"ФС.2.1.0621. Фармакопейная статья. Помалидомид"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание")

(3RS)-4-Амино-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-1,3-дион.

Содержит не менее 98,0% и не более 102,0% помалидомида C₁₃H₁₁N₃O₄ в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Описание. Желтый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в диметилсульфоксиде, практически нерастворим в воде.

1. ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см^-1, снятый в диске с калия бромидом, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца помалидомида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика помалидомида на хроматограмме раствора стандартного образца помалидомида (раздел "Количественное определение").

Угол вращения. От -0,5° до +0,5° (1% раствор субстанции в диметилсульфоксиде, ОФС "Оптическое вращение").

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Все растворы защищают от света и хранят при температуре 2 - 8 °C не более 8 ч.

Подвижная фаза А (ПФА). Фосфорная кислота разведенная 0,1%.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Подвижная фаза В (ПФВ). Метанол.

Растворитель. Вода - ацетонитрил 1:1.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, прибавляют 80 мл растворителя, выдерживают на ультразвуковой бане до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси 5. Готовят раствор фармакопейного стандартного образца примеси 5, в растворителе с концентрацией 6 мкг/мл.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2 мг субстанции, прибавляют 16 мл растворителя, выдерживают на ультразвуковой бане до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 1,0 мл раствора стандартного образца примеси 5 и доводят объем раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объем раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь 1: 3-аминобензол-1,2-дикарбоновая кислота (3-аминофталевая кислота) [5434-20-8].

Примесь 2: 4-амино-2-(4-амино-1,3-диоксо-1,3-дигидро-2H-изоиндол-2-ил)-5-оксопентановая кислота [2635-64-5].

Примесь 3: 4-амино-4-(4-амино-1,3-диоксо-1,3-дигидро-2H-изоиндол-2-ил)-5-оксопентановая кислота [918314-45-1].

Примесь 4: 4-амино-5-гидрокси-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-1,3-дион [1547162-41-3].

Примесь 5 (талидомид): 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-1,3-дион [50-35-1].

Примесь 6: 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-4-нитро-2,3-дигидро-1H-изоиндол-1,3-дион [19171-18-7].

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Помалидомид - 1 (около 21 мин); примесь 1 - около 0,33; примесь 2 - около 0,48; примесь 3 - около 0,53; примесь 4 - около 0,82; примесь 5 - около 1,06; примесь 6 - около 1,08.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R_S) между пиками помалидомида и примеси 5 должно быть не менее 4,5.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика помалидомида должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (A_S) помалидомида должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика помалидомида должно быть не более 5,0% (6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчета содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь 1 - 1,59; примесь 2 - 1,32; примесь 3 - 1,28; примесь 4 - 1,16; примесь 5 - 0,62; примесь 6 - 1,16.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика помалидомида на хроматограмме раствора сравнения.

- примесь 1, 2, 3, 4, 5 и 6 - не более 0,15% каждая;

- любая другая примесь - не более 0,10%;

- сумма примесей - не более 0,5%.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05%).

Вода. Не более 0,5% (ОФС "Определение воды", метод 1, методика Б). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС "Тяжелые металлы" (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил - фосфорная кислота разведенная 0,1% 300:700.

Растворитель. Вода - ацетонитрил 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 40 мл растворителя, выдерживают на ультразвуковой бане до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки. Срок годности раствора - 24 ч.

Раствор стандартного образца помалидомида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца помалидомида, прибавляют 40 мл растворителя, выдерживают на ультразвуковой бане до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки. Срок годности раствора - 24 ч.

Хроматографируют раствор стандартного образца помалидомида и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца помалидомида:

- фактор асимметрии пика (A_S) помалидомида должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика помалидомида должно быть не более 2,0% (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику помалидомида, должна составлять не менее 5000 теоретических тарелок.

Содержание помалидомида C₁₃H₁₁N₃O₄ в субстанции в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S₁ - площадь пика помалидомида на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика помалидомида на хроматограмме раствора стандартного образца помалидомида;

a₁ - навеска субстанции, мг;

a₀ - навеска фармакопейного стандартного образца помалидомида, мг;

W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;

P - содержание помалидомида в фармакопейном стандартном образце помалидомида, %.

В защищенном от света месте.