая кислота [2197414-57-4].

Примесь 3: (2RS)-2-(4-амино-1-оксо-1,3-дигидро-2H-изоиндол-2-ил)пентандиовая кислота [295357-66-3].

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Леналидомид - 1 (около 14 мин); примесь 1 - около 0,63; примесь 2 - около 0,75; примесь 3 - около 0,89.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика леналидомида должно быть не менее 10,0.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R_S) между пиками примеси 3 и леналидомида должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (A_S) леналидомида должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика леналидомида должно быть не более 2,0% (6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчета содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь 1 - 1,9; примесь 2 - 1,8; примесь 3 - 1,9.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей 1, 2 и 3 не должна превышать площадь пика леналидомида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика леналидомида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика леналидомида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05%).

Вода. Не более 0,5% (ОФС "Определение воды", метод 1 или метод 2, с использованием испарителя). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции. При использовании метода 2 устанавливают температуру 150 °C и скорость потока 60 +/- 10 мл/мин.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,002%. Определение проводят в соответствии с ОФС "Тяжелые металлы" (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании "Сульфатная зола", с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

Определение проводят методом титриметрии (ОФС "Титриметрия (титриметрические методы анализа)").

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты ледяной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС "Потенциометрическое титрование").

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 25,93 мг леналидомида C₁₃H₁₃N₃O₃.

В защищенном от света месте.