"ФС.2.1.0159. Фармакопейная статья. Пиридоксина гидрохлорид. Пиридоксин"
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 N 377)
("Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание")

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

4,5-Бис(гидроксиметил)-2-метилпиридин-3-ола гидрохлорид.

Содержит не менее 99,0% и не более 101,0% пиридоксина гидрохлорида C₈H₁₁NO₃·HCl в пересчете на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96%, практически нерастворим в хлороформе.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС "Спектрометрия в средней инфракрасной области"). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца пиридоксина гидрохлорида.

2. Спектрофотометрия (ОФС "Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях").

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,5 г субстанции, растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл испытуемого раствора А и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

Испытуемый раствор В. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл испытуемого раствора А и доводят объем раствора фосфатным буферным раствором pH 7,4 до метки.

Ультрафиолетовый спектр поглощения испытуемого раствора Б в области длин волн от 250 до 350 нм должен иметь максимум в интервале от 288 до 296 нм с удельным показателем поглощения от 425 до 445.

Ультрафиолетовый спектр поглощения испытуемого раствора В в области длин волн от 220 до 350 нм должен иметь максимумы в интервалах от 248 до 256 нм и от 320 до 327 нм с удельным показателем поглощения от 175 до 195 и от 345 до 365 соответственно.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС "Общие реакции на подлинность").

ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 50 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС "Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей").

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании "Прозрачность раствора", должен выдерживать сравнение с эталоном Y₇ (ОФС "Степень окраски жидкостей", метод 2).

pH раствора. От 2,4 до 3,0 (5% раствор, ОФС "Ионометрия", метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС "Высокоэффективная жидкостная хроматография").

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 2,72 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят pH раствора фосфорной кислотой разведенной 10% до 3,0. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мг фармакопейного стандартного образца примеси A и 2,5 мг 4-Дезоксипиридоксина гидрохлорида (примесь B), растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора водой до метки.

Примечание

Примесь A: 6-метил-1,3-дигидрофуро[3,4-c]пиридин-7-ол [5196-20-3].

Примесь B: 5-гидроксиметил-2,4-диметилпиридин-3-ол [61-67-6].

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Пиридоксин - 1 (около 12 мин), примесь A - около 1,7; примесь B - около 1,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A и B используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R_s) между пиками примеси A и примеси B должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора сравнения:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика пиридоксина должно быть не менее 20;

- относительное стандартное отклонение площади пика пиридоксина должно быть не более 5,0% (6 введений).

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (X_i) вычисляют по формуле:

где S_i - площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;

S₀ - площадь пика пиридоксина на хроматограмме раствора сравнения.

- примесь B - не более 0,15%;

- любая другая примесь - не более 0,10%;

- сумма примесей - не более 0,2%.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС "Потеря в массе при высушивании", способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС "Сульфатная зола"). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС "Тяжелые металлы" (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании "Сульфатная зола", с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС "Остаточные органические растворители".

<*> Бактериальные эндотоксины. Не более 0,4 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС "Бактериальные эндотоксины").

--------------------------------

<*> Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС "Микробиологическая чистота".

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС "Титриметрия (титриметрические методы анализа)").

Во избежание перегрева реакционной среды, титрование проводят при постоянном перемешивании и прекращают немедленно после достижения конечной точки.

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 5 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 50 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС "Потенциометрическое титрование") или с индикатором (50 мкл кристаллического фиолетового раствора 0,1%) до перехода окраски в изумрудно-зеленую.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 20,56 мг пиридоксина гидрохлорида C₈H₁₁NO₃·HCl.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.