"ФС.2.1.0605. Фармакопейная статья. Йопромид"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание)

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

N¹,N³-Бис[(2RS)-2,3-дигидроксипропил]-2,4,6-трииод-N¹-метил-5-(2-метоксиацетамидо)бензол-1,3-дикарбоксамид.

Содержит не менее 97,0% и не более 102,5% йопромида C₁₈H₂₄I₃N₃O₈ в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. От белого до светло-желтого цвета порошок.

<*> Смесь диастереоизомеров и атропоизомеров.

--------------------------------

<*> Приводится для информации.

Растворимость. Легко растворим в воде и диметилсульфоксиде, практически нерастворим в спирте 96%.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца йопромида.

ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность раствора. Раствор 16,5 г субстанции в 20 мл воды, свободной от диоксида углерода, приготовленный при нагревании на водяной бане при температуре не выше 70 °C, после охлаждения должен быть прозрачным (ОФС "Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей").

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании "Прозрачность раствора", должен выдерживать сравнение с эталоном B₆, BY₆ или Y₆ (ОФС "Степень окраски жидкостей", метод 2).

pH. От 5,2 до 6,5 (раствор, полученный в испытании "Прозрачность раствора", ОФС "Ионометрия", метод 3).

1. Примесь A и первичные ароматичные амины. Не более 0,01%. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС "Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях").

Все растворы защищают от действия света, все временные параметры являются критическими для результатов испытания. Испытуемый и контрольный растворы и раствор стандартного образца примеси A йопромида должны обрабатываться параллельно.

Раствор нафтилэтилендиамина дигидрохлорида. Растворяют 10 мг нафтилэтилендиамина дигидрохлорида в смеси 3,0 мл воды и 7,0 мл пропиленгликоля.

Раствор сульфаминовой кислоты. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 80,0 г сульфаминовой кислоты, растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 20 мл воды и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси A йопромида. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца примеси A йопромида (5-амино-N¹,N³-бис(2,3-дигидроксипропил)-2,4,6-трииод-N¹-метилбензол-1,3-дикарбоксамид [154361-51-0]) растворяют в 5,0 мл воды. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и прибавляют 18,0 мл воды.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 20,0 мл воды.

Испытуемый раствор, раствор стандартного образца примеси A йопромида и раствор сравнения охлаждают на ледяной бане в течение 5 мин. К каждому раствору прибавляют 1,0 мл хлористоводородной кислоты 25% и охлаждают на ледяной бане в течение 5 мин. К растворам прибавляют по 1,0 мл натрия нитрита раствора 2%, встряхивают, охлаждают на ледяной бане в течение 5 мин, прибавляют 0,5 мл раствора сульфаминовой кислоты и встряхивают в течение 5 мин периодически, открывая колбы для выхода выделяющегося газа. К каждому раствору прибавляют по 1,0 мл раствора нафтилэтилендиамина дигидрохлорида, встряхивают, охлаждают до комнатной температуры, выдерживают в течение 10 мин и доводят объемы растворов водой до метки. Растворы дегазируют на ультразвуковой бане в течение 1 мин.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора и раствора стандартного образца примеси A йопромида на спектрофотометре при длине волны 495 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения не позднее, чем через 5 мин после приготовления.

Испытание действительно, если поглощение раствора стандартного образца примеси A йопромида не менее 0,08.

Поглощение испытуемого раствора не должно превышать поглощение раствора стандартного образца примеси A йопромида.

2. Примесь B. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Растворитель. Вода - Метанол 50:50.

Подвижная фаза (ПФ). Хлороформ - метанол - вода 6:59:900. К смеси 6 г хлороформа и 59 г метанола прибавляют небольшими порциями 900 мл воды и перемешивают до получения гомогенного раствора (в течение не менее 2 ч).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 40 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,5 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 40 мг фармакопейного стандартного образца йопромида, растворяют в растворителе и доводят объем раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь B: 5-ацетамидо-N¹,N³-бис(2,3-дигидроксипропил)-2,4,6-трииод-N¹-метилбензол-1,3-дикарбоксамид [76350-28-2].

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Изомер Z₂ йопромида - 1 (около 34 мин); изомер Y₁ примеси B - около 0,28; изомер Y₂ примеси B - около 0,31.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков изомеров Y₁, Y₂ примеси B используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу йопромида.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны быть видны 2 пика изомеров примеси B.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора сумма площадей пиков изомеров Y₁ и Y₂ примеси B не должна превышать сумму площадей 2 основных пиков на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,5%).

3. Другие примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС "Тонкослойная хроматография").

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F₂₅₄.

Растворитель. Метанол - вода 50:50.

Раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,70 г железа хлорида гексагидрата, растворяют в хлористоводородной кислоте разведенной 7,3% и доводят тем же растворителем до метки. Раствор хранят в холодильнике.

Раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,50 г калия феррицианида, растворяют в небольшом количестве воды и доводят тем же растворителем до метки. Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Раствор В. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 г натрия арсенита, растворяют в 30 мл натрия гидроксида растворе 1 М при температуре 0 °C и прибавляют 65 мл хлористоводородной кислоты разведенной 7,3%. Раствор хранят в холодильнике.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения А и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения В. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл раствора сравнения А и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения Г. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения А и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца йопромида для проверки пригодности хроматографической системы (содержит примеси B и E) в 50 мкл растворителя.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы, содержащей примеси B, C, D, F. Растворяют содержимое флакона с фармакопейным стандартным образцом йопромида для проверки пригодности хроматографической системы (содержит примеси B, C, D, F) в 50 мкл растворителя.

Реактив для детектирования. Раствор В - раствор Б - раствор А 1:5:5. Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Примечание

Примесь B: 5-ацетамидо-N¹,N³-бис(2,3-дигидроксипропил)-2,4,6-трииод-N¹-метилбензол-1,3-дикарбоксамид [76350-28-2].

Примесь C: 5-(2-гидроксиацетамидо)-N¹,N³-бис(2,3-дигидроксипропил)-2,4,6-трииод-N¹-метилбензол-1,3-дикарбоксамид [154361-52-1].

Примесь D: 5-[N-(2-гидрокси-3-{3-[(2,3-дигидроксипропил)(метил)карбамоил]-2,4,6-трииод-5-(2-метоксиацетамидо)бензамидо}пропил)-2-метоксиацетамидо]-N¹,N³-бис(2,3-дигидроксипропил)-2,4,6-трииод-N¹-метилбензол-1,3-дикарбоксамид [154361-55-4].

Примесь E: (2-гидрокси-3-{3-[(2,3-дигидроксипропил)карбамоил]-2,4,6-трииод-N¹-метил-5-(2-метоксиацетамидо)бензамидо}пропил){3-[(2,3-дигидроксипропил)карбамоил]-2,4,6-трииод-5-(3-метокси-2-оксопропил)бензоат} [154397-78-1].

Примесь F: N¹-{[2-(гидроксиметил)-2-метил-1,3-диоксолан-4-ил]метил}-N³-(2,3-дигидроксипропил)-2,4,6-трииод-N¹-метил-5-(2-метоксиацетамидо)бензол-1,3-дикарбоксамид [154361-54-3].

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор 13,5 М - вода - диоксан 4:15:85.

На линию старта хроматографической пластинки наносят по 2 мкл испытуемого раствора (200 мкг), раствора сравнения Б (1 мкг), раствора сравнения Г (0,2 мкг) и раствора для проверки пригодности хроматографической системы (содержащей примеси B и E). Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт подвижной фазы пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 120 °C в течение 30 мин, выдерживают в УФ-свете при длине волны 254 нм в течение 2 - 5 мин до появления основных зон адсорбции желтого цвета, опрыскивают реактивом для детектирования и немедленно просматривают при видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы (содержащей примеси B и E) должны обнаруживаться 3 раздельные зоны адсорбции в следующей последовательности по возрастанию R_f, примесь B, йопромид, примесь E.

Фактор удерживания соединений (R_f). Йопромид - около 0,34; примесь B - около 0,26; примесь E - около 0,41.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции примеси E по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать основную зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,5%).

На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой другой примеси по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать основную зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения Г (не более 0,10%).

Зону адсорбции примеси B не учитывают.

Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота безводная - вода - метанол - хлороформ 2:6:32:62.

На линию старта хроматографической пластинки наносят по 2 мкл испытуемого раствора (200 мкг), раствора сравнения А (2 мкг), раствора сравнения Б (1 мкг), раствора сравнения В (0,4 мкг), раствора сравнения Г (0,2 мкг) и раствора для проверки пригодности хроматографической системы, содержащей примеси B, C, D, F. Пластинку с нанесенными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ. Когда фронт ПФ пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 120 °C в течение 30 мин и немедленно просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм. Затем пластинку помещают на 30 мин в камеру, насыщенную парами аммиака, сушат в струе воздуха в течение 10 мин, выдерживают в УФ-свете при длине волны 254 нм в течение 2 - 5 мин до появления основных зон адсорбции желтого цвета, опрыскивают реактивом для детектирования и немедленно просматривают при видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы, содержащей примеси B, C, D, F, должны обнаруживаться 5 раздельных зон адсорбции в следующей последовательностями по возрастанию R_f: примесь C, примесь D, примесь B, йопромид, примесь F.

Фактор удерживания соединений (R_f). Йопромид - около 0,43; примесь C - около 0,23; примесь D - около 0,29; примесь B - около 0,36; примесь F - около 0,71.

На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции примеси D по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать основную зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения А (не более 1,0%).

На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции примеси C по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать основную зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,5%).

На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции примеси F по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать основную зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения В (не более 0,2%).

Любая другая зона адсорбции по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать основную зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения Г (не более 0,10%).

Зону адсорбции примеси B не учитывают.

Изомерный состав. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания "Количественное определение".

Суммарное содержание изомеров E₁ и Z₁ йопромида (X₁) и изомеров E₂ и Z₂ йопромида (X₂) в субстанции в процентах вычисляют по формулам:

где S_E1 - площадь пика изомера E₁ йопромида на хроматограмме испытуемого раствора;

S_Z1 - площадь пика изомера Z₁ йопромида на хроматограмме испытуемого раствора;

S_E2 - площадь пика изомера E₂ йопромида на хроматограмме испытуемого раствора;

S_Z2 - площадь пика изомера Z₂ йопромида на хроматограмме испытуемого раствора.

- суммарное содержание изомеров E₁ и Z₁ от 40,0% до 51,0%;

- суммарное содержание изомеров E₂ и Z₂ от 49,0% до 60,0%.

Йод. Около 2,0 г субстанции помещают в пробирку с притертой пробкой, растворяют в 20 мл воды, прибавляют 2 мл серной кислоты разведенной 9,8%, 2 мл толуола и встряхивают. Слой толуола должен оставаться бесцветным.

Йодиды. Не более 0,0002%. Определение проводят методом титриметрии (ОФС "Титриметрия (титриметрические методы анализа)").

Испытуемый раствор. Растворяют 10,0 г (точная навеска) субстанции в 50 мл воды, свободной от диоксида углерода, доводят pH раствора до 3 - 4, прибавляя 0,15 мл серной кислоты раствора 0,05 М. Полученный раствор титруют потенциометрически 0,001 М раствором серебра нитрата. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС "Потенциометрическое титрование") с использованием серебряного электрода в качестве индикаторного и хлорсеребряного электрода сравнения.

На титрование должно израсходоваться не более 0,15 мл 0,001 М раствора серебра нитрата.

Вода. Не более 1,5% (ОФС "Определение воды", метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС "Тяжелые металлы" (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

Бактериальные эндотоксины. Не более 1,0 ЕЭ на 1 г йопромида (ОФС "Бактериальные эндотоксины").

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания "Родственные примеси. Примесь B" со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца йопромида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 40 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца йопромида, растворяют в 15 мл растворителя и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для идентификации изомеров. В герметичной емкости нагревают 2 мл раствора стандартного образца йопромида при температуре 120 °C в течение 15 мин.

Хроматографируют раствор стандартного образца йопромида, раствор для идентификации изомеров и испытуемый раствор.

Идентификация изомеров. Два основных пика на хроматограмме раствора стандартного образца йопромида принадлежат изомерам Z₁ и Z₂ йопромида. Два пика, которые на хроматограмме раствора для идентификации пиков имеют больший размер, чем на хроматограмме раствора стандартного образца йопромида, принадлежат изомерам E₁ и E₂ йопромида.

Относительное время удерживания соединений. Изомер йопромида Z₂ (около 34 мин); йопромида изомер E₁ - около 0,70; йопромида изомер E₂ - около 0,75; йопромида изомер Z₁ - около 0,85.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца йопромида разрешение (R_s) между пиками изомеров Z₁ и Z₂ йопромида на хроматограмме должно быть не менее 2,0.

Содержание йопромида C₁₈H₂₄I₃N₃O₈ в субстанции в процентах в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - сумма площадей пиков изомеров E₁, E₂, Z₁ и Z₂ йопромида на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - сумма площадей пиков изомеров E₁, E₂, Z₁ и Z₂ йопромида на хроматограмме раствора стандартного образца йопромида;

a₁ - навеска субстанции, мг;

a₀ - навеска фармакопейного стандартного образца йопромида, мг;

P - содержание йопромида в фармакопейном стандартном образце йопромида, %;

W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.